genecopoeia:一体化qPCR混合物(All-in-One™ qPCR Mix)简述

带有经验证引物的all-in-One qPCR混合物提供通用的qPCR反应条件和可靠的定量PCR数据。联合开发和共同优化的一体化qPCR混合物和基因特异性引物提供了您所需的全部优势，而没有您预期的任何高成本:

• 统一的反应条件减少了实验设计时间，从而能够更早提交期刊论文
• 即使是低拷贝基因也具有高扩增效率和灵敏度，这意味着每次都可以进行可靠的定量
• 不存在非特异性扩增*和引物二聚体*确保了数据的可再现性和可发布性

一体化qPCR混合物使用高保真热启动聚合酶、优化的反应缓冲液和高质量dNTPs，即使从低拷贝RNA（cDNA）或DNA物种中也能进行特异性和灵敏的扩增（图1）。

图一。使用一体化qPCR主混合物进行qPCR反应。使用GeneCopoeia全合一cDNA合成试剂盒对来自MCF-7细胞的1微克总RNA进行逆转录。将RT反应物稀释至1毫克至1毫克RNA /升。使用GeneCopoeia All-in-One qPCR混合物（A）将1升稀释的RT反应物用于随后的qPCR中35个循环。最终产物在2%琼脂糖凝胶上进行电泳（B）。

放大曲线	熔化曲线	标准曲线

图二。2X All-in-One qPCR混合物的扩增效率和检测灵敏度通过标准曲线进行评估，该标准曲线由5×10的质粒DNA梯度稀释而成6到5个分子。扩增和解链曲线的峰值表明，使用All-in-One qPCR Mix可以获得非常高的灵敏度，可以检测低至5个分子。同时，每个浓度之间良好的线性关系也显示了高扩增效率。

一体化qPCR验证引物完成任务

使用GeneCopoeia的precision qPCR消除无休止的调整和优化。只需添加多合一底漆并开始。一体式qPCR人-小鼠或大鼠特异性引物由专有算法设计并经过验证†精密性能。引物验证包括解链曲线，以确保扩增正确的靶DNA（图2）。

当与多合一SYBR结合使用时®Green qPCR Mix，多合一引物在定量PCR检测中提供可靠且可重现的高性能。

放大曲线
熔化曲线	琼脂糖凝胶电泳验证结果

图三。45对基因特异性All-in-One qPCR引物经过实验验证，可产生单一解离曲线峰，并对目标基因产生正确大小的单一扩增。将包含来自10种不同人类组织（肺、肝、睾丸、卵巢、脾、脑、胎盘、胰腺、心脏和乳腺）的总RNA的逆转录产物的cDNA库用作qPCR验证模板。使用0.2 M引物和2X多合一qPCR混合物进行qPCR。将反应物孵育10分钟。在95℃下，随后在10秒内进行40次95℃的循环。；60摄氏度20秒。72摄氏度15秒。使用Bio-Rad iQ5仪器。最后一个循环结束时，温度从72℃升至95℃，形成一条熔化曲线。显示了10个样品的扩增曲线、解链曲线和琼脂糖凝胶电泳（奇数泳道中阳性和偶数泳道中无模板对照（NTC）的验证结果）。

*当一体式验证PCR引物和PCR混合物一起使用时，确保非特异性扩增和引物二聚体的缺失。自动验证适用于人类、小鼠和大鼠的引物。查询其他物种的验证。

慢病毒qPCR滴度试剂盒（Lentivirus qPCR Titer Kit）

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TribioScience的慢病毒（LV）qPCR滴度试剂盒采用了TribioScience FAST技术范式和probe Taqman qPCR技术，可实现精确、一步到位且省时的慢病毒qPCR滴度测定。探针用荧光FAM标记。整个过程不需要额外的逆转录步骤，可在2小时内完成。凭借其省时的1分钟酶激活技术、特异性和灵敏度，TribioScience的慢病毒qPCR滴度试剂盒的性能优于目前市场上同类试剂盒。

表1:标准品制备

表2: qPCR反应设置

表3: PCR条件

Tribioscience是一家专注于为生命科学研究实验室和公司提供试剂的生物技术公司，是一家私人控股的生物技术公司，由斯坦福大学的一群科学家于2010年创立。公司专注于为分子生物学、生物化学、免疫学、传染病、基因治疗、神经科学、动物实验和药物开发领域的生命科学研究实验室和生物技术公司提供高质量的产品。产品涵盖抗体、生化测试、ELISA试剂盒、PCR及相关试剂等。我们还为生物技术行业和学术界提供CRO（研究合同组织）服务。我们的动物建模服务已被用于动物模型开发和活泼的高排名大学的评估。

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