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PureXtract RNAsol RNA 分离溶液介绍

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PureXtract RNAsol RNA 分离溶液介绍

PureXtract RNAsol RNA 分离溶液

目录号：R6101-010

规格: 100ml

描述

PureXtract RNAsol 是一种完整的即用型 试剂，用于从人类、动物、植物、酵母、细菌和 病毒来源的样品 中分离总 RNA 或 同时 分离 RNA、DNA 和蛋白质 。


PureXtract RNASol 将苯酚和硫氰酸 胍结合在单相溶液中，以促进 即时且有效的 RNA 分离方法 。


它分离出全谱的 RNA 分子，而 其他方法分离的 RNA 中很少观察到，可能会 人为地改变 mRNA 组成。 


整个过程可在 1 小时内完成， 未降解 mRNA 的回收率 比其他 RNA 分离方法高 30-150%。 PureXtract  RNAsol 从多种生物材料（包括动物和植物组织） 中分离出高质量的 RNA 
富含多糖和蛋白聚糖。

2-8℃保存

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norgenbiotek唾液RNA收集和保存装置怎么样

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norgenbiotek唾液RNA收集和保存装置怎么样

Norgen的唾液RNA收集和保存设备旨在1）简单和非侵入性的唾液收集和2）在环境温度下保存唾液样本中的RNA。唾液样本通过在收集漏斗内吐痰来收集，该收集漏斗已与收集管组装在一起。在收集到所需体积的唾液后，取下收集漏斗，然后加入防腐剂安瓿的内容物并与收集的唾液混合。唾液收集管随后被送到实验室进行RNA分离和分析。保存样品中的唾液RNA在室温下可稳定长达2个月。该试剂盒是收集和保存RNA样本进行流行病学和人群研究的理想选择。

特点和优势

保存的RNA在室温下可稳定长达2个月 

样品收集和保存在一个方便的套件中 样本没有传染性，

可以在环境温度下安全处理和运输 

非侵入性、用户友好的收集，

适合自我收集 

省事且经济高效-无需冷藏运输/储存 

与RNA分离方法兼容 

保存与任何下游应用兼容的高质量RNA 

提供CE-IVD标记版本

使用 LumiZol 试剂快速分离 RNA、DNA 和蛋白质

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使用 LumiZol 试剂快速分离 RNA、DNA 和蛋白质

LumiZol Reagent 设计用于从各种来源（植物、动物、细菌和酵母）的细胞和组织样品中快速分离 RNA、DNA 和蛋白质。 LumiZol Reagent 是一种含有苯酚、异硫氰酸胍以及分离高质量核酸和蛋白质所需的其他成分的溶液。苯酚和异硫氰酸胍可裂解细胞并有效抑制核糖核酸酶，从而保持 RNA 完整。均质化并添加氯仿后，样品分离成上层水相、中间相和下层有机相。 RNA 可以用异丙醇从上相沉淀，而 DNA 和蛋白质可以分别用乙醇和异丙醇从中间相和下层有机相沉淀。

用于 RNA、DNA 和蛋白质分离的样品：

  • 植物和动物组织——30-100毫克；

  • 贴壁真核细胞 — 1×10 5至 1×10<sup7< sup=”” style=”box-sizing: border-box;”>;

  • 悬浮真核细胞、酵母 — 5×10 6至 10×10 6；

  • 细菌细胞 — 1×10 7。

RNA分离

使用新鲜或液氮速冻样品以获得最佳 RNA 分离效果。在 LumiZol 试剂中均质化之前，请勿解冻样品。

  1. 根据您的起始材料在 LumiZol 试剂中裂解样品：

    • 组织：在 1 mL LumiZol 试剂中匀浆组织样本，并将匀浆转移至新的 1.5 mL 管中。

    • 细胞：弃去培养基，用 0.5–1 mL LumiZol 试剂重悬细胞沉淀或单层细胞，然后将裂解物转移至新的 1.5 mL 试管中。

  2. （可选）如果样品脂肪含量高，则将裂解液在 4 °C 下以 12,000 × g 离心 5 分钟，然后将上清液转移至新的 1.5 mL 管中。

  3. 将管在室温下孵育 5 分钟。

  4. 向裂解液中添加 0.2 mL 氯仿（每 1 mL 用于裂解的 LumiZol 试剂），通过翻转管充分混合，并在室温下孵育 2 分钟。

  5. 将管在 4°C 下以 12,000 × g 离心 15 分钟。离心后，混合物分成两相：无色水相和黄色有机相，其间有中间相。

  6. 将上层水相转移至新的 1.5 mL 管中，不要接触间相。如果样品中RNA的量非常少，则在水相中添加共沉淀剂。保留有机相和界面用于 DNA 和蛋白质提取。

  7. 向水相中加入0.8体积的异丙醇，充分混合，并在室温下孵育10分钟。

  8. 将管在 4°C 下以 12,000 × g 离心 10 分钟。

  9. 弃去上清液，向 RNA 沉淀中加入 1 mL 70% 乙醇，充分混匀，并在 4 °C 下以 7,500 × g离心管 5 分钟。

  10. 弃去上清液，将 RNA 沉淀风干 5-10 分钟。

  11. 将 RNA 沉淀溶解在 50–100 μL 无 RNase 水中。

DNA分离

  1. 除去“RNA 分离”部分步骤 5 中获得的界面上的任何剩余水相。

  2. 向界面相和有机相中添加 0.3 mL 100% 乙醇（每 1 mL 《RNA 分离》步骤 1 中使用的 LumiZol 试剂），通过翻转管混合，并在室温下孵育 2-3 分钟。

  3. 将管在 4 °C 下以 2,000 × g 离心 5 分钟。将上清液转移至新的 1.5 mL 管中。上清液可用于后续的蛋白质提取。

  4. 将 DNA 沉淀重悬于 1 mL 柠檬酸钠/乙醇溶液（10% 乙醇中的 0.1 M 柠檬酸钠，pH 8.5）中。

  5. 孵育 30 分钟，偶尔混合。

  6. 将管在 4 °C 下以 2,000 × g 离心 5 分钟。丢弃上清液。

  7. 再重复一次步骤 4-6。

  8. 将 1 mL 70% 乙醇添加到 DNA 沉淀中，充分混匀，然后在 4 °C 下以 2,000 × g离心管 5 分钟。

  9. 弃去上清液，将 DNA 沉淀风干 5-10 分钟。

  10. 将 DNA 沉淀重悬于 0.3–0.6 mL 的 8 mM 氢氧化钠中。

  11. 将管在 4 °C 下以 12,000 × g 离心 10 分钟，将上清液转移至新的 1.5 mL 管中，并用 Tris-HCl 缓冲液将 pH 调节至 7–8 [添加 5 μL 1 M Tris-HCl 缓冲液（pH 4.5）至300μL DNA溶液]。

蛋白质分离

  1. 向《DNA 分离》部分第 3 步获得的上清液中添加 1.5 mL 异丙醇（每 1 mL 《RNA 分离》步骤 1 中使用的 LumiZol 试剂），通过翻转管充分混合，并孵育 10分钟在室温下。

  2. 将管在 4°C 下以 12,000 × g 离心 10 分钟。丢弃上清液。

  3. 将蛋白质沉淀重新悬浮在 2 mL 盐酸胍/乙醇溶液（0.3 M 盐酸胍于 95% 乙醇中）中。

  4. 将管在室温下孵育 20 分钟。

  5. 将管在 4 °C 下以 7,500 × g 离心 5 分钟。丢弃上清液。

  6. 再重复步骤 3-5 两次。

  7. 向蛋白沉淀中加入 2 mL 100% 乙醇，充分混匀，室温孵育 20 分钟。

  8. 将管在 4 °C 下以 7,500 × g 离心 5 分钟。丢弃上清液。

  9. 将蛋白质沉淀风干 5-10 分钟。

  10. 将蛋白质沉淀溶解在含有 SDS 的缓冲液中（例如，用于将蛋白质样品加载到聚丙烯酰胺凝胶上的样品缓冲液）。