NEW! Cali-bio新品发布重组蛋白的技术革命——人源化细胞因子

目前,临床和实验室应用的重组人蛋白大多来源于大肠杆菌,其次是昆虫细胞、动物细胞、植物细胞等。虽然重组基因的序列是人的序列,但是翻译后折叠、修饰等功能缺乏或者与人细胞存在较大差异,同时,纯化过程中易增加异源蛋白的污染,临床应用时容易引起不良反应和体内抗体的形成,这样不仅给病人带来痛苦,而且药物的半衰期也会大大下降。

通过不断的努力和技术革新,人细胞系表达体系的成功建立,不仅可以生产出逼真的人源蛋白,尤其是表达出有活性的干细胞相关的细胞因子,这是在其他系统是无法达到的,同时也避免了异源蛋白和其他成分的污染,给医药的发展提供了很好的平台和应用前景。

几种常见重组蛋白表达系统的比较

表达系统

Human Cell

CHO Cell

Insect Cell

E.coli

蛋白折叠

++++

+++

++

+

磷酸化

++++

+++

++

?

酶加工

++++

+++

+

?

糖基化

存在差异

较差

人源化重组蛋白的优势:

1 人源表达系统

工程药物合成来源于无支原体和病毒污染,有着良好安全记录的HEK293细胞,经过长时间的筛选和比较,得到既易于转染,又能大量表达目的蛋白的细胞HEK293TS。

2 无动物源性

采用无血清( Scrum-free)、无蛋白(Protein-free)、化学成分确定(Chemically Refined)的组合培养,有效避免了血清中复杂的蛋白成分,如动物白蛋白(Albumin),动物转铁蛋自(Transferrin)、动物胰岛素( Insulin )以及类胰岛素生长因子(IGF)对细胞和终产品的污染。

3 高表达载体

创建特别适合人源细胞的高表达载体(Expression Vector),由超人源超强启动子(Human Promoter)信号肽(Humane Signal Peptide)驱动,相对于其它表达系统利用的病毒驱动子例如CMV和SV40,从安全和有效性上有了更好的保障。

4 专有的纯化手段

重组蛋白分子无标记(Tag-free),专有的春化手段步骤少,效率高。

5 低内毒素、高纯度

无异源性(Xeno-free)、无动物源性(Animal-free)、超低毒素、纯度高、无其他蛋白载体(如BSA)。

6 可大量生产,降低成本

可以大量生产细菌宿主不能表达的系列蛋自,如转化生长因子超家族系列(TGF-βsuper families)。

7.半衰期长、稳定性高

逼真的糖基化、磷酸化和正确的折叠,从而使体外的半衰期长、稳定性高。

英文品名

中文品名

货号

小包装

中包装

Recombinant Human Activin A

激活素A,人

CBS2001

5ug/1820

25ug/7748

Recombinant Human beta NGF

神经生长因子,人

CBH1001

10 µg/1315

100 µg/3792

Recombinant Human BMP-2

骨形态发生蛋白-2,人

CBH1002

10 µg/2692

100 µg/18960

Recombinant Human BMP-4

骨形成蛋白-4,人

CBH1003

10 µg/3160

100 µg/26860

Recombinant Human BMP-7

骨形成蛋白-7,人

CBH1004

10 µg/3160

100 µg/26860

Recombinant Human Cystatin C

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C,人

CBH1005

10 µg/2465

100 µg/13904

Recombinant Human EPO

促红细胞生成素,人

CBH1006

10 µg/3034

100 µg/12260

Recombinant Human FGF-4

人成纤维细胞生长因子-4,人

CBH1007

10 µg/1315

100 µg/10744

Recombinant Human FGF-7 (KGF)

人成纤维细胞生长因子-7,人

CBH1008

10 µg/3160

100 µg/18960

Recombinant Human FGF-8b

人成纤维细胞生长因子-8b,人

CBH1009

10 µg/1517

100 µg/8128

Recombinant Human FGF basic

碱性成纤维细胞生长因子,人

CBH1010

10 µg/1100

100 µg/4955

Recombinant Human FLT3 Ligand

FMS样的酪氨酸激酶3配体,人

CBH1011

10 µg/2465

100 µg/13904

Recombinant Human G-CSF

粒细胞集落刺激因子,人

CBH1012

10 µg/1959

100 µg/13082

Recombinant Human GM-CSF

粒细胞巨噬细胞集落刺激因子,人

CBH1013

10 µg/2692

100 µg/18960

Recombinant Human HGF

肝细胞生长因子,人

CBH1014

10 µg/3160

100 µg/26873

Recombinant Human HGH

生长激素,人

CBH1015

10 µg/1997

100 µg/10112

Recombinant Human HAS

血清白蛋白,人

CBH1016

100 µg/1365

1000 µg/4121

Recombinant Human IFN alpha 2A

干扰素α 2A,人

CBH1017

10 µg/2149

100 µg/13904

Recombinant Human IFN alpha 2B

干扰素α 2B,人

CBH1018

10 µg/2149

100 µg/13904

Recombinant Human IL-1 beta

白介素-1 b,人

CBH1019

10 µg/2692

100 µg/13904

Recombinant Human IL-2

白介素-2,人

CBH1020

10 µg/1896

100 µg/6320

Recombinant Human IL-3

白介素-3,人

CBH1021

10 µg/2692

100 µg/10112

Recombinant Human IL-4

白介素-4,人

CBH1022

10 µg/2692

100 µg/13904

Recombinant Human IL-6

白介素-6,人

CBH1023

10 µg/1896

100 µg/10112

Recombinant Human IL-7

白介素-7,人

CBH1024

10 µg/3160

100 µg/18960

Recombinant Human IL-9

白介素-9,人

CBH1025

10 µg/2692

100 µg/20224

Recombinant Human IL-10

白介素-10,人

CBH1026

10 µg/2692

100 µg/16432

Recombinant Human IL-12

白介素-12,人

CBH1027

10 µg/2692

100 µg/22752

Recombinant Human IL-17 (IL-17A)

白介素-17A,人

CBH1028

10 µg/1200

100 µg/9480

Recombinant Human IL-17F

白介素-17F,人

CBH1029

10 µg/1200

100 µg/9480

Recombinant Human IL-23

白介素-23,人

CBH1030

10 µg/3450.72

100 µg/20666

Recombinant Human IL-28A

白介素-28A,人

CBH1031

10 µg/2465

100 µg/17696

Recombinant Human IL-28B

白介素-28B,人

CBH1032

10 µg/2465

100 µg/17696

Recombinant Human IL-29

白介素-29,人

CBH1033

10 µg/2465

100 µg/17696

Recombinant Human LEFTY-1

左右决定因子-1,人

CBH1034

10 µg/3729

100 µg/26860

Recombinant Human M-CSF

巨噬细胞集落刺激因子,人

CBH1035

10 µg/2616

100 µg/16432

Recombinant Human Noggin

头蛋白,人

CBS2003

50ug/2028

250ug/9308

Recombinant Human OSM

抑癌蛋白M,人

CBH1036

10 µg/2692

100 µg/16432

Recombinant Human PDGFaa

血小板衍生生长因子aa,人

CBH1037

10 µg/2692

100 µg/13778

Recombinant Human Pleiotrophin(PTN)

多效生长因子,人

CBH1038

10 µg/1517

100 µg/7584

Recombinant Human Pro IGF-II

胰岛素样生长因子II前体,人

CBH1039

10 µg/1200

100 µg/5056

Recombinant Human SCF

干细胞因子,人

CBH1040

10 µg/2692

100 µg/22120

Recombinant Human TGF beta 1

转化生长因子β1,人

CBS2005

5ug/2070

25ug/7790

Recombinant Human TGF beta 2

转化生长因子β2,人

CBH1041

5 µg/2692

100 µg/27808

Recombinant Human TGF beta 3

转化生长因子β3,人

CBH1042

5 µg/2692

100 µg/27808

Recombinant Human TNF alpha

肿瘤坏死因子α,人

CBH1043

10 µg/1264

100 µg/8216

Recombinant Human TPO

血小板生成素,人

CBH1044

10 µg/3160

100 µg/26860

Recombinant Human VEGF121

血管内皮细胞生长因子121,人

CBH1045

10 µg/2692

100 µg/20666

Recombinant Human VEGF165

血管内皮细胞生长因子165,人

CBH1046

10 µg/2692

100 µg/20666

WNT-3a, Human

CBS2006

5ug/2548

25ug/11388

WNT-3a, Mouse

CBS2007

5ug/2028

25ug/9412

WNT-5a, Human

CBS2008

5ug/3588

25ug/14508

WNT-5a, Mouse(mouse cell line)

CBS2009

5ug/2548

25ug/11908

Cali-Bio 坐落于美国加州,是全球领先的集研发、生产、销售于一体的高科技生物技术公司,主要产品涉及抗体、细胞因子、免疫检测试剂盒与分子生物学产品等,并为全世界范围提供全方位的服务包括:抗体定制、多肽合成、 Oligo 合成及测序服务。

长期以来,Cali-bio的细胞因子以高性价比深受广大科研工作者的青睐,为感谢广大客户对Cali-bio的产品的支持与厚爱,上海金畔生物科技有限公司现以低于市场价促销,并在此基础上赠送各种好礼真诚回馈广大客户。美国Cali-bio专业技术团队潜心专注重组蛋白的研发与生产,普通细胞因子以原核E. coli来源为主,还有真核表达Sf9、CHO、Yeast等来源,品质可靠,且价格实惠。近年来经过精心研发,推出最新产品——人源化细胞因子,来源于优良、高效表达系统HEK293TS细胞,具有比普通细胞因子更高的纯度与活性等特点,尤其适用于细胞免疫应答、肿瘤发生机理研究、细胞治疗研究、干细胞诱导研究等。

Expresso®克隆及表达系统

    蛋白表达是指用模式生物如:细菌、酵母、动物细胞或者植物细胞表达外源基因蛋白的一种分子生物学技术,在基因工程中占据有核心地位。蛋白表达系统主要由宿主,外源基因,载体以及辅助成分构成。其中,宿主及载体的选择在成功表达目的蛋白上起着举足轻重的地位。 美国Lucigen公司成立于1998年,主要从事于生命科学领域相关产品的研发,该公司在分子生物学领域处于领导地位。该公司主要致力于基因克隆,蛋白表达等核心分子生物学试剂产品的研发与生产,并且获得了用户的一致好评。针对蛋白表达系统,Lucigen公司推出了一种新型的克隆表达系统。

该系统的优点主要有:Expresso®克隆及表达系统
1.节约时间。该系统为您提供处理好的载体及感受态细胞,无需连接步骤,可供客户直接使用,和传统的克隆相比,很大程度上缩短了实验所需时间。
2.无需连接酶。直接将目的片段和载体混合,通过重组可得到含有目的基因的载体。
3.蛋白表达的精确控制。根据客户自己需求,可以通过诱导系统精确控制N-his或C-his标签蛋白的表达。
4.两个启动子可供选择。该系统具有两种载体,两种启动子供选择,T7和Rhamnose,根据客户实验需要,选择适合的启动子。
5.增加蛋白溶解度。该系统还为您提供一种携带有SUMO标签的质粒,该标签可以增加目的蛋白的溶解度。为了不影响您实验,该SUMO标签是可切割的。

该系统具有的两种启动子载体有各自的感受态细胞。T7启动子所对应的表达载体能够高表达目的蛋白,T7表达系统是一个双宿主表达系统,即包含HI-Control 10G Competent cell和HI-Control BL21 Competent cell两种感受态细胞。该载体的表达主要用于通过IPTG诱导的蛋白高表达。

Rhamnose表达系统是一个单宿主表达系统。即质粒的扩增和蛋白的表达在同一种感受态细胞里可完成。该体统的蛋白表达是可调节的。通过控制rhamnose的浓度来实现目的蛋白的不同水平的表达。但是这个载体系统所对应的蛋白表达水平比T7载体更低,主要用于某些毒性蛋白或者不溶蛋白的过表达。

Product Cat.No
Expresso® Rhamnose , C-His 49012
Expresso® Rhamnose , N-His 49011
Expresso® Rhamnose , N/C-His Combo, 5 reaction of each of N-His and C-His 49010
Expresso® Rhamnose SUMO 49013
Expresso® T7 , N-His 49001
Expresso® T7 , C-His 49002
Expresso® T7 , N/C-His Combo, 5 reaction of each of N-His and C-His 490001
Expresso® T7, SUMO 49003

注:以上产品均包含预处理好的质粒及感受态细胞,以及其他试剂。如有不清楚,欢迎来电咨询。

另外,Lucigen公司的特色产品还包括CloneSmart®平端克隆试剂盒、BigEasy®线性克隆系统、pEZSeq™平端克隆试剂盒、ClonePlex™ AK文库构建试剂盒、DNA Terminator ®末端修复试剂盒、EconoTaq® DNA聚合酶及E.cloni感受态细胞等。上海金畔生物科技有限公司作为Lucigen在中国地区的一级代理商,可以为您提供更低的价格,更好的服务。如果你对上述相关产品或技术敢兴趣,可以直接拨打021-50837765 到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的最优产品和解决方案,或索取相关手册和资料。我们会为您做的更多!

StabyTM Codon T7 蛋白表达系统——稀有密码子蛋白的无抗生素表达系统

StabyTM Codon T7 蛋白表达系统——稀有密码子蛋白的无抗生素表达系统目前生物医药研究和生物技术生产的主要方法是利用外源表达系统来表达目的蛋白,常用的外源表达系统有大肠杆菌表达系统,酵母表达系统,哺乳动物表达系统等。要实现目的基因在外源表达系统中的成功表达和尽可能地提高其表达量,可以通过增加目的基因剂量,目的基因密码子优化,改善培养条件等方法实现,其中目的基因密码子优化起到关键的作用。如果目的基因的密码子与表达宿主不匹配,则会降低mRNA的翻译效率和稳定性,甚至会造成mRNA翻译的提前终止。目前可以通过两个途径来解决这个问题:①提高宿主表达系统中低丰度的tRNA;②对目的基因进行密码子改造,使它的密码子是宿主表达系统的高频密码子,也就是通常所说的密码子优化。

StabyTM Codon T7 kit特别设计的pSCodon1载体可表达6个大肠杆菌稀有密码子tRNA,包括AUA,AGG,AGA,CUA,CCC和GGA。结合T7高效启动子以及Staby特有的无抗生素的ccdAB筛选系统,可以直接用于高效表达含稀有密码子的各类蛋白,不再需要进行密码子改造工作。

试剂盒组份

(1) pSCodon vector DNA,

(2) CYS21 competent bacteria for cloning,

(3) SE1 competent bacteria for expression,

(4) regeneration medium,

(5) sequencing primers,

(6) expression control,

(7) instruction manual.

感受态细胞可以单独购买,均有电转化和化学转化2种类型的产品可以选择,电转效率要明显高于化学转化。

产品优势

(1)具有StabyExpress的所有优点。

(2)对包含有稀有密码子的异源蛋白可以保证高表达量,而不再需要对核酸序列进行定点突变。

(3)不需要额外的质粒。

操作步骤

1. 将目的基因克隆入pSCodon载体

2. 转化CYS21获得正确的构建(不建议直接转化表达菌株,因为表达菌株中T7及目的蛋白的本底表达将显著降低质粒提取效率)

3. 重组质粒转化SE1菌株

4. 诱导表达(IPTG诱导表达,由于StabyExpressTM系统可显著降低菌体蛋白的表达,对T7 RNA聚合酶或目的蛋白的表达没有任何改变,因此可直接使用原有的T7诱导条件进行表达,或直接使用Delphi提供的StabyTM Switch medium进行小量表达)

相关产品信息

货号

品名

规格

GE-SCT7-0505

StabyCodons T7 expression kit, electro-competent

5 RXN

GE-SCT7-0707

StabyCodons T7 expression kit, chimio-competent

5 RXN

GE-SCT7-1010

StabyCodons T7 expression kit, electro-competent

10 RXN

GE-SCT7-1212

StabyCodons T7 expression kit, chimio-competent

10 RXN

上海金畔生物科技有限公司作为Delphi中国大陆以及香港和澳门地区的独家代理,全面供应其所有产品,包括StabyCloning™ PCR克隆系统(StabyCloning™ kit)、StabyExpress™ T7蛋白表达系统(StabyExpress™ T7 kit)、Cherry™ 蛋白表达系统(Cherry™ Express/Codon kit)、StabyCodon™ T7蛋白表达系统(StabyCodon™ T7 kit)、GetStaby™ kit以及相关感受态细胞(Competent Cells)。欢迎致电021-50837765或021-63599871了解更多产品信息以及专利相关事宜。