人结直肠癌细胞 (P53R)概述

人结直肠癌细胞 (P53R)概述

人结直肠癌细胞基本信息

培养基

EMEM*全培养基:90%EMEM+10%FBS

传代方法

复苏步骤:①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速没入37℃水浴锅,摇晃冻存管加速溶解,以1min内全部溶解为宜;②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL*全培养基的离心管内,1000-1200rpm离心5min,弃去上清液,用1-2mL*全培养基重悬细胞。③将细胞悬液加入到含有5-6mL*全培养基的T25瓶中,放入培养箱培养。
细胞传代:①将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处,肉眼可见细胞层脱落,即消化完成,否则继续消化),直接吸掉胰酶,加入5-6mL*全培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加适当的*全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。;④注意培养基pH值变化和细胞密度,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%-90%时,重复传代操作或者冻存。

生长条件

培养温度37℃;气体环境5%CO2+95%空气;

生长特性

贴壁生长

存储条件

液氮

安全等级

0

形态

上皮细胞样,短梭形,多角形,边缘不规则,单层贴壁生长