使用 dsGreen 染料进行 qPCR

使用 dsGreen 染料进行 qPCR

dsGreen 是一种非常灵敏的染料,用于检测双链 DNA (dsDNA)。两种染料均用于实时 qPCR 实验中扩增的非特异性检测。

  1. 如果 dsGreen 试剂储存温度低于 20 °С,请将其解冻并保存在室温下。为了快速解冻,可将试剂加热至 50 °С。

  2. 根据 PCR 试剂制造商的说明计算反应所需试剂的体积。请注意,dsGreen(库存 100х)必须在 PCR 主混合物中稀释至最高 1 倍浓度。

  3. 根据 PCR 试剂制造商的说明制备不含 DNA 的 1x 主混合物,添加必要量的 dsGreen。如果您使用不带热启动的 Taq 聚合酶,请将预混液和 PCR 管放在冰上。

  4. 将主混合物转移至管或板中并添加 DNA。

  5. 根据您的仪器制造商的说明继续进行放大。

笔记:

qPCR 实验中始终包含阳性和阴性对照。 qPCR 扩增的温度程序与给定模板和引物的标准 PCR 程序没有区别。对于检测,应使用 FAM 通道。为了能够区分特定产物和引物二聚体,请在 PCR 程序中使用熔解曲线步骤。

PCR基因扩增仪的选购标准

PCR基因扩增仪的选购标准

  PCR基因扩增仪,即聚合酶链式反应仪器,是分子生物学实验中*精密设备。选购PCR基因扩增仪时,需要根据实验室的具体需求、预算、以及设备的技术参数和售后服务等多方面因素进行综合考虑。
  1. 需求分析:
  首先,明确实验室的主要研究方向和实验需求。不同的研究目的可能需要不同功能的PCR仪。例如,如果实验室主要进行常规的PCR检测,那么基本的热循环仪可能就足够了;如果需要进行定量PCR分析,那么就需要购买实时荧光定量PCR仪。此外,还需考虑样本通量、实验频率和预期的扩增体积等因素。
  2. 技术参数:
  选购PCR仪时,需要关注以下几个关键技术参数:
  - 温度范围和精度:PCR仪的温度范围通常应覆盖从低温到高温的范围,且温度控制精度需达到±0.1°C或更高。
  - 升降温速度:快速升降温可以缩短实验周期,提高效率。
  - 模块均匀性:模块间温度的一致性对于提高实验结果的重复性和可靠性至关重要。
  - 软件功能:用户友好的操作界面、灵活的程序设置、数据存储和导出功能等都是需要考虑的因素。
  - 容量和通量:根据实验需求选择合适的样品容量和通量,以适应不同的实验规模。
  3. 品牌和型号:
  市场上有多种品牌的PCR基因扩增仪,如Applied Biosystems、Bio-Rad、Eppendorf、Thermo Fisher Scientific等。每个品牌都有其特点和优势,可以根据实验室的偏好和经验选择。同时,也要考虑型号的新旧和技术的成熟度。
  4. 预算:
  PCR仪的价格从几千美元到几万美元不等,因此预算是选购时的一个重要因素。在预算允许的情况下,尽可能选择性价比高的型号。同时,也要考虑长期的耗材成本和维护费用。
  5. 售后服务:
  良好的售后服务可以保障设备的正常运行和维护。了解供应商的服务网络、维修响应时间和备件供应情况是非常重要的。此外,操作培训和技术支持也是选购时需要考虑的因素。
  6. 用户反馈:
  参考其他实验室或用户的使用反馈可以帮助了解特定型号的性能和可靠性。可以通过学术会议、论坛、产品评论等途径获取这些信息。
  7. 附件和升级:
  考虑未来可能的需求变化,选择可以升级或添加附件的PCR仪,以便在未来扩展功能或提高效率。

mypols试剂:Taq 2x PCR 预混液简介

mypols试剂:Taq 2x PCR 预混液简介

Taq 2x PCR Master Mix – 即用型混合物可简化您的 PCR 设置。只需添加引物和模板,因为混合物包含成功且可靠的 PCR 的所有成分。这确保了结果的可重复性,显着减少了设置时间和移液错误的风险。 PCR 性能的稳健性允许该混合物在广泛的 PCR 扩增中应用。 

用于研究用途和进一步制造。

宽广的放大范围

扩增来自 3 ng DNA 质粒的不同大小的扩增子。在 0.8% 琼脂糖凝胶上进行 PCR 分析后,Taq DNA 聚合酶的使用产生了干净且高产量的产品。

更快的检测和更高的灵敏度

从 20 ng、2 ng、200 pg 和 20 pg 人类基因组 DNA 提取物中扩增出人类凝血因子 IIa (F2) 的片段 (64 bp)。使用来自另一家供应商的 Taq DNA 聚合酶混合物并行进行相同的实验。随后在 2.5% 琼脂糖凝胶上分析 PCR 产物。

mypols试剂:Taq 2x PCR 预混液简介

myPOLS Biotec 成立于 2014 年,最初是由德国康斯坦茨大学的科学家衍生出来的。该公司的创始人是 Ramon Kranaster 博士、Andreas Marx 教授和 Simone Marx,他们对科学的关注与高质量标准相结合。myPOLS Biotec 现已成为 Medix Biochemica 的一部分 :Medix Biochemica Group 是体外诊断 (IVD) 行业关键原材料的供应商。我们的热情是帮助 IVD 客户为全球数十亿患者提供准确的结果。

permagenlabware:0.2 mL PCR 条磁力架介绍

permagenlabware:0.2 mL PCR 条磁力架介绍

permagenlabware:0.2 mL PCR 条磁力架——专为从单个、8 或 12 条 0.2 mL PCR 管中进行磁珠分离而设计

0.2 mL PCR 条磁性分离器 24

Permagen 的 0.2 mL PCR 管磁力架设计用于从 0.2 mL 单管、8 条或 12 条 PCR 中进行磁珠分离。管子以一定角度固定,珠子将被拉到后壁,从而可以轻松抽吸,头端可以沿着管子的前壁追踪,而不会干扰珠子颗粒。可容纳任何常见的 PCR 条或单独的 PCR 管。

0.2 mL PCR 磁力分离架

这款 24 管 0.2 mL PCR 分离架非常适合所有需要强磁铁的方案,以便从 PCR 条或单个管中快速、精确地分离。

遵循更高的标准,由实心铝制成,可确保一致、很好的使用 ,坚固的 NdFeB 圆盘磁铁确保快速、精确的分离 ,倾斜的管孔可让头端轻松沿着管壁追踪,而不会意外吸入珠子

与标准 0.2 mL PCR 管兼容。单独、8 条和 12 条

使用强力 NdFeB 磁铁快速分离磁珠

工作体积高达 0.2 mL

成角度的管孔,方便移液,不会造成珠子损失

橡胶脚有助于防止在工作台上工作时打滑

Bento Lab:便携式 PCR 工作站介绍

Bento Lab:便携式 PCR 工作站介绍

Bento Lab 是一种移动基因组学装置,结合了便携式 PCR 机、微量离心机、凝胶电泳和透照仪。它可以放入任何笔记本电脑包中,因此 Bento Lab 可以随身携带您的科学成果。

Bento Lab 如何使用?

使用 Bento Lab 在现场验证您的样品,或在课堂上通过动手实践生物技术来启发您的学生。 Bento Lab 结合了分子生物学的所有基本工具,包括便携式 PCR 机、微量离心机、凝胶电泳槽和蓝色 LED 透照仪。世界各地的专业人士正在使用 Bento Lab 在威尔士识别真菌、在柬埔寨检测病原体以及在马来西亚进行环境监测。


Bento Lab Pro 或 Entry – 哪种配置适合我?

Bento Lab Entry:对于初学者来说是一个经济实惠的选择。定速离心机 (2,700 g)、定电压电泳 (50 V)、蓝光透照仪。该离心机与 1.5 mL 锥形离心管兼容,并通过适配器与 0.5 mL 和 0.2 mL 管兼容。

Bento Lab Pro:适合雄心勃勃且专业的研究和教学应用。 Thermocycler 支持降落 PCR。可变离心机(最大 8,000 g)、可变电压电泳(30 V–120 V)、蓝光透照仪。离心机与旋转柱DNA提取和纯化试剂盒兼容; 2 mL 离心管、裙边管和通过适配器的较小管;和 DNA 沉淀。

PCR热循环仪

入口

专业版

温度范围:21°C 至 99°C

温度范围:12°C至105°C,
支持着陆

模块尺寸:32 个孔,0.2 mL 管

升温速率:高达 2.5 °C/s

温度精度:编程目标的 ± 0.2 °C

温度均匀性:孔间 ± 0.5 °C

盖子温度范围:环境温度至 120 °C

内存:最多可存储100个PCR程序

离心机

固定速度:7,000 rpm

变速:3,000 – 13,500 rpm

固定 RCF:2,700 克

可变 RCF:500 – 8,000 克

模式:快速旋转或定时旋转

容量 6 x 1.5 mL 管

容量:6 x 2 mL 管

凝胶电泳

固定电压:50V

可变电压:30V – 120V

凝胶托盘尺寸:91 mm x 78 mm

凝胶体积:25 mL 凝胶,30 mL 缓冲液

孔:9孔和12孔梳

包括凝胶盒和成像罩

透照仪

表面尺寸:105 毫米 x 85 毫米

电子设计:蓝色 LED 阵列

LED 波长:468 nm(可见蓝光)。

材质:防刮亚克力塑料

系统

尺寸:330毫米*214毫米*81毫米(13英寸*8.4英寸*3.1英寸)

重量:3.5 千克/123 盎司

通用电源:110 – 240 V,47 – 63 Hz

内存 LCD 显示屏、点击拨号界面

用于软件更新和连接的 WiFi

Bento Lab 与传统热循环仪相比如何?

Bento Lab 的设计旨在匹配或超越传统热循环仪的性能。

使用行业标准珀耳帖模块控制温度,以实现高精度和高速度。 Bento Lab 珀耳帖模块专为保证热循环应用的稳健性而设计。为了准确测量温度,Bento Lab 使用铂电阻温度计,这是温度准确性和可靠性的黄金标准。

哪些 DNA 染色剂与 Bento Lab 兼容?

使用专为蓝光激发设计的绿色荧光核酸染料,避免紫外线损伤,并通过 Bento Lab 安全地可视化 DNA。

Bento Lab 与多种染料兼容,包括 GelGreen®、GreenView、SYBR Green 和 SYBR Safe。我们向初学者推荐的染色剂是 Biotium 的 GelGreen®,因为它具有更高的安全性。

耗材

Bento Lab 使用标准试剂和消耗品,从 0.2mL PCR 管到 1.5mL 微量离心管。 Bento Lab 有 32 个孔,可容纳四个 8 管条用于测序准备。