腺病毒定量——Cell BioLabs腺病毒快速定量试剂盒

通过对腺病毒基因组的改造,腺病毒载体是继逆转录病毒载体后被广泛应用的转基因载体,现已发展到第三代,转染效率高,且相对制备容易。从最早的腺病毒载体出现至今,腺病毒载体的包装系统已经经历了一系列的改进。腺病毒载体已经被广泛应用于动物细胞的基因转染和基因治疗等。

在腺病毒的应用过程中,我们经常需要测量病毒液的病毒含量以及腺病毒滴度。目前实验里做腺病毒常规滴度检腺病毒定量——Cell BioLabs腺病毒快速定量试剂盒测有通过TCID50或者空斑计数法(PFU)测量腺病毒感染滴度的方法,但是这种传统的方法实验周期较长,操作繁琐。如常规PFU的检测就就需要10天左右的时间。Cell BioLabs的QuickTiter™腺病毒功能滴定试剂盒,采用免疫蛋白反应的原理检测腺病毒标志性外壳蛋白——Hexon的表达含量,从而得到腺病毒液的功能滴度,只需2天多的时间就能获得比常规实验所需要10天的测量结果还要准确的数据。但是即使是这样的方法,也需耗时2天,一般说来,如果已经获得了纯化的病毒液,通过测量OD260来估算病毒颗粒的总含量不失为一种快捷的多的腺病毒定量方案。

上海金畔生物科技有限公司针对腺病毒定量为您推荐美国细胞生物学专业产品制造商Cell BioLabs的QuickTiter™ Adenovirus Rapid Quantitation Kit(目录号:VPK-106)。该试剂盒的工作原理如右图所示,首先使用核酸酶将病毒悬液内的核算分子降解,然后用特异性的腺病毒捕获珠子结合腺病毒,从而分离出蛋白核酸复合物,洗脱下腺病毒后进一步降解,然后标记其病毒核酸,通过480/520 nm滤镜荧光仪下读取数据,对照腺病毒DNA标准曲线得出腺病毒滴度。

Cell BioLabs腺病毒快速定量试剂盒内包括溶液A、溶液B、溶液C、腺病毒捕获液、Dye染料以及腺病毒DNA标准物。该试剂盒不仅能直接用于已纯化的病毒悬液,对于未纯化的腺病毒,该试剂提供快速纯化试剂,您可以在纯化前通过该kit测算出病毒悬液上清中的腺病毒含量,也可以使用该Kit内的纯化试剂先进行纯化步骤。整个腺病毒定量步骤快捷,可以在45-60min内获得数据,检测灵敏。

另外,该定量试剂盒不仅能应用于腺病毒,由于是通过OD260测量核酸含量从而通过与标准曲线的比对得出腺病毒的含量,因此还能应用于其他的病毒定量。如反转录病毒,慢病毒等。 

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
QuickTiter™ Adenovirus Quantitation Kit VPK-106 荧光检测,20次测定

Cell BioLabs为您提供全套的腺病毒技术解决方案,RAPAD®腺病毒表达系统有多种样式供您选择,还有预装有多种重组基因的腺病毒供您直接使用,ViraBind™腺病毒小提及中提大提试剂盒采用了专利技术能让你获得更高滴度和纯度的腺病毒,Cell BioLabs还有转为腺病毒载体用的293AD细胞及高效转染试剂供您选择,如果您对腺病毒产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询腺病毒相关的实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

RAPAd®腺病毒表达系统——Cell BioLabs重组腺病毒载体

基因免疫和治疗是将外源目的基因转移到机体内,表达具有生物学功能的蛋白,达到免疫预防或治疗的目的。病毒载体是常用的基因导入方式之一。腺病毒载体(Adenovirus vector,Adv)、反转录病毒载体、腺病毒伴随病毒载体、单纯疱疹病毒载体、痘苗病毒载体和牛乳头瘤病毒载体等是基因免疫和治疗研究中应用较多的载体。目RAPAd®腺病毒表达系统——Cell BioLabs重组腺病毒载体前,基因治疗临床试验的40%都采用腺病毒载体。

重组腺病毒在科学研究和治疗应用领域都具有很大的潜力。同时作为作为基因转移工具相对于其他病毒载体有多方面的优势。腺病毒可感染分裂细胞和非分裂细胞,转导细胞种类多,如肺细胞、肝细胞、骨细胞、血管、肌肉、脑、中枢神经系统等。其感染细胞滴度和外源基因的表达水平较高,因此重组腺病毒被广泛应用于使用脂质体转染效率较低细胞的基因转导和蛋白表达。当腺病毒进入细胞后,病毒不与染色体发生重组重排,因此不会导致宿主细胞基因的激活和失活。最近,重组腺病毒也被应用于递送RNAi到细胞内。

目前比较成熟的制备重组腺病毒的方法主要有两种,第一种是在腺病毒包装细胞系里,通过包含有目的基因的穿梭载体和含有腺病毒骨架质粒载体(E1/E3功能限制型)之间的同源重组重组,然后使用多蚀斑分离方法分离出目的重组腺病毒,这种方法耗时耗力,一般需要12-18周的时间。第二种是使用pAdEasy系统,通过在大肠杆菌E.coli中的双同源重组功能,同源重组目的基因的穿梭载体和把含有腺病毒骨架质粒载体从而得到重组腺病毒,该方案具有很高的保真性,但是由于需要筛选大量的细胞克隆,虽然比第一种方法省略了一些操作步骤,但是也是较为费时的,整个程序约需要8-9周。

针对以上腺病毒表达系统的不足,Cell Biolabs的RAPAd®腺病毒表达系统提供了一个更快更安全的产生无RCA,且高滴度的重组腺病毒方案。该系统使用了全新的腺病毒骨架基因(缺失左侧ITR、包装信号和E1序列),无需进行pAdEasy的细菌体内的同源重组步骤,无需使用多蚀斑分离方法分离目的重组腺病毒的步骤,因此不管是操作上还是时间上都进行了很大的提升。该腺病毒表达系统较其他系统生长更快,只需要2周时间;并且大大降低了重组形成野生型可复制腺病毒的危险,无E1a,不产生复制型腺病毒。

RAPAd®腺病毒表达系统——Cell BioLabs重组腺病毒载体
通过RAPAd®腺病毒表达系统产生的重组腺病毒。PacI线性化的pacAd5 RSV-GFP载体和pacAd5 9.2-100载体共转染293细胞后,用倒置荧光显微镜观察到转染后病毒颗粒的位置。 

Cell Biolabs的RAPAd®腺病毒表达系统更易实验室人员的使用,操作方法简捷,很容易上手,并且由于对腺病毒骨架载体和穿梭载体都进行了优化,在共转染直到从病毒颗粒中分离过程中都大大简化,同时保证了高效的感染滴度。另外,在Cell Biolabs的RAPAd®腺病毒表达系统中,具有三种启动子模式供您选择。有不含有启动子的,您可以用来表达特异性启动子引导的基因,还有真核基因表达启动子RSV和强力启动子CMV供您选择。

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
RAPAd® Universal Adenoviral Expression System VPK-250 通用型腺病毒表达系统
RAPAd® RSV Adenoviral Expression System VPK-251 RSV启动子型腺病毒表达系统
RAPAd® CMV Adenoviral Expression System VPK-252 CMV启动子型腺病毒表达系统

美国著名细胞学试剂专家Cell BioLabs为您提供全套的腺病毒技术解决方案,RAPAD®腺病毒表达系统有多种样式供您选择,还有预装有多种重组基因的腺病毒供您直接使用,ViraBind™腺病毒小提及中提大提试剂盒采用了专利技术能让你获得更高滴度和纯度的腺病毒,Cell BioLabs还有转为腺病毒载体用的293AD细胞及高效转染试剂供您选择,如果您对腺病毒产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询腺病毒相关的实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

腺病毒滴度测定——Cell BioLabs腺病毒功能滴定试剂盒

1953年,Rowe等首次由人的手术切除的扁桃体组织,用血浆埋块培养分离得到一株病毒,得名腺病毒。该病毒是无囊膜的线性双链DNA病毒,腺病毒在自然界分布广泛。通过对腺病毒基因组的改造。腺病毒载体是继逆转录病毒载体后被广泛应用的转基因载体,现已发展到第三代,转染效率高,且相对制备容易。从最早的腺病毒载体出现至今,腺病毒载体的包装系统已经经历了一系列的改进。腺病毒载体已经被广泛应用于动物细胞的基因转染和基因治疗等。

在腺病毒的试验中,我们经常需要测量病毒液的病毒含量以及腺病毒滴度。目前实验里做腺病毒常规滴度检测有通过TCID50或者空斑计数法(PFU)测量腺病毒感染滴度的方法,用纯化的腺病毒通过OD260推算出的腺病毒颗粒滴度的方法等等。但是这种传统的方法,实验周期较长,如常规PFU的检测就就需要10天左右的时间,而通过OD值方案也只是推算,和腺病毒真实的活力滴度还是有一定的误差。

上海金畔生物科技有限公司针对腺病毒滴度测定实验为您推荐美国细胞生物学专业产品制造商Cell BioLabs的QuickTiter™ Adenovirus Functional Titer Kits,该Kit摒弃了传统的空斑形成试验,采用免疫蛋白反应的原理检测腺病毒标志性外壳蛋白——Hexon的表达含量,从而得到腺病毒液的功能滴度。该腺病毒滴度测定试剂盒适用性很广,可用于所有41类血清型的腺病毒。

腺病毒滴度测定——Cell BioLabs腺病毒功能滴定试剂盒

由于采用了ELISA的方法,滴定实验的时间大大缩短,同时比传统的PFU法滴定结果更为准确,实验操作上也更为快捷,只需2天多的时间就能获得比常规实验所需要10天的测量结果还要准确的数据;另外,由于不需要进行空斑形成实验,无需繁复的琼脂铺层步骤,因此也很便于实验室操作,大大方便了腺病毒使用的科研工作者。 

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
QuickTiter™ Adenovirus Titer Immunoassay Kit VPK-109 免疫印迹法检测,100次测定
QuickTiter™ Adenovirus Titer ELISA Kit VPK-110 ELISA法检测,2×96次测定

该腺病毒滴度测定试剂盒内包括hexon一抗、HRP酶联二抗、TMB/DAB底物、终止液及ad-b gal阳性对照;您也可以根据您实验的要求,选择ELISA Kit或者Immunoassay Kit其中的一种。

Cell BioLabs为您提供全套的腺病毒技术解决方案,RAPAD®腺病毒表达系统有多种样式供您选择,还有预装有多种重组基因的腺病毒供您直接使用,ViraBind™腺病毒小提及中提大提试剂盒采用了专利技术能让你获得更高滴度和纯度的腺病毒,Cell BioLabs还有转为腺病毒载体用的293AD细胞及高效转染试剂供您选择,如果您对腺病毒产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询腺病毒相关的实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

pGreenII 0800-Luc Plant Expression Vector 植物表达载体

pGreenII 0800-Luc Plant Expression Vector 植物表达载体

货号: MF3732-5UG 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

pGreenII 0800-Luc Plant Expression Vector 植物表达载体

产品信息:

货号 产品名称 规格            价格(元) 
MF3732-5UG      pGreenII 0800-Luc Plant Expression Vector植物表达载体    5μg 2400

基本信息

载体用途:          植物表达载体
载体大小: 6382bp
原核抗性: 卡那霉素(Kanamycin, Kan)
克隆菌株: DH5α
报告基因: Luc
内参基因: Rluc
启动子: CaMV 35S,T7
复制子: pSa ori,ori
载体拷贝数:
5’测序引物: M13F(-47) CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGAC
3’测序引物: GLP2 CTTTATGTTTTTGGCGTCTTCC

质粒图谱

pGreenII 0800-Luc Plant Expression Vector 植物表达载体

保存与运输方法

保存:-20℃保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   我司提供的载体/质粒/菌株都经过严格的质量控制。请收到货后先进行转化,再挑取单克隆扩增。产品使用中若遇到质量问题,请和我司及时沟通。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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规格信息

品牌:

Jinpan

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5μg

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货号: MF3725-5UG 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

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基本信息

载体用途:                

植物表达载体

载体大小:

4530bp
原核抗性:

氨苄青霉素(Ampicillin, Amp)

克隆菌株:

DH5α

荧光标记:

EGFP(绿色荧光)
启动子:

CaMV 35S

复制子:

ori

终止子:

NOS

表达水平:

载体拷贝数:

5’测序引物:

CaMV35S-f

3’测序引物:

pEGFP-N-3′

质粒图谱

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保存:-20℃保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

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