辣根过氧化物酶HRP底物—-TMB

TMB—-四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)

TMB即四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞,与细胞器中的辣根过氧化物酶 (horse radish peroxidase,简称HRP)反应,且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚体,在HRP活性部位产生粗大的、深蓝色沉淀物,同时反应产物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,有利于酶氧化反应的进行。这使得TMB成为细胞免疫学实验中的一种很好的发色团。另外,TMB又有无致癌性等优点,因此在细胞免疫学实验中应用日趋广泛。

TMB性质较稳定,可配成溶液试剂,只需与H2O2溶液混和即成应用液,可直接作底物使用。酶反应用Hcl或H2SO4终止后,TMB产物由蓝色呈黄色,可在比色计中定量,最适吸收波长为405nm。

货号

产品名称

CAS-No

说明书

A3840

3,3’,5,’-Tetramethylbenzidine TMB

54827-17-7

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其他酶联反应底物还有

货号 

产品名称

反应酶 

说明书

A0596

3,3′-Diaminobenzidine tetrahydrochloride   DAB

HRP底物

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A1117

5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Phosphate     BCIP

AP底物

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A1243

Nitrotetrazolium Blue chloride             NBT

AP底物

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德国AppliChem公司产品,为全世界提供最权威的生化试剂。素有”欧洲Sigma”之称的德国艾普力(AppliChem)是德国知名的跨国公司,专注生产常规生化试剂、化学试剂、符合美国与欧洲药典(Ph. Eur., USP)的试剂。德国艾普力(AppliChem)欧洲”销量第一”,有着“小SIGMA”的美誉,价格低廉。

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HRP标记抗体/蛋白试剂盒—SureLINK™ HRP Conjugation Kit

辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP),通常来源于辣根,是临床检验试剂中的常用酶。该产品广泛运用于酶联(ELISA)、Western Bloting以及免疫组化技术等。过氧化物酶作为多个试剂盒显色体系的关键成分,对试剂盒的质量有重要影响。辣根过氧化物酶比活性高,稳定,分子量小,纯酶容易制备,所以经常被用于抗体或其他蛋白质的标记,而不会影响偶联蛋白的活性和功能。HRP由多个同功酶组成,分子量为40kDa,是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,糖含量18%。

辣根过氧化物酶HRP上的糖羟基可以被高碘酸钠(NaPIO4)激活生成醛基,这些醛基能通过Schiff碱与蛋白中的氨基偶联,紧接着还原Schiff碱形成稳定的偶联产物。这种HRP偶联标记方法已经被广泛认可,但是也存在一定HRP标记抗体/蛋白试剂盒—SureLINK™ HRP Conjugation Kit的缺陷,特别是去除过量高碘酸钠(NaPIO4)的过程较为繁琐。需要注意的是,被高碘酸钠(NaPIO4)激活的HRP很不稳定,其酶活力会在几天内丢失。

SureLINK HRP Conjugation Kits HRP偶联标记试剂盒内提供了即用型的组分,能在90分钟制备完成标记HRP的抗体或蛋白。制备好的HRP标记的抗体或蛋白能在4℃稳定保存至少半年。试剂盒内包括SureLINK Activated HRP(干粉)、HRP偶联缓冲液、还原试剂以及HRP储存缓冲液。该HRP偶联标记试剂盒每次能标记50 μg-1 mg的抗体,特别适合于HRP单克隆抗体的制备。经SureLINK HRP Conjugation Kits HRP标记试剂盒标记的抗体,结合相应的显色或化学发光底物,可应用于ELISA、WB及免疫组化等方法的免疫学检测及定量分析。

SureLINK™ HRP标记抗体/蛋白试剂盒具有以下优点:

  • 方便快速:两步反应(见右),近两个小时(20分钟手动工作)就可以完成整个交联反应;
  • 活性强:可以标记从0.05mg到1.5mg范围的抗体(蛋白);
  • 通用性:可以用于下游各种免疫检测实验,比如ELISA, Western blotting和免疫组化
产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
SureLINK HRP Conjugation Kit 84-00-01 6 x 0.1 mg rxn.
84-00-02 6 x 1.0 mg rxn.
84-00-03 2 x 0.1 mg rxn.
产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
SureLINK Activated HRP 84-01-01 0.3mg包装
84-01-02 1.5mg包装

除了完整的HRP标记抗体/蛋白试剂盒,还有单独组分的SureLINK Activated HRP(干粉状的激活HRP)提供。

作为美国最早实现亲和素纯化二抗商业化的生物公司,同时也是世界上较大的二抗和底物显色系统的生产商。 KPL一直提供高质量的用于分子生物学、免疫学、细胞生物学和体外诊断试剂及用于蛋白和核酸检测的试剂盒。针对于蛋白标记以及蛋白偶联,KPL有HRP及AP标记及偶联试剂盒,还有专门用于两个蛋白质之间的偶联试剂盒提供。另外还有多种化学发光和显色底物及相关产品,以及全系列针对不同种属的各种标记的现货二抗。如果您对KPL的产品感兴趣,请致电021-50837765 到上海金畔生物科技有限公司免费索取相关产品资料,或者问询您所感兴趣的产品类型。

鲁米诺发光底物(KPL)—代理

LumiGLO Peroxidase Chemiluminescent Substrate是基于鲁米诺开发的一种非同位素的HRP底物,当有H2O2存在时,HRP可催化鲁米诺发光,且这个反应相当迅速。该底物检测信号与被检蛋白浓度呈非常好的正相关关系,灵敏度高达pg级别。此外,反应物可从膜上洗去,然后重新加入底物反应,如此进行实验结果的优化而不再需要重复全部WB过程。LumiGLO Reserve是对LumiGLO的第二代升级产品,可检测pg-fg级(HRP g/ml),LumiGLO Ultra则是第三代产品,信号超强,能检测fg级。

检测方法

货号

品名

组分

膜张数(10cm2

灵敏度(HRP g/ml

HRP

54-61-00

LumiGLO 2-C

2*120 ml(A液+B液)

240

(pg)10-12

54-71-02

LumiGLO Reserve 3-C

1*17 mL A液,1*34 mL B液,1*100 mL 20X洗脱液

100

(pg~fg)

10-15~10-12

54-51-00

LumiGLO Ultra 2-C

2*25 ml(A液+B液)

100

(fg)10-15

产品特色:

1.  既可用于WB又可用于ELISA;

2. 信号产生迅速;

3. 灵敏度高,是同类产品的2倍以上

4. 全部试剂均为即用型的,使用方便;

5. 工作液可存放8~24h;

6. 发光时间长,可持续1~2小时;

7. 可于2~8℃稳定保存1年以上。

KPL

现货供应HRP标记的内参抗体/标签抗体

HRP-conjugated mouse anti Tubulin-Alpha Monoclonal antibody

货号:   HRP-66031

应用:  ELISA, WB

检测物种:  人, 小鼠, 大鼠

现货供应HRP标记的内参抗体/标签抗体

HRP-conjugated mouse anti ACTB Monoclonal antibody

货号:   HRP-60008

应用:  ELISA, WB 

检测物种:  人, 小鼠, 大鼠, 斑马鱼

现货供应HRP标记的内参抗体/标签抗体

HRP-conjugated mouse anti GST Tag Monoclonal antibody

货号:   HRP-66001

应用:  ELISA, WB

检测物种:  重组蛋白, 日本血吸虫

现货供应HRP标记的内参抗体/标签抗体

HRP-conjugated mouse anti GFP tag Monoclonal antibody

货号:   HRP-66002

应用:  ELISA, WB

检测物种:  重组蛋白, aequorea victoria水母

现货供应HRP标记的内参抗体/标签抗体

HRP-conjugated mouse anti 6*His, His-Tag Monoclonal antibody

货号:   HRP-66005

应用:  ELISA, WB

现货供应HRP标记的内参抗体/标签抗体