上海金畔社生物科技有限公司日本同仁化学dojindo全线产品代理 中国代理商
特点:
● 可用于SA-β-gal活性的定量和多个样品的评估
● 使用酶标仪检测
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● 使用酶标仪检测
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GAL4 Antibody 货号: CY7043-100ul 品牌: Abways 标签: 一抗
品牌: |
Abways |
---|---|
CAS: |
N/A |
规格: |
100ul |
货期: |
3天 |
x-alpha-gal简介
X- α -Gal 是一种显色底物,可用于证明α-半乳糖苷酶活性。 Glycosynth 以具有竞争力的价格提供高纯度 (>98%) 的产品。
酵母双杂交筛选是一种检测体内 蛋白质-蛋白质相互作用的基因测定。该方法由 Stan Fields 教授及其同事 (1) 开发,可用于研究两种已知蛋白质的相互作用(例如定义对相互作用至关重要的结构域或氨基酸)。另一个重要的应用是
通过筛选文库来鉴定以前未知的特定蛋白质的结合配偶体
。
通过激活报告基因转录的能力来选择阳性克隆,使营养缺陷型酵母双杂交菌株能够在营养选择性培养基上生长。大多数双杂交方法还使用大肠杆菌 lacZ基因作为第二个报告基因。通常,在第二次筛选中,通过耗时的滤膜提升测定法来测定选择平板上生长的菌落的报告基因lacZ的激活情况。或者,在产生α-半乳糖苷酶的酵母菌株中,显色底物 X- a -Gal 可用于测定GAL4-直接基于营养选择板的两种杂交相互作用 (2)。
X- a -Gal 是 β-半乳糖苷酶(也称为蜜二糖酶或 α-D-半乳糖苷半乳糖水解酶,EC 3.2.1.22)的显色底物,这种
酶使酵母能够在生长或发酵过程中使用二糖蜜二糖作为碳源。在酿酒酵母中,这种 酶由MEL1基因 编码,该基因受多个 GAL基因的调节。该酶响应GAL4 激活而分泌,导致 X- a水解– 培养基中的半乳糖导致酵母菌落呈现蓝色。该报告系统的一大优点是它消除了对β-半乳糖苷酶过滤提升测定的需要,并且结果可以立即在选择板上看到。
X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷
货号: MF2003-25MG 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷
产品标签
X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷;α-半乳糖苷酶 a-galactosidase;MEL1基因;GAL4酵母双杂交系统;蓝白斑筛选;CAS:107021-38-5;
产品信息:【高纯度进口原料,≥98%(TLC),现货供应,国内各科研单位不二的选择】。
货号 |
产品名称 |
CAS NO. | 规格 | 价格(元) |
MF2003-25MG |
X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷 | 107021-38-5 | 25mg | 285 |
MF2003-100MG | X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷 | 107021-38-5 | 100mg |
800 |
MF2003-250MG | X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷 | 107021-38-5 | 250mg |
1500 |
MF2003-1ML | X-α-Gal Solution (20mg/ml) | 107021-38-5 | 1ml |
428 |
产品描述
X-α-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷,CAS:107021-38-5),一种用来检测α-半乳糖苷酶(也称为蜜二糖酶,α-D-半乳糖苷半乳糖水解酶,EC 3.2.1.22)活性的显色底物。X-α-Gal的使用,避开双杂交分析中β-半乳糖苷酶溶液制备和滤膜提升实验(filter-lift assay)的繁琐操作,只需直接添加在培养基上,通过蓝色沉淀的生成与否,即可用来检测双杂交相互作用。X-α-Gal可用来区分肠杆菌科内的不同物种以及划分乳酸菌和双歧杆菌。组织学研究中,X-α-Gal还可借助光学显微镜来检测组织的α-半乳糖苷酶活性。
利用α-半乳糖苷酶水解二糖-蜜二糖作为碳源,酵母菌得以正常生长或进行发酵。酿酒酵母菌内,该酶由几种GAL基因调控的MEL1基因所编码。一旦GAL4激活,α-半乳糖苷酶分泌,之后水解培养基上的X-α-Gal,使得菌落产生蓝斑。酵母双杂交研究用的工程菌包括AH109,PJ69-2A,Y190和Y187。
我司提供两种形式的产品,达分子生物学级,高纯(>98%TLC):
一种以冻干粉形式提供,货号为:MF2003-25MG,MF2003-100MG和MF2003-500MG。
一种以溶于DMF的储存液形式提供,浓度为20mg/ml,货号为:MF2003-1ML。
产品特性
1)CAS NO:107021-38-5
2)化学名:5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-α-D-galactopyranoside5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷;X-α-D-Galactoside X-α-D-半乳糖苷;
3)分子式:C14H15BrClNO6
4)分子量:408.64g/mol
5)纯度:≥98%(TLC)
6)外观:白色或近白色结晶粉末
7)溶解性:溶于DMF(20 mg/ml)
8)化学结构式:
保存与运输方法
保存:粉末-20℃避光干燥保存,2年有效。
运输:冰袋运输。
使用方法
方法1:直接倒入固体培养基
方法2:涂布于预制培养平板上
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
酵母单(双杂交)研究相关产品
一、富集培养基(Rich Medium酵母培养)
货号 | 名称 | 规格 | 价格(元) |
JP6301-350G | YPD Agar Medium YPD琼脂培养基 | 350g | 550 |
JP6302-250G | YPD Medium YPD液体培养基 | 250g | 438 |
JP6303-350G | YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基 | 350g | 550 |
JP6304-250G | YPDA Medium YPDA液体培养基 | 250g | 438 |
二、基本培养基(Minimal Medium酵母培养)
货号 | 名称 | 规格 | 价格(元) |
JP6311-467G | Minimal SD Agar Base SD琼脂基础培养基 | 467g | 1428 |
JP6312-267G | Minimal SD Base SD基础培养基 | 267g | 768 |
JP6313-270G | Minimal SD Agar Base Gal/Raf SD琼脂基础培养基(含半乳糖/棉子糖) | 270g | 1428 |
JP6314-185G | Minimal SD Base Gal/Raf SD基础培养基(含半乳糖/棉子糖) | 185g | 988 |
三、省却成分氨基酸混合物(DO Supplements酵母培养)
类型 | 名称 | 货号 | 规格 | 价格(元) |
Single Dropout Supplements (SDO)
单一省却成分添加剂 |
DO Supplement -His | JP6316-10G | 10g | 418 |
DO Supplement -Leu | JP6317-10G | 10g | 418 | |
DO Supplement -Trp | JP6318-10G | 10g | 418 | |
DO Supplement -Ura | JP6319-10G | 10g | 418 | |
Double Dropout Supplements (DDO)
双省却成分添加剂 |
DO Supplement -His/-Leu | JP6320-10G | 10g | 418 |
DO Supplement -His/-Ura | JP6321-10G | 10g | 418 | |
DO Supplement -Leu/-Trp | JP6322-10G | 10g | 418 | |
DO Supplement -Met/-Trp | JP6323-10G | 10g | 418 | |
DO Supplement -Trp/-Ura | JP6324-10G | 10g | 418 | |
DO Supplement -Trp/-His | JP6325-10G | 10g | 418 | |
DO Supplement -Ura/-Leu | JP6326-10G | 10g | 418 | |
Triple Dropout Supplements (TDO)
三省却成分添加剂 |
DO Supplement -His/-Leu/-Trp | JP6331-10G | 10g | 418 |
DO Supplement -His/-Leu/-Ura | JP6332-10G | 10g | 418 | |
DO Supplement -His/-Trp/-Ura | JP6333-10G | 10g | 418 | |
DO Supplement -Leu/-Met/-Trp | JP6334-10G | 10g | 418 | |
DO Supplement -Leu/-Trp/-Ura | JP6335-10G | 10g | 418 | |
Quadruple Dropout Supplements (QDO)
四省却成分添加剂 |
DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp | JP6341-10G | 10g | 418 |
DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp | JP6342-10G | 10g | 418 | |
DO Supplement -His/-Leu/-Trp/-Ura | JP6343-10G | 10g | 418 |
四、筛选抗生素(底物)
货号 | 名称 | 规格 | 价格(元) |
JP0002-1ML | Aureobasidin A(AbA)金担子素A(1 mg/ml) | 1ml | 1100 |
MF2003-25MG | X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷 | 25mg | 285 |
五、酵母质粒提取试剂盒
货号 | 名称 | 规格 | 价格(元) |
D3376-01 | 酵母质粒抽提试剂盒Yeast Plasmid Kit(Omega Biotek) | 50次 | 495 |
六、酵母转化试剂盒
货号 | 名称 | 规格 | 价格(元) |
MF2501-200T | Yeast Transformation Kit 酵母转化试剂盒 | 200T | 768 |
— — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/JP金畔所有】
品牌: |
Jinpan |
---|---|
CAS: |
107021-38-5 |
规格: |
25mg |
货期: |
咨询客服 |
X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷
货号: MF2001-5G 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学
X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷
搜索关键词:
X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷,IPTG,β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal),蓝白斑筛选,CAS:7240-90-6
产品信息:
产品名称 |
产品编号 | 规格 | 价格(元) |
X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷 |
MF2001-1G | 1g | 368 |
X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷 | MF2001-5G | 5g |
1468 |
X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷 | MF2001-25G | 25g | 5148 |
产品描述:
X-Gal,英文全名5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-beta-D-galactopyranoside,中文全名5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷,CAS NO:7240-90-6,是β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal)的组织化学显色底物,能被水解生成半乳糖和5-溴-4-氯-3-羟基吲哚。5-溴-4-氯-3-羟基吲哚是一种可溶、无色的吲哚水解产物,随后通过二聚合和氧化反应,被转化为一不可溶蓝色产物-5,5’-二溴-4,4’-二氯靛蓝。
X-Gal是分子生物克隆实验中用来检测β-gal活性的一种主流试剂,可用来检测外源DNA是否插入质粒DNA的lacZ区。当外源DNA成功插入lacZ区,会破坏β-gal的α-互补,导致其活性丧失,则无法水解X-Gal使得菌落呈白色。而保留β-gal正常活性的细菌能产生蓝色菌落。许多其它应用也常将X-Gal用作底物来检测β-gal活性,这些应用包括:1)β-gal-抗体连接的免疫分析和免疫组化;2)基于β-gal诱导的大肠杆菌噬菌体检测;3)肿瘤进展微转移形成的检测。
X-Gal常常与IPTG(货号:MF2002-5G)联合使用进行蓝白斑克隆筛选。本品达分子生物学级别。
基本特性:
1)CAS NO:7240-90-6
2)英文同义名:5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside; X-b-D-Galactoside; BCIG;X-Gal;
3)分子式:C14H15BrClNO6
4)分子量:408.63 g/mol
5)纯度:≥99%
6)外观:白色至类白色或无色粉末
7)溶解性:溶于DMF(20mg/ml),DJPO
8)化学结构:
保存与运输方法
保存:-20℃避光干燥保存,2年有效。
运输:冰袋运输。
使用方法
1. X-Gal储存液配制
称取0.2g X-Gal装入15ml离心管,加入10ml DMF,震荡使其充分溶解。按照1ml/管分装,并用铝箔纸包裹离心管使其避光,置于-20℃冻存,正常情况下6-12个月稳定。
2. IPTG储存液配制
称取0.238g IPTG(货号:MF2002-5G)溶于10ml去离子水中,充分溶解混匀后,经0.22μm滤膜过滤除菌,即得到100mM(100×)的储存液。按照1ml/管分装,置于-20℃冻存,高达一年稳定。
3. 蓝白斑筛选方法
X-Gal常与IPTG联合使用进行蓝白斑克隆筛选。
方法1:X-Gal、IPTG加入固体培养基(推荐)
1)高压灭菌已加琼脂的培养基,并冷却到50℃左右;
2)每ml培养基内加入10μl 20mg/ml X-gal溶液、10μl 100mM IPTG(使其终浓度达到1mM);
3)加入适量筛选抗生素如氨苄青霉素,卡那霉素,羧苄青霉素等;
4)混匀后倒板,置于无菌超净台内使培养基凝固(通常需要30min)。
【注意】:蓝白斑筛选用的平板请置于4℃避光保存,1周稳定。
5)将转化的感受态细胞涂布到上述平台,于37℃倒置培养过夜,观察蓝白斑情况。
方法2:X-Gal、IPTG直接涂布平板表面
1)于无菌超净台内干燥倒好的平板;
2)加120μl 20mg/ml X-gal溶液、40μl 100mM IPTG到平板表面,并涂布均匀覆盖整个平板;
3)于无菌超净台内干燥上述平板,至少需要30min;
4)将转化的感受态细胞涂布到上述平台,于37℃倒置培养过夜,观察蓝白斑情况。
注意事项
1)X-gal的首选溶剂为DMF。若使用DJPO作为溶剂,选择相对新鲜且高质量的DJPO极为重要,持续性的研究发现由于使用旧或低质量DJPO造成很多问题。建议大部分实验都用DMF作为溶剂。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关产品:
货号 |
产品名称 | 规格 | 价格(元) |
MF2002-5G |
IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | 5g | 195 |
MF2002-10G | IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | 10g |
350 |
MF2002-100G | IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | 100g |
1800 |
— — Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/JP金畔所有】
品牌: |
Jinpan |
---|---|
CAS: |
7240-90-6 |
规格: |
5×1g |
货期: |
咨询客服 |