用内质网染色剂对活细胞进行染色 LumiTracker ER

用内质网染色剂对活细胞进行染色 LumiTracker ER

LumiTracker ER Green 和 LumiTracker ER Red 具有细胞渗透性,对内质网 (ER) 染色剂具有高度选择性,可用于活细胞成像。两种 ER 染色剂都是 BDP 染料与格列本脲(格列本脲)偶联的衍生物。格列本脲与 ATP 敏感钾通道 (K ATP ) 的磺酰脲 (SUR) 受体结合,该受体在内质网上很突出。

用甲醛固定后,染色部分保留。 LumiTracker ER Green 和 LumiTracker ER Red 不适合对固定后的细胞进行染色。

注意:格列本脲的药理活性可能会影响 ER 功能。某些特殊细胞类型中磺脲类受体的可变表达可能会导致非 ER 标记。

溶液的制备

1.1 库存溶液的制备

  • 将 50 μg LumiTracker ER Green 溶解在 64 μL DMSO 中,以获得 1 mM 储备溶液。

  • 将 50 μg LumiTracker ER Red 溶解在 55 μL DMSO 中,以获得 1 mM 储备溶液。

注意:我们建议将储备溶液储存在−20°C或−80°C避光条件下。避免反复冻融循环。

1.2 工作液的配制

用钙和镁 (HBSS/Ca/Mg) 在 Hank's 平衡盐溶液中稀释 LumiTracker ER 染色剂的储备溶液,以获得工作溶液。使用 100 nM 至 1 μM 的浓度。 LumiTracker ER 染色剂的稀释度取决于细胞类型和密度,应通过实验确定。

细胞染色

2.1 悬浮细胞染色

  1. 1000 g离心细胞悬液 3-5 分钟;弃去上清液。

  2. 用预热的 HBSS 在 37°C 下清洗细胞两次,每次 5 分钟。

  3. 推荐的细胞密度为1×10 6 个细胞/mL。

  4. 将 1 mL 预热的 LumiTracker ER 工作溶液添加到管中,并在 37 °C 和 5% CO 2下孵育细胞 15-30 分钟

  5. 室温下以 400 g离心细胞 3-4 分钟;弃去上清液。

  6. 用培养基清洗染色细胞两次。

  7. 用无血清细胞培养基或 PBS 重悬细胞。

  8. 通过流式细胞仪分析细胞。

  9. 对于荧光显微镜,将一滴染色的细胞悬浮液转移到载玻片上。用盖玻片盖住细胞。

2.2 贴壁细胞染色

  1. 在无菌盖玻片上培养细胞。

  2. 贴壁细胞可以直接在盖玻片上染色。

  3. 从盖玻片中吸出介质。

  4. 用 37°C 预热的 HBSS 冲洗细胞。

  5. 加入 100 μL 预热的 LumiTracker ER 工作溶液,轻轻摇动以全覆盖细胞。在 37 °C 和 5% CO 2下孵育细胞 15-30 分钟

  6. 用培养基清洗染色细胞两次。

  7. 如果通过流式细胞术检测,则需要在染色前重悬细胞。

  8. 对于荧光显微镜,将带有染色细胞的盖玻片翻转到载玻片上,将它们放置在载玻片和盖玻片之间。

细胞固定

  1. 如果要固定染色的细胞,请在 4% 甲醛中于 4 °C 下孵育 2 分钟。

  2. 固定细胞用 PBS 清洗两次,每次 5 分钟。

  3. 使用封固剂将细胞封固在盖玻片下

FoldHelper™ -ER3#H6


FoldHelper™ -ER3

简要描述:FoldHelper™ -ER3,产品类型:#H6。
单位尺寸:2 毫升,5×10 7 pfu/ml

详细介绍

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

FoldHelper™ -ER3,产品类型:#H6。

FoldHelper™ -ER3,重组杆状病毒原液

单位尺寸:2 毫升,5×10 7 pfu/ml

规格:过表达钙网蛋白以促进 ER 中的糖蛋白折叠

过表达 PDI 以促进富含半胱氨酸的蛋白质的折叠

过表达 PPI 以促进富含脯氨酸的蛋白质中酰亚胺键的异构化

用于监测病毒传播的 GFP 标记

上海金畔生物代理Abvector中国的业务,Abvector代理、Abvector上海代理、Abvector华南代理、Abvector华东代理、Abvector华西代理、Abvector华北代理,上海金畔生物科技有限公司专业代理进口品牌实验产品供应,欲购从速(敬请咨询。)


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ER-Tracker Red (BODIPY TR Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网红色荧光探针(活细胞成像用)

ER-Tracker Red (BODIPY TR Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网红色荧光探针(活细胞成像用)

货号: JP4353-100UL 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

ER-Tracker Red, for live-cell imaging

内质网红色荧光探针

产品标签

ER-Tracker Red; ER-Tracker Green; ER-Tracker Blue-White DPX;BODIPY™ TR Glibenclamide;格列本脲;DiOC6(3);CAS: 53213-82-4;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格(元)
ER-Tracker Red (BODIPY™ TR Glibenclamide), for live-cell imaging

内质网红色荧光探针(活细胞成像用)

JP4353-20UL 20µl 1648
JP4353-100UL 5×20µl 7188

【温馨提示1】:见我司集奇生物整理得溶酶体荧光探针(Lysotracker and Lysosensor)产品专题。

【温馨提示2】:见我司集奇生物整理得线粒体荧光探针(Mitotracker)产品专题。

产品描述

ER-Tracker dyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料,高度选择性结合内质网(ER)。不同于传统的内质网染料DiOC6(3),该系列染料极少染色线粒体,且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后,可以保留部分的活细胞染色特征。

ER-Tracker Red是一种药物的荧光偶联物,即BODIPY™ TR标记的格列苯脲(BODIPY™ TR Glibenclamide)。格列本脲,又名优降糖(Glyburide),是一种磺酰脲类口服降糖药,用来调查胰岛素β细胞活性和胰岛素分泌,以及研究心肌细胞功能和心律失常。格列本脲能够结合内质网上突出的ATP敏感性钾通道(KATP)的磺脲类受体。格列本脲的药理学活性可能影响内质网功能。某些特定细胞上磺脲类受体的可变表达可能引起非内质网标记。BODIPY™ TR是Invitrogen (Molecular Probe)公司开发的BODIPY™荧光染料之一,最大激发/发射波长~587/615nm,光谱特性类似于传统的Texas Red,与检测该染料的标准滤片兼容。

本品为DJPO储存液,浓度为1mM。用于活细胞内质网染色,建议工作浓度约为1µM,需根据实际情况做优化调整。按照说明书的标准步骤操作,活细胞染色后用甲醛等固定可保留部分染色效果。

产品特性

1) 分子式:C44H42BClF2N6O7S2

2) 分子量:915.2316

3) 外观:液体

4) Ex/Em:587/615nm (in methanol)

5) 检测滤片:TRITC

6) 化学结构式:ER-Tracker Red (BODIPY TR Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网红色荧光探针(活细胞成像用)

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光干燥保存,至少6个月有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 整个染色过程中需注意避光。

2) ER-Tracker Red(1mM)在4℃,冰浴等较低温度下会凝固而粘附在离心管官底、管壁或管盖内,可将置于25℃水浴温育片刻直至全部融解后使用。对于微量液体,每次使用前低速离心使得液体全部沉降至管底,再开盖使用。

3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

以下实验方案是根据牛肺动脉内皮细胞(BPAE)优化所得,且已验证适用于其他常规细胞系的染色。建议以下步骤仅作起始实验的参考,请根据具体的细胞类型和实际情况来优化标记条件。

1. 试剂准备

ER-Tracker Red以1mM的DJPO储存液形式提供,使用前请将ER-Tracker Red 从冰箱内取出,确保回温至室温或于25℃水浴温育直至完全融解,经短暂离心将所有溶液沉到管底。第一次使用将储存液根据单次用量分装,≤-20ºC避光干燥保存。

2. 细胞染色

2.1 制备染色工作液:将1mM ER-Tracker Red稀释至工作浓度,建议工作浓度~1µM。为了最小化染料过高引起的假象,建议使用能达到实验目的的最低浓度来完成染色。【注意】:在含Ca2+/Mg2+ 的Hank’s 平衡盐溶液(HBSS/Ca/Mg, Cat# JP3501-500ML)内进行染色可得到最佳结果。

2.2 细胞染色:对于贴壁细胞,吸除培养基,用HBSS清洗细胞,加入预热的染料工作液,37℃孵育15-30min。吸除染色液,加入不含探针的新鲜培养基,并在荧光显微镜下观察细胞。如果细胞需要固定,请跳转到步骤3。

3. 细胞固定

3.1 固定细胞:用4%甲醛于37℃固定细胞2min。

3.2 清洗和观察细胞:固定后,用合适缓冲液清洗2次,每次5min。之后可进一步染色或滴加抗荧光淬灭剂封片后观察。不建议进行透化处理,因用Triton X-100做透化处理会导致荧光信号消失。

染色示例

ER-Tracker Red (BODIPY TR Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网红色荧光探针(活细胞成像用)

Fig 1.Tubulin in a live bovine pulmonary artery endothelial cell labeled with TubulinTracker Green reagent.

Endoplasmic reticulum was visualized with red-fluorescent ER-Tracker Red reagent, and the nucleus was stained with blue-fluorescent Hoechst 33342.

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JP4353-20UL ER-Tracker Red (BODIPY™ TR Glibenclamide), for live-cell imaging

内质网红色荧光探针(活细胞成像用)

20µl 1648

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

5×20μl

货期:

咨询客服

ER-Tracker Red (BODIPY TR Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网红色荧光探针(活细胞成像用)

ER-Tracker Red (BODIPY TR Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网红色荧光探针(活细胞成像用)

货号: JP4353-20UL 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

ER-Tracker Red, for live-cell imaging

内质网红色荧光探针

产品标签

ER-Tracker Red; ER-Tracker Green; ER-Tracker Blue-White DPX;BODIPY™ TR Glibenclamide;格列本脲;DiOC6(3);CAS: 53213-82-4;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格(元)
ER-Tracker Red (BODIPY™ TR Glibenclamide), for live-cell imaging

内质网红色荧光探针(活细胞成像用)

JP4353-20UL 20µl 1648
JP4353-100UL 5×20µl 7188

【温馨提示1】:见我司集奇生物整理得溶酶体荧光探针(Lysotracker and Lysosensor)产品专题。

【温馨提示2】:见我司集奇生物整理得线粒体荧光探针(Mitotracker)产品专题。

产品描述

ER-Tracker dyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料,高度选择性结合内质网(ER)。不同于传统的内质网染料DiOC6(3),该系列染料极少染色线粒体,且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后,可以保留部分的活细胞染色特征。

ER-Tracker Red是一种药物的荧光偶联物,即BODIPY™ TR标记的格列苯脲(BODIPY™ TR Glibenclamide)。格列本脲,又名优降糖(Glyburide),是一种磺酰脲类口服降糖药,用来调查胰岛素β细胞活性和胰岛素分泌,以及研究心肌细胞功能和心律失常。格列本脲能够结合内质网上突出的ATP敏感性钾通道(KATP)的磺脲类受体。格列本脲的药理学活性可能影响内质网功能。某些特定细胞上磺脲类受体的可变表达可能引起非内质网标记。BODIPY™ TR是Invitrogen (Molecular Probe)公司开发的BODIPY™荧光染料之一,最大激发/发射波长~587/615nm,光谱特性类似于传统的Texas Red,与检测该染料的标准滤片兼容。

本品为DJPO储存液,浓度为1mM。用于活细胞内质网染色,建议工作浓度约为1µM,需根据实际情况做优化调整。按照说明书的标准步骤操作,活细胞染色后用甲醛等固定可保留部分染色效果。

产品特性

1) 分子式:C44H42BClF2N6O7S2

2) 分子量:915.2316

3) 外观:液体

4) Ex/Em:587/615nm (in methanol)

5) 检测滤片:TRITC

6) 化学结构式:ER-Tracker Red (BODIPY TR Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网红色荧光探针(活细胞成像用)

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光干燥保存,至少6个月有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 整个染色过程中需注意避光。

2) ER-Tracker Red(1mM)在4℃,冰浴等较低温度下会凝固而粘附在离心管官底、管壁或管盖内,可将置于25℃水浴温育片刻直至全部融解后使用。对于微量液体,每次使用前低速离心使得液体全部沉降至管底,再开盖使用。

3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

以下实验方案是根据牛肺动脉内皮细胞(BPAE)优化所得,且已验证适用于其他常规细胞系的染色。建议以下步骤仅作起始实验的参考,请根据具体的细胞类型和实际情况来优化标记条件。

1. 试剂准备

ER-Tracker Red以1mM的DJPO储存液形式提供,使用前请将ER-Tracker Red 从冰箱内取出,确保回温至室温或于25℃水浴温育直至完全融解,经短暂离心将所有溶液沉到管底。第一次使用将储存液根据单次用量分装,≤-20ºC避光干燥保存。

2. 细胞染色

2.1 制备染色工作液:将1mM ER-Tracker Red稀释至工作浓度,建议工作浓度~1µM。为了最小化染料过高引起的假象,建议使用能达到实验目的的最低浓度来完成染色。【注意】:在含Ca2+/Mg2+ 的Hank’s 平衡盐溶液(HBSS/Ca/Mg, Cat# JP3501-500ML)内进行染色可得到最佳结果。

2.2 细胞染色:对于贴壁细胞,吸除培养基,用HBSS清洗细胞,加入预热的染料工作液,37℃孵育15-30min。吸除染色液,加入不含探针的新鲜培养基,并在荧光显微镜下观察细胞。如果细胞需要固定,请跳转到步骤3。

3. 细胞固定

3.1 固定细胞:用4%甲醛于37℃固定细胞2min。

3.2 清洗和观察细胞:固定后,用合适缓冲液清洗2次,每次5min。之后可进一步染色或滴加抗荧光淬灭剂封片后观察。不建议进行透化处理,因用Triton X-100做透化处理会导致荧光信号消失。

染色示例

ER-Tracker Red (BODIPY TR Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网红色荧光探针(活细胞成像用)

Fig 1.Tubulin in a live bovine pulmonary artery endothelial cell labeled with TubulinTracker Green reagent.

Endoplasmic reticulum was visualized with red-fluorescent ER-Tracker Red reagent, and the nucleus was stained with blue-fluorescent Hoechst 33342.

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内质网红色荧光探针(活细胞成像用)

20µl 1648

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

20μl

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ER-Tracker Green (BODIPY FL Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网绿色荧光探针(活细胞成像用)

ER-Tracker Green (BODIPY FL Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网绿色荧光探针(活细胞成像用)

货号: JP4352-100UL 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

ER-Tracker Green, for live-cell imaging 内质网绿色荧光探针

产品标签

ER-Tracker Green; ER-Tracker Blue-White DPX;BODIPY™ FL Glibenclamide;格列本脲;DiOC6(3);CAS: 53213-82-4;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格(元)

ER-Tracker Green (BODIPY™ FL Glibenclamide), for live-cell imaging

内质网绿色荧光探针(活细胞成像用)

JP4352-20UL 20µl 1388
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【温馨提示1】:见我司集奇生物整理得溶酶体荧光探针(Lysotracker and Lysosensor)产品专题。

【温馨提示2】:见我司集奇生物整理得线粒体荧光探针(Mitotracker)产品专题。

产品描述

ER-Tracker dyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料,高度选择性结合内质网(ER)。不同于传统的内质网染料DiOC6(3),该系列染料极少染色线粒体,且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后,可以保留部分的活细胞染色特征。

ER-Tracker Green是一种药物荧光偶联物,即BODIPY™ FL标记的格列苯脲(BODIPY™ FL Glibenclamide)。格列本脲,又名优降糖(Glyburide),是一种磺酰脲类口服降糖药,用来调查胰岛素β细胞活性和胰岛素分泌,以及研究心肌细胞功能和心律失常。格列本脲能够结合内质网上突出的ATP敏感性钾通道(KATP)的磺脲类受体。格列本脲的药理学活性可能影响内质网功能。某些特定细胞上磺脲类受体的可变表达可能引起非内质网标记。BODIPY™ FL是Invitrogen (Molecular Probe)公司开发的BODIPY™荧光染料之一,最大激发/发射波长~504/511nm,光谱特性类似于传统的FITC,与检测该染料的标准滤片兼容。

本品为DJPO储存液,浓度为1mM。用于活细胞内质网染色,建议工作浓度约为1µM,需根据实际情况做优化调整。按照说明书的标准步骤操作,活细胞染色后用甲醛等固定可保留部分染色效果。

产品特性

1) 分子式:C37H42BClF2N6O6S

2) 分子量:783.0952

3) 外观:液体

4) Ex/Em:504/511nm (in methanol)

5) 检测滤片:FITC

6) 化学结构式:ER-Tracker Green (BODIPY FL Glibenclamide), for live-cell imaging  内质网绿色荧光探针(活细胞成像用)

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光干燥保存,至少6个月有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 整个染色过程中需注意避光。

2) ER-Tracker Green(1mM)在4℃,冰浴等较低温度下会凝固而粘附在离心管官底、管壁或管盖内,可将置于25℃水浴温育片刻直至全部融解后使用。对于微量液体,每次使用前低速离心使得液体全部沉降至管底,再开盖使用。

3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

以下实验方案是根据牛肺动脉内皮细胞(BPAE)优化所得,且已验证适用于其他常规细胞系的染色。建议以下步骤仅作起始实验的参考,请根据具体的细胞类型和实际情况来优化标记条件。

1. 试剂准备

ER-Tracker Green以1mM的DJPO储存液形式提供,使用前请将ER-Tracker Green 从冰箱内取出,确保回温至室温或于25℃水浴温育直至完全融解,经短暂离心将所有溶液沉到管底。第一次使用将储存液根据单次用量分装,≤-20ºC避光干燥保存。

2. 细胞染色

2.1 制备染色工作液:将1mM ER-Tracker Green稀释至工作浓度,建议工作浓度~1µM。为了最小化染料过高引起的假象,建议使用能达到实验目的的最低浓度来完成染色。【注意】:在含Ca2+/Mg2+ 的Hank’s 平衡盐溶液(HBSS/Ca/Mg, Cat# JP3501-500ML)内进行染色可得到最佳结果。

2.2 细胞染色:对于贴壁细胞,吸除培养基,用HBSS清洗细胞,加入预热的染料工作液,37℃孵育15-30min。吸除染色液,加入不含探针的新鲜培养基,并在荧光显微镜下观察细胞。如果细胞需要固定,请跳转到步骤3。

3. 细胞固定【选做,固定只能保留部分荧光信号】

3.1 固定细胞:用4%甲醛于37℃固定细胞2min。

3.2 清洗和观察细胞:固定后,用合适缓冲液清洗2次,每次5min。之后可进一步染色或滴加抗荧光淬灭剂封片后观察。不建议进行透化处理,因用Triton X-100做透化处理会导致荧光信号消失。

染色示例

ER-Tracker Green (BODIPY FL Glibenclamide), for live-cell imaging  内质网绿色荧光探针(活细胞成像用)

Fig 1.Live bovine pulmonary artery endothelial cells labeled with ER-Tracker Green and MitoTracker Red

CJPRos.Organelle staining of live bovine pulmonary artery endothelial cells. Endoplasmic reticulum was labeled with ER-Tracker Green; mitochondria were visualized with MitoTracker Red CJPRos

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20µl 1648

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品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

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5×20μl

货期:

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