X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷
货号: MF2001-5G 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
描述
X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷
搜索关键词:
X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷,IPTG,β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal),蓝白斑筛选,CAS:7240-90-6
产品信息:
产品名称
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产品编号 |
规格 |
价格(元) |
X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷
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MF2001-1G |
1g |
368 |
X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷 |
MF2001-5G |
5g |
1468
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X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷 |
MF2001-25G |
25g |
5148 |
产品描述:
X-Gal,英文全名5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-beta-D-galactopyranoside,中文全名5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷,CAS NO:7240-90-6,是β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal)的组织化学显色底物,能被水解生成半乳糖和5-溴-4-氯-3-羟基吲哚。5-溴-4-氯-3-羟基吲哚是一种可溶、无色的吲哚水解产物,随后通过二聚合和氧化反应,被转化为一不可溶蓝色产物-5,5’-二溴-4,4’-二氯靛蓝。
X-Gal是分子生物克隆实验中用来检测β-gal活性的一种主流试剂,可用来检测外源DNA是否插入质粒DNA的lacZ区。当外源DNA成功插入lacZ区,会破坏β-gal的α-互补,导致其活性丧失,则无法水解X-Gal使得菌落呈白色。而保留β-gal正常活性的细菌能产生蓝色菌落。许多其它应用也常将X-Gal用作底物来检测β-gal活性,这些应用包括:1)β-gal-抗体连接的免疫分析和免疫组化;2)基于β-gal诱导的大肠杆菌噬菌体检测;3)肿瘤进展微转移形成的检测。
X-Gal常常与IPTG(货号:MF2002-5G)联合使用进行蓝白斑克隆筛选。本品达分子生物学级别。
基本特性:
1)CAS NO:7240-90-6
2)英文同义名:5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside; X-b-D-Galactoside; BCIG;X-Gal;
3)分子式:C14H15BrClNO6
4)分子量:408.63 g/mol
5)纯度:≥99%
6)外观:白色至类白色或无色粉末
7)溶解性:溶于DMF(20mg/ml),DJPO
8)化学结构:
保存与运输方法
保存:-20℃避光干燥保存,2年有效。
运输:冰袋运输。
使用方法
1. X-Gal储存液配制
称取0.2g X-Gal装入15ml离心管,加入10ml DMF,震荡使其充分溶解。按照1ml/管分装,并用铝箔纸包裹离心管使其避光,置于-20℃冻存,正常情况下6-12个月稳定。
2. IPTG储存液配制
称取0.238g IPTG(货号:MF2002-5G)溶于10ml去离子水中,充分溶解混匀后,经0.22μm滤膜过滤除菌,即得到100mM(100×)的储存液。按照1ml/管分装,置于-20℃冻存,高达一年稳定。
3. 蓝白斑筛选方法
X-Gal常与IPTG联合使用进行蓝白斑克隆筛选。
方法1:X-Gal、IPTG加入固体培养基(推荐)
1)高压灭菌已加琼脂的培养基,并冷却到50℃左右;
2)每ml培养基内加入10μl 20mg/ml X-gal溶液、10μl 100mM IPTG(使其终浓度达到1mM);
3)加入适量筛选抗生素如氨苄青霉素,卡那霉素,羧苄青霉素等;
4)混匀后倒板,置于无菌超净台内使培养基凝固(通常需要30min)。
【注意】:蓝白斑筛选用的平板请置于4℃避光保存,1周稳定。
5)将转化的感受态细胞涂布到上述平台,于37℃倒置培养过夜,观察蓝白斑情况。
方法2:X-Gal、IPTG直接涂布平板表面
1)于无菌超净台内干燥倒好的平板;
2)加120μl 20mg/ml X-gal溶液、40μl 100mM IPTG到平板表面,并涂布均匀覆盖整个平板;
3)于无菌超净台内干燥上述平板,至少需要30min;
4)将转化的感受态细胞涂布到上述平台,于37℃倒置培养过夜,观察蓝白斑情况。
注意事项
1)X-gal的首选溶剂为DMF。若使用DJPO作为溶剂,选择相对新鲜且高质量的DJPO极为重要,持续性的研究发现由于使用旧或低质量DJPO造成很多问题。建议大部分实验都用DMF作为溶剂。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关产品:
货号
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产品名称 |
规格 |
价格(元) |
MF2002-5G
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IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 |
5g |
195 |
MF2002-10G |
IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 |
10g |
350
|
MF2002-100G |
IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 |
100g |
1800
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— — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/JP金畔所有】
规格信息
品牌: |
Jinpan
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CAS: |
7240-90-6
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规格: |
5×1g
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货期: |
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