抗体蛋白纯化的简介

抗体蛋白纯化的简介

单克隆和多克隆抗体是基础研究和新药发现的常用工具。抗体类生物制剂在新治疗制剂中的占比也在不断上升。利用蛋白A、蛋白G和蛋白L交联介质进行亲和色谱分析在实验室级、工艺级和工业级纯化蛋白分离和生产工作流程中发挥着重要作用。 

琼脂糖珠和亲和凝胶

琼脂糖珠和亲和凝胶可让蛋白A或蛋白G交联到琼脂糖珠上,从而纯化抗体。这类树脂适于各类大小规模的纯化,例如重力流柱纯化、批量低速离心处理以及低压色谱流程。EZview™亲和凝胶掺入了一种红色染料,让用户可以轻松区分沉淀物与上清液区,减少批量纯化过程中的蛋白质损失。免疫沉淀试剂盒包含亲和凝胶、微量离心柱和裂解试剂,专用于从免疫沉淀物中大程度回收蛋白质。

FAST FLOW SEPHAROSE™和FAST FLOW琼脂糖树脂

Fast Flow Sepharose™和Fast flow琼脂糖采用比标准琼脂糖珠树脂承压能力更高的高度交联琼脂糖珠或凝胶。非常适合快速液相色谱 (FPLC) 蛋白纯化方法,建议用于大中规模抗体纯化。

PUREPROTEOME™ 磁珠系统

PureProteome™蛋白A、蛋白G和蛋白A / G磁珠可用于从血清、血浆或细胞培养上清液样品等复杂基质中快速、可重现地纯化免疫球蛋白。只需利用磁力架或磁力平台从洗涤和洗脱成分中分离磁珠,即可纯化出蛋白。此系统同时适合单微量离心管的低通量应用或全自动的高通量应用。

CYTIVA™ AMERSHAM色谱柱和填料

现有多种Cytiva™ Amersham色谱填料可从不同来源纯化单克隆和多克隆抗体。

  • GraviTrap™色谱柱是填料重力流色谱柱,可从细胞培养上清液及生物体液中快速、高效地手动纯化单克隆和多克隆抗体及抗体片段。

  • SpinTrap™ 色谱柱是一次性填料离心色谱柱,用于简单的小规模抗体纯化或特定蛋白质富集。

  • HiTrap™ HP色谱柱预填料蛋白A或蛋白G Sepharose™高效树脂,适用于常规制备级纯化各类单克隆和多克隆抗体(如人IgG)。HiTrap™ MabSelect 色谱柱预填料MabSelect树脂(生物工艺填料),可从大量样品中捕获单克隆抗体 (Mabs)。

  • MultiTrap™ 96孔滤板可采用适合离心或真空过滤、手动或自动化系统的96孔过滤板,快速、可靠地小规模纯化抗体或富集目标蛋白。

  • HiScreen™ Capto L色谱柱预填料Capto L(生物工艺亲和色谱树脂),可用于捕获抗体和抗体片段,如Fab片段、单链可变区片段(scFv)和结构域抗体 (Dabs)。HiScreen™ Capto L色谱柱可用于工艺开发平台。这类色谱柱是方法优化和参数筛选的选择。

  • HiScreen™ MabSelect™ 色谱柱预填料MabSelect™树脂,是来自Cytiva的工艺开发平台的一部分。MabSelect™树脂是一种生物工艺树脂,可从大量样品中捕获单克隆抗体。这类色谱柱是单克隆抗体捕获方法优化和参数筛选的选择。

  • Protein A和 Protein G Mag Sepharose™填料由基于琼脂糖的磁珠组成,可通过免疫沉淀或pull-down作用简化目标蛋白富集,适于从血清和细胞上清液中快速、小规模纯化和筛选单克隆和多克隆抗体。

  • GammaBind和GammaBind Plus Sepharose™是蛋白G亲和色谱树脂,可纯化各物种的免疫球蛋白(IgGs),适于从任意生物体液或细胞培养基中分析和纯化各类和亚类免疫球蛋白,以及免疫球蛋白片段。这种树脂非常适合免疫沉淀程序。

  • Protein A和Protein G Sepharose™、Sepharose™ Fast Flow、Capto L和MabSelect™树脂也可单独用于除垢程序。

什么是钙卫蛋白?

什么是钙卫蛋白?

钙卫蛋白是一种相当小的蛋白质,约占中性粒细胞胞质的 60%。当免疫系统因微生物或真菌感染而被激活时,它会释放到周围环境,并用于诊断炎症性肠病 (IBD),以将其与功能性肠易激综合征 (IBS) 区分开来。它还常规用于 IBD 患者的随访,以预测复发或确定对治疗的反应。

钙卫蛋白是一种非特异性生物标志物,例如更常用的C反应蛋白(CRP);然而,该蛋白质的稳定性、稳健性和无需合成的局部释放使其成为 IBD 的生物标志物。因此,该蛋白质可以并且已经用于多种疾病的诊断和随访。 


钙卫蛋白Flexi

钙卫蛋白是一种 36 千道尔顿的钙和锌结合蛋白,由多形核中性粒细胞、单核细胞和鳞状上皮细胞(正常皮肤除外)产生。粪便中钙卫蛋白的浓度测量是一种非侵入性客观指标;它可用于确定疾病活动性和对 IBD 治疗的反应,并判断何时达到真正的缓解。还可以分析血清和血浆样本中的钙卫蛋白,在患有细菌感染、脓毒症和类风湿性关节炎 (RA) 和系统性红斑狼疮 (SLE) 等炎症性疾病的患者中发现了高钙卫蛋白水平。

建议将钙卫蛋白 Flexi 测定设置为 3 步夹心测定,其中包含的抗体具有作为捕获和检测器的一定功能,以确保检测粪便提取物或血浆样品中天然钙卫蛋白的最佳特异性。推荐的检测设计也已用于 Calpro AS(Svar Life Science 集团公司成员)开发的其他诊断测试中。推荐的 Gyrolab ® 检测方案如下所述,允许使用 Svar Life Science 的专有抗体进行自动钙卫蛋白定量。

Qkine重组激活素 A 蛋白Qk001


Qkine重组激活素 A 蛋白

简要描述:重组激活素 A 用于干细胞维持许多人诱导多能干细胞和人胚胎干细胞系3 的多能性,并诱导干细胞分化为定形内胚层4 和其他细胞命运。Qkine 重组激活素 A 蛋白已在干细胞培养和其他检测中得到广泛验证。Qkine重组激活素 A 蛋白

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品牌 其他品牌 货号 Qk001
供货周期 一个月
  • Qkine重组激活素 A 蛋白供应

  • Qkine重组激活素 A 蛋白

  • 重组人激活素 A 蛋白的生物活性成熟结构域,残基 311-426,( Uniprot: P08476 )

  • 26 kDa(二聚体)

  • 在大肠杆菌中表达

  • 无动物 (AOF) 和无载体蛋白。

  • 在我们英国剑桥的实验室制造

  • 从乙腈冻干,TFA

  • 以 >100 µg/ml 的浓度重悬于 10mM HCl 中,制备一次性等分试样,根据需要添加载体蛋白,并冷冻储存在 -20 oC 或 -80 oC

  • 生物活性

  • Qkine重组激活素 A 蛋白Qk001

  • 在 HEK293T 细胞中使用激活素反应性萤火虫荧光素酶报告基因测定激活素 A 蛋白活性。EC50 = 0.310 ng/ml (11.94 pM) 来自 #104276 的数据。n=3


  • 纯度

  • Qkine重组激活素 A 蛋白Qk001

  • ActA 在非还原 (NR) 中作为 24 kDa 的单个条带迁移,在还原 (R) 时作为单个单体种类迁移到 13 kDa。没有可见的污染蛋白条带。

  • 使用 15% w/v SDS-PAGE 在还原(+β-巯基乙醇,R)和非还原条件(NR)中分离纯化的重组蛋白 (7 µg),并用考马斯亮蓝 R250 染色。来自 Qk001 批次 #011 的数据。

进一步的质量检测

  • 质谱法:具有预期质量的单一物种

  • 分析反相:单个尖峰

  • 内毒素:<0.005 EU/μg蛋白(低于检测水平)

  • 从储备瓶中回收:>95%


蛋白质背景

Activin A 是 TGFβ 生长因子家族的一员。激活素 A 经常用于干细胞分化和维持培养基。它还在胚胎发生的调节、生殖系统的发育、伤口愈合和免疫反应的调节中具有重要的生理作用。在体内,高亲和力抑制剂卵泡抑素和抑制素严格调节激活素 A 活性 (1)。在干细胞培养过程中,卵泡抑素被分泌到培养基中。然而,对干细胞分化效率和细胞同质性的影响尚未得到仔细研究。

激活素是四条抑制素 β 链的二硫键连接的同二聚体和异二聚体。最典型的是激活素 A 和激活素 B,它们分别是抑制素 βA 和抑制素 βB 的同源二聚体。与 TGF-β 家族的所有其他成员一样,激活素被合成为由 N 末端信号肽、250-350 个残基的前结构域和高度保守的成熟结构域组成的大前体。在成熟蛋白中被切除的前结构域在体内生长因子的生物合成、稳定、运输和信号传导中具有重要作用2

重组激活素 A 用于干细胞维持许多人诱导多能干细胞和人胚胎干细胞系3 的多能性,并诱导干细胞分化为定形内胚层4 和其他细胞命运。

Qkine 重组激活素 A 蛋白已在干细胞培养和其他检测中得到广泛验证,并与其他供应商的蛋白质进行了比较。

amidbiosciences SHP2 蛋白SHP2-B-301


amidbiosciences SHP2 蛋白

简要描述:Amid Biosciences 开发和制造产品以简化和改进生命科学研究。我们的核心竞争力包括酶开发(DNA 和 RNA 聚合酶)、蛋白质表达和纯化,重点是细菌(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌)和酵母系统,以及克隆试剂。amidbiosciences SHP2 蛋白,人类,重组,生物素化

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,化工,生物产业,制药

amidbiosciences SHP2 蛋白,人类,重组,生物素化

amidbiosciences SHP2 蛋白,人类,重组,生物素化

Amid Biosciences 开发和制造产品以简化和改进生命科学研究。我们的核心竞争力包括酶开发(DNA 和 RNA 聚合酶)、蛋白质表达和纯化,重点是细菌(大肠杆菌枯草芽孢杆菌)和酵母系统,以及克隆试剂。我们特别专注于为学术、工业和政府实体提供蛋白质表达工具。

SHP2 是一个包含非跨膜蛋白酪氨酸磷酸酶 (PTP) 的 Src 同源 2 (SH2) 结构域,参与多种信号转导过程,例如 Ras-Raf-MAP 激酶、Jak-Stat 和 PI3 激酶通路( 1).实验数据还表明 SHP2 是 Ras 的直接激活剂,也是由致癌或过度活跃的 Ras 变体驱动的癌症的潜在治疗靶点 (2, 3)。

具有 N 末端 AviTag™ 肽和 His 标签的重组 SHP2蛋白在大肠杆菌 细胞中产生,  并在 AviTag 处用 BirA 酶进行位点特异性生物素化 

标签:N 端 6XHis 和 AviTag
氨基酸:SHP2 的 1-593 (UniProt # Q06124)

目录号 SHP2-B-301

储存缓冲液:20 mM Tris-HCl,pH 7.5、100 mM NaCl、5 mM 2-巯基yi醇、0.04% Tween 20、20% 甘油。 
浓度:  A280 为 1.0 mg/mL(请参阅具体批号)。

比活性:≥100 pmol/min/μg。

测定条件:20 mM HEPES,pH 7.5,100 mM NaCl,5 mM DTT,5 mM硝基苯磷酸盐 (PNPP),30°C 30 分钟。在 405 nm 处测量吸光度。

分子量:  ~71 kDa
纯度: 考马斯蓝染色 >80% 

建议在 -80°C 下 
储存 。

本产品仅供实验室研究使用。

上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

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Page试剂:Ruler™ 预染蛋白分子量标准,10 至 180 kDa简介

Page试剂:Ruler™ 预染蛋白分子量标准,10 至 180 kDa简介

Thermo Scientific PageRuler 预染蛋白分子量标准是 10 种蓝色、橙色和绿色染色蛋白(10 至 180 kDa)的混合物,可用作蛋白电泳 (SDS-PAGE) 和 Western 印迹中的分子量标准品。蛋白分子量标准品以即用型规格提供,用于直接上样至凝胶;使用前无需加热、还原或添加上样缓冲液。

应用
• 在 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳期间监测蛋白迁移
• Western 印迹后监测蛋白转印到膜上
• SDS-聚丙烯酰胺凝胶和 Western 印迹上的蛋白大小分析

Page试剂:Ruler&trade; 预染蛋白分子量标准,10 至 180 kDa简介

规格

检测方法
比色法、NIR 荧光 (700 nm)、RGB 荧光 (555 nm)
Number of Markers
10
Product Type Specs
蛋白分子量标准品
Ready to Load
大小范围
10-180 kDa
Stain Type
3 色:蓝色、橙色、绿色
凝胶兼容性
Bolt™ Bis-Tris Plus 凝胶、Novex™ Tricine 凝胶、Novex™ Tris-甘氨酸凝胶、NuPAGE™ Bis-Tris 凝胶、NuPAGE™ Tris-醋酸盐凝胶、SDS-PAGE 凝胶
分子量
180、130、100、70、55、40、35、25、15、10 kDa
产品线
PageRuler™
数量
10 x 250μL
运输条件
经批准可置于湿冰或干冰上运输
系统类型
Western 印迹,SDS-PAGE

内容与储存

目录:10 小瓶,250 µL/瓶

储存缓冲液:62.5 mM Tris-H3PO4(25°C 下 pH 值 7.5)、1 mM EDTA、2% SDS、10 mM DTT、1 mM NaN3 和 33% 甘油

储存:接收后,在 -20°C 下储存