StabyTM Codon T7 蛋白表达系统——稀有密码子蛋白的无抗生素表达系统

StabyTM Codon T7 蛋白表达系统——稀有密码子蛋白的无抗生素表达系统目前生物医药研究和生物技术生产的主要方法是利用外源表达系统来表达目的蛋白,常用的外源表达系统有大肠杆菌表达系统,酵母表达系统,哺乳动物表达系统等。要实现目的基因在外源表达系统中的成功表达和尽可能地提高其表达量,可以通过增加目的基因剂量,目的基因密码子优化,改善培养条件等方法实现,其中目的基因密码子优化起到关键的作用。如果目的基因的密码子与表达宿主不匹配,则会降低mRNA的翻译效率和稳定性,甚至会造成mRNA翻译的提前终止。目前可以通过两个途径来解决这个问题:①提高宿主表达系统中低丰度的tRNA;②对目的基因进行密码子改造,使它的密码子是宿主表达系统的高频密码子,也就是通常所说的密码子优化。

StabyTM Codon T7 kit特别设计的pSCodon1载体可表达6个大肠杆菌稀有密码子tRNA,包括AUA,AGG,AGA,CUA,CCC和GGA。结合T7高效启动子以及Staby特有的无抗生素的ccdAB筛选系统,可以直接用于高效表达含稀有密码子的各类蛋白,不再需要进行密码子改造工作。

试剂盒组份

(1) pSCodon vector DNA,

(2) CYS21 competent bacteria for cloning,

(3) SE1 competent bacteria for expression,

(4) regeneration medium,

(5) sequencing primers,

(6) expression control,

(7) instruction manual.

感受态细胞可以单独购买,均有电转化和化学转化2种类型的产品可以选择,电转效率要明显高于化学转化。

产品优势

(1)具有StabyExpress的所有优点。

(2)对包含有稀有密码子的异源蛋白可以保证高表达量,而不再需要对核酸序列进行定点突变。

(3)不需要额外的质粒。

操作步骤

1. 将目的基因克隆入pSCodon载体

2. 转化CYS21获得正确的构建(不建议直接转化表达菌株,因为表达菌株中T7及目的蛋白的本底表达将显著降低质粒提取效率)

3. 重组质粒转化SE1菌株

4. 诱导表达(IPTG诱导表达,由于StabyExpressTM系统可显著降低菌体蛋白的表达,对T7 RNA聚合酶或目的蛋白的表达没有任何改变,因此可直接使用原有的T7诱导条件进行表达,或直接使用Delphi提供的StabyTM Switch medium进行小量表达)

相关产品信息

货号

品名

规格

GE-SCT7-0505

StabyCodons T7 expression kit, electro-competent

5 RXN

GE-SCT7-0707

StabyCodons T7 expression kit, chimio-competent

5 RXN

GE-SCT7-1010

StabyCodons T7 expression kit, electro-competent

10 RXN

GE-SCT7-1212

StabyCodons T7 expression kit, chimio-competent

10 RXN

上海金畔生物科技有限公司作为Delphi中国大陆以及香港和澳门地区的独家代理,全面供应其所有产品,包括StabyCloning™ PCR克隆系统(StabyCloning™ kit)、StabyExpress™ T7蛋白表达系统(StabyExpress™ T7 kit)、Cherry™ 蛋白表达系统(Cherry™ Express/Codon kit)、StabyCodon™ T7蛋白表达系统(StabyCodon™ T7 kit)、GetStaby™ kit以及相关感受态细胞(Competent Cells)。欢迎致电021-50837765或021-63599871了解更多产品信息以及专利相关事宜。