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过氧化氢酶（Catalase, CAT）活性分析——Cell BioLabs氧化损伤系列

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自由基(Free Radical)是一种带有未配对电子的粒子。因为带有单数电子，所以非常不稳定，具有高度的化学反应性，很容易和周遭的分子反应，使安定分子也变成自由基。如此一再重复，就会衍生大量的自由基。自由基能引起蛋白质变性和交联，使体内的许多酶及激素失去生物活性，同时还能破坏核酸结构和导致整个机体代谢失常等，最终使机体发生病变。一般的条件下人体细胞内也存在着清除自由基、抑制自由基反应的体系，它们有的属于抗氧化酶类，有的属于抗氧化剂。如超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, SOD）、过氧化氢酶（Catalase, CAT）等。

在细胞氧化损伤的研究中，对于细胞内活性氧基团和抗氧化剂的检测常常是一个非常重要的指标，因其直接反应细胞的状态。上海金畔生物科技有限公司向您推荐美国著名细胞试剂专家Cell Biolabs的相关产品，对于抗氧化酶和抗氧化剂的检测，其OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay（过氧化物歧化酶活性分析）和OxiSelect™ Catalase 过氧化氢酶（Catalase, CAT）活性分析——Cell BioLabs氧化损伤系列Activity Assay Kit（过氧化氢酶活性分析）试剂盒为氧化应激研究中，细胞内两种重要的过氧化物酶的检测提供了快捷的检测方案。另外，在细胞分子水平上检测细胞内生物大分子的抗氧化能力，可由OxiSelect™ ORAC and HORAC Activity Assay Kits通过ORAC指标（氧基抗氧化能力）和HORAC指标（羟基抗氧化能力）反应出来。

过氧化氢酶（CAT）是过氧化物酶体的标志酶,存在于红细胞及某些组织内的过氧化物体中，它的主要作用就是催化H2O2分解为H2O与O2，使得H2O2不致于与O2在铁螯合物作用下反应生成非常有害的-OH: 2H2O2 → O2 + 2H2O。过氧化氢酶（CAT）是一种酶类清除剂，它可促使H2O2分解为分子氧和水，清除体内的过氧化氢，从而使细胞免于遭受H2O2的毒害，是生物防御体系的关键酶之一。

Cell Biolabs的OxiSelect™ Catalase Activity Assay试剂盒（货号：STA-341）主要包括两个反应，第一个是过氧化氢酶（CAT）催化H2O2的歧化，即两个H2O2先后与CAT相遇且碰撞在活性中心上，发生反应歧化反应生成两个H2O和一个氧气分子。CAT的浓度越高，分解速度越快。该反应非常迅速，在一分钟内即可完成，可以通过叠氮化钠终止反应。经过该歧化反应后。剩下的过氧化氢反应混合产物物能促进第二个反应的发生，即与DHNS和HRP标记的AAP发生进一步的反应。通过醌亚胺染料显色后在520nm波长下测量最终数值，该数值与反应混合物内剩余的过氧化氢数量相关。

产品名称 货号 产品说明（点击查看说明书）
OxiSelect™ Catalase Activity Assay Kit STA-341 比色法检测，96次分析

Cell Biolabs的OxiSelect™ Catalase Activity Assay过氧化氢酶活性分析试剂盒通过一个可信的方案快速检测，细胞裂解液、血浆、血清以及组织匀浆中的CAT活性。每个试剂盒内包含空白样、CAT标准对照，能完成100次96孔板检测或50次微型离心管CAT活性检测。

上海金畔生物科技有限公司向您推荐Cell BioLabs完整的细胞氧化损伤检测方案，其产品覆盖上述最重要的DNA/RNA损伤分析产品，为您提供最优的检测方案。除了常见的AP位点分析以及8-OHdG/8-OHG定量分析，还有基于单细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析等。除了DNA/RNA损伤，还包括脂质过氧化过程中壬烯(HNE)、丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a（8-Isoprostane）ELISA分析检测试剂盒；对于蛋白质的羰基化、硝基化以及终末氧化蛋白产物分析等蛋白氧化损伤检测方案；针对活性氧基团和抗氧化剂的活力检测，也由多种试剂和试剂盒供您选择。如果您对以上产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

鸡过氧化氢酶（CAT）酶联免疫分析试剂盒

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鸡过氧化氢酶（CAT）酶联免疫分析试剂盒

  • 产品型号：
  • 简要描述：鸡过氧化氢酶（CAT）酶联免疫分析试剂盒金畔生物公司供应：ELISA试剂盒,荧光定量PCR耗材，移液器吸嘴，微量离心管，进口冻存管，细胞培养皿，培养板，培养瓶，吸头，仪器及手套，色谱耗材，针头过滤器。
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  • 产品简介

鸡过氧化氢酶（CAT）酶联免疫分析试剂盒
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T
0.6 U/L -16 U/L
使用目的：
本试剂盒用于测定鸡原代肝细胞样本中过氧化氢酶（CAT）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡过氧化氢酶（CAT）水平。用纯化的鸡过氧化氢酶（CAT）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢酶（CAT），再与 HRP标记的过氧化氢酶（CAT）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在   HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧化氢酶（CAT）呈正相关。用酶标仪在  450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡过氧化氢酶（CAT）浓度。
鸡过氧化氢酶（CAT）酶联免疫分析 试剂盒组成

鸡过氧化氢酶（CAT）酶联免疫分析试剂盒
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因   NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.  标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

鸡过氧化氢酶（CAT）酶联免疫分析试剂盒
2.  加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl（样品最终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
4. 配液：将 30倍浓缩洗涤液用蒸馏水  30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30秒后弃去，如此重复 5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液    50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后 15分钟以内进行。
鸡过氧化氢酶（CAT）酶联免疫分析试剂盒操作程序总结：

鸡过氧化氢酶（CAT）酶联免疫分析试剂盒
计算
以标准物的浓度为横坐标， OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与  OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，样品的 OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．鸡过氧化氢酶（CAT）酶联免疫分析 试剂盒请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本  OD值大于标准品孔第一孔的 OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：2-8℃。
2．有效期：6个月