neuvitro纤连蛋白涂层方案

neuvitro纤连蛋白涂层方案

Neuvitro公司提供专业涂层,覆盖广泛的基材,如PDL、PLL、PLO、胶原蛋白、明胶、层粘连蛋白、纤连蛋白、PDL+层粘连蛋白、PDL+纤连蛋白、PLO+层粘连蛋白、PLO+纤连蛋白、PDL +层粘连蛋白+纤连蛋白等。Electron Microscopy Science、ThermoFisher Scientific 和 VWR 提供的大多数带涂层德国盖玻片实际上是由 Neuvitro Corporation 制造的。

纤连蛋白是细胞外基质 (ECM) 的糖蛋白之一,可与跨膜受体和其他细胞外基质成分(如胶原蛋白、纤维蛋白、多聚糖等)结合。纤连蛋白在细胞粘附、生长、迁移和分化中发挥重要作用。它对于其他过程也很重要,例如伤口愈合和胚胎发育。

Sigma 的纤连蛋白涂层方案

必须针对每种细胞系和应用确定最佳贴壁条件。

  1. 用 0.5 mL 无菌水重新配制。不要搅动。让溶液静置 30 分钟以溶解。可能会残留少量未溶解的物质。这不会影响产品性能。

  2. 在无菌平衡盐溶液中稀释纤连蛋白,并以最小体积包被培养物表面。

  3. 在室温下风干至少 45 分钟。多余的纤连蛋白可以通过抽吸去除,但这不是必需的。

 

ABIF 的纤连蛋白涂层方案

  1. 库存纤连蛋白(Sigma F-0895,来自人血浆的 1 mg/ml 纤连蛋白)应分装冷冻(-80oC),可在大约一个月内使用。在冰箱中大约一个月后,蛋白质会降解,细胞不再能很好地扩散。

  2. 对于 MEF 或 3T3 细胞,用 PBS++ 将 1mg/ml 纤连蛋白原液稀释至 1 µg/ml;对于 CHO 细胞,稀释至 2 µg/ml。 (1 µl/ml PBS 或 2 µl/ml PBS)

  3. 将 1 ml 纤连蛋白溶液放在玻璃底皿的盖玻片上,并在冰箱中放置过夜。

  4. 用 PBS(含或不含钙和镁)冲洗 3 次,并置于冰箱中,两周内使用

Jacobs 的纤连蛋白涂层方案

程序

第 1 天(约 1 小时,等待 1 小时)

  1. 载玻片准备

  2. 将载玻片浸泡在 100% EtOH 中至少五分钟(通常 20 分钟是比较好的流动时间)。

  3. 在引擎盖中打开 20 个培养皿。

  4. 将载玻片和乙醇放入通风柜中。

  5. 用同样的 100% 乙醇对平头钳进行消毒。

  6. 将载玻片倾斜在培养皿边缘晾干(面朝上)

  7. 将载玻片全部放下后翻转,以便另一面可以干燥,并且盖子上聚集的任何乙醇都可以干燥。

  8. 一旦所有乙醇蒸发(载玻片上不应有潮湿发亮的地方),将载玻片平放在培养皿底部。

  9. 将盖子盖在盘子上。

纤连蛋白溶液

  1. 每 1 mL PBS 溶液 (1:100) 制备 10 ul 纤连蛋白。每张载玻片需要 1 mL 的溶液。

    • 纤连蛋白溶液的体积 = [载玻片数量] x 1 ml/载玻片

  2. 4°C 下可保存长达 6 个月

  3. 对于 20 张载玻片,这意味着将 200 ul 纤连蛋白加入到 19.8 ml PBS 中。

  4. 搅拌均匀。

涂层

  1. 小心地将 1 ml 纤连蛋白溶液移至每个载玻片顶部。这是一个微妙的过程,要小心,慢慢来

  2. 不要让溶液掉落到载玻片的边缘。如果发生这种情况,您需要收集液体,对载玻片进行消毒,干燥并重试。任何从侧面落下的液体都会将剩余的液体吸出并吸到载玻片下方,这是我们不希望的。

  3. 确保溶液覆盖整个幻灯片。您可以使用无菌移液器吸头将液体涂抹到任何裸露的点上。表面张力将使液体留在载玻片上,但不要将其推到侧面。

  4. 盖上玻片并让玻片在细胞培养罩中于室温下不受干扰地静置 1 小时。

  5. 平板细胞

GG-12-fibronectin:直径12毫米,#1厚度,60片CE认证晶莹剔透德国玻璃盖玻片,两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层,用于细胞培养和共焦荧光显微镜,每袋密封15片,已灭菌,可立即使用 $88.65

GG-12-1.5-fibronectin:直径12毫米,#1.5厚度,60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片,两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层,用于细胞培养和共聚焦荧光显微镜,每片密封15片袋子,已消毒,可立即使用 $98.65

GG-14-fibronectin:直径14毫米,#1厚度,60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片,两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层,用于细胞培养和共焦荧光显微镜,每袋密封15片,已灭菌,可立即使用 $93.65

GG-15-fibronectin:直径15毫米,#1厚度,60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片,两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层,用于细胞培养和共焦荧光显微镜,每袋密封15片,已灭菌,可立即使用 $98.65

GG-18-fibronectin:直径18毫米,#1厚度,60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片,两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层,用于细胞培养和共聚焦荧光显微镜,每袋密封15片,已灭菌,可立即使用 $113.65

GG-18-1.5-fibronectin:直径18毫米,#1.5厚度,60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片,两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层,用于细胞培养和共聚焦荧光显微镜,每片密封15片袋子,已消毒,可立即使用 $123.65

GG-20-fibronectin:直径20毫米,#1厚度,60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片,两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层,用于细胞培养和共焦荧光显微镜,每袋密封15片,已灭菌,可立即使用 $120.65

GG-22-fibronectin:直径22毫米,#1厚度,60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片,两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层,用于细胞培养和共焦荧光显微镜,每袋密封15片,已灭菌,可立即使用 $124.65

GG-22-1.5-fibronectin:直径22毫米,#1.5厚度,60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片,两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层,用于细胞培养和共聚焦荧光显微镜,每片密封15片袋子,已消毒,可立即使用 $134.65

GG-24-fibronectin:直径24毫米,#1厚度,60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片,两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层,用于细胞培养和共焦荧光显微镜,每袋密封15片,已灭菌,可立即使用 $134.65

GG-25-fibronectin:直径25毫米,#1厚度,60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片,两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层,用于细胞培养和共聚焦荧光显微镜,每袋密封15片,已灭菌,可立即使用 $144.65

GG-25-1.5-fibronectin:直径25毫米,#1.5厚度,60片CE认证晶莹剔透的德国玻璃盖玻片,两面涂有聚-D-赖氨酸+纤连蛋白涂层,用于细胞培养和共聚焦荧光显微镜,每片密封15片袋子,已消毒,可供使用 $174.65

生长因子 PEG-纤连蛋白水凝胶应用

生长因子 PEG-纤连蛋白水凝胶应用

细胞外基质衍生的基质胶含有多种生长因子。并且它具有支持细胞增殖、迁移和分化的ECM特性,因此广泛应用于体外细胞培养。但此类基质胶成分未知,稳定性较差,物理性质缺乏可控。因此,开发一种兼具ECM功能和合理设计的可控生物材料显得尤为重要。

格拉斯哥大学 Manuel Salmeron-Sanchez 教授的团队在《生物材料》杂志上发表了一篇文章“采用全长纤连蛋白设计的 3D 水凝胶,可隔离并呈现生长因子”。研究人员利用聚乙二醇共价结合全长的纤连蛋白,制备了一种可以富集和控制生长因子的PEG-纤连蛋白水凝胶。并证明水凝胶可以结合血管内生长因子(VEGF)和骨形态发生蛋白(BMP2)促进血管生成,实现骨再生。

FNPEG水凝胶的制备及表征

FN 通过迈克尔型加成反应与 PEG 网络共价结合,形成 FN 标记的 FNPEG 水凝胶。 FN免疫荧光染色和释放检测结果表明,FN均匀分布在水凝胶网络中,结合稳定。 PEG可以控制FNPEG水凝胶系统的物理和化学性质。随着体系中PEG含量的增加,FNPEG水凝胶的溶胀性能和杨氏模量也显着提高。此外,添加0.5VPM可降解交联剂将增强水凝胶的机械强度。

生长因子 PEG-纤连蛋白水凝胶应用

FNPEG水凝胶可稳定结合生长因子

FN可以随机与生长因子结合,例如通过FNIII12-14与VEGF结合。因此,与PEG相比,FNPEG水凝胶可以有效共聚大量生长因子。研究人员使用荧光标记的 VEGF 来追踪其随时间的释放。将荧光标记的 VEGF 混合到 PEG 和 FNPEG 水凝胶中进行释放实验。 24小时后,PEG释放了所有VEGF,而FNPEG水凝胶保留了50%的VEGF。同时,将PEG和FNPEG水凝胶置于相同浓度的荧光标记VEGF中,测试其结合VEGF的能力。

生长因子 PEG-纤连蛋白水凝胶应用

结果表明,每毫升 FNPEG 水凝胶比 PEG 多结合 2μg VEGF。此外,可降解交联剂VPM的存在不会影响水凝胶与VEGF的稳定结合,表明FNPEG水凝胶可以通过其自身的降解特性来控制生长因子的释放。

FNPEG水凝胶可促进微血管网络的形成

PEG和FNPEG水凝胶中HUVEC的存活率没有显着差异。研究人员将接种了HUVEC的微载体封装到FNPEG水凝胶和Matrigel中,并在培养基中添加VEGF,以研究FNPEG水凝胶在3D培养过程中促进管出芽的作用。在含有VEGF的FNPEG水凝胶中,出现了大量与Matrigel类似的血管出芽现象,并且连接的血管芽的面积比Matrigel更多。

研究人员进一步将HUVEC和VEGF直接封装到FNPEG水凝胶中,研究FNPEG水凝胶是否能像Matrigel一样促进三维交换中的血管形成。第1天和第2天,FNPEG水凝胶形成比Matrigel组和含有VEGF的PEG组更宽的血管簇。然而,从第3天开始,FNPEG水凝胶中的血管簇开始分解,表明这些细胞复合物不稳定。需要周细胞、平滑肌细胞和其他类型的细胞来稳定新形成的毛细血管。

生长因子 PEG-纤连蛋白水凝胶应用

研究人员使用更复杂的鸡胚尿囊膜来测试FNPEG水凝胶是否可以促进毛细血管的形成。添加和未添加 VEGF 的 FNPEG 水凝胶鸡胚尿囊膜上毛细血管的分叉和连接数量均显着高于对照组,表明 FNPEG 水凝胶不仅具有持久持续释放 VEGF 的能力,鸡胚尿囊膜在发育过程中产生的尿囊膜也可保留在原位,促进毛细血管生成。然而,有或没有VEGF的PEG水凝胶实验组与对照组之间没有显着差异。进一步证实VEGF在最初的几个小时内从PEG中快速释放,导致VEGF从局部区域相对快速地消失。

生长因子 PEG-纤连蛋白水凝胶应用

负载 BMP2 的 FNPEG 水凝胶促进骨骼生长

研究人员利用成年小鼠构建了骨不连(临界尺寸)半径缺损模型,并证明负载BMP2的FNPEG水凝胶可以促进体内骨骼生长和修复。各组件水凝胶管状支架的骨缺损修复结果显示,随着BMP2的增加,骨生长从FNPEG-到FNPEG+再到FNPEG++增加,FNPEG++组实现骨缺损闭合。番红-O固绿和苏木精组织切片染色结果显示,FNPEG+和FNPEG++ Hydro植入处有大量胶原沉积。

生长因子 PEG-纤连蛋白水凝胶应用

大鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒介绍

大鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒介绍

工作原理:
本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中大鼠纤连蛋白(FN)水平。向预先包被了大鼠纤连蛋白(FN)单克隆抗体的酶标孔中加入大鼠纤连蛋白(FN),温育;温育后,加入生物素标记的抗E抗体。再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物AB,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中大鼠纤连蛋白(FN)的浓度呈正相关。

试剂盒组成
大鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒介绍


需要而未提供的试剂和器材:
37℃恒温箱。
标准规格酶标仪。
精密移液器及一次性吸头
蒸馏水,
一次性试管
吸水纸

注意事项:
2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差
严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。

洗板方法:
手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中

标本要求:
1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

操作程序:
标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)
大鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒介绍
根据代测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
加样:1)空白孔,空白对照孔不加样品,生物素标记的抗FN抗体,链霉亲和素-HRP,只加显色剂A&B和终止液,其余各步操作相同;2)标准品孔:加入标准品50ul,链霉亲和素-HRP50ul(标准品中已事先整合好生物素抗体,故不加)3)代测样品孔:加入样本40ul,然后各加入抗FN抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul,盖上封板膜,轻轻震荡混匀,37℃温育60分钟。
配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
显色:每孔先加入显色剂A50ul,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后10分钟以内进行。
根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。

操作程序总结:

1.准备试剂,样品和标准品

2.加入准备好的样品和标准品,生物素标记的二抗和酶标试剂,37℃反应60分钟

3.洗板5次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟

4.加入终止液

5.10分钟内读OD值

6.计算

试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。
2.批内与批间应分别小于9%15%

检测范围:
检测范围:1.5ng/ml120ng/ml

保存条件及有效期:
存:2-8℃。
有效期:6个月(2-8)  

Fibronectin from Human Plasma 人纤连蛋白

Fibronectin from Human Plasma 人纤连蛋白

货号: JP0926-5MG 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

人纤连蛋白 Fibronectin from Human Plasma

产品标签

Fibronectin纤连蛋白;Laminin 层粘连蛋白;Extracellular matrix, ECM细胞外基质;Cell spreading细胞铺展;Gelatin明胶;CAS NO:86088-83-7

产品信息

  产品名称   产品编号   规格     价格(元)
  Fibronectin from Human Plasma人纤连蛋白     JP0926-1MG   1mg   1068
  Fibronectin from Human Plasma人纤连蛋白   JP0926-5MG   5mg   4698

产品描述

纤连蛋白(Fibronectin, FN),也称为纤维连接蛋白,是一种广谱的、天然的细胞粘附因子。纤连蛋白是一种440-500kDa的二聚体糖蛋白,由两个相似的220-250kDa的亚基通过二硫键连接而成。主要以两种形式存在,可溶形式和不可溶形式,前者以二聚体形式存在血浆中,后者以多聚体形式存在于细胞外基质(ECM)和细胞表面。纤连蛋白首要功能与细胞粘附到细胞外基质有关,通过纤连蛋白上的序列Arg-Gly-Asp-Ser(RGDS)来识别细胞相关的跨膜整合素受体从而调控粘附。纤连蛋白的其他结构域也参与这一粘附过程,可能涉及与胶原蛋白、肝素和其他细胞表面粘多糖的相互作用。粘附后纤连蛋白的构象和方向也很重要,对细胞分布和内皮细胞粘附强度上发挥作用。经纤连蛋白包被的培养器皿用来培养BHK、CHO和其他细胞系呈现出更明显的粘附效应。可以说,纤连蛋白参与体内众多生理过程,比如细胞间的粘附和迁移、细胞骨架组装、酪氨酸磷酸化以及肿瘤转移。

本品是经亲和色谱纯化所得的人血浆来源纤连蛋白,以冻干粉形式提供,适用于细胞粘附和细胞铺展。

产品特性

1)CAS NO:86088-83-7
2)同义名:Fibronectin from Human Plasma;Human Plasma Fibronectin;Natural Human Fibronectin;Human Fibronectin;纤连蛋白,来源于人血浆;天然人纤连蛋白;人纤维连接蛋白;
3)分子量:440kDa(非还原形式)
4)外观:白色粉末
5)组成:100 mM CAPS,0.15M NaCl,1 mM CaCl2,pH 11.0
6)质量控制:1)4-12% SDS-PAGE凝胶电泳和考马斯亮蓝染色来验证蛋白。还原条件下,纯度≥90%;2)细胞粘附实验,表明纤连蛋白能够极好的促进BHK-21细胞的粘附和铺展;3)纤连蛋白经测试细菌、真菌和支原体阴性。

保存与运输方法

保存:2-8℃保存,至少1年有效。 不可冻存。

运输:冰袋运输。

使用方法

一、 产品溶解和使用

将产品从冰箱取出置于室温平衡至少20min。按照1mg/ml浓度加入适量无菌蒸馏水重悬粉末,静置30min让粉末充分进入溶液。不可振动或涡旋。如果所有溶液不能立即用完,请按单次用量分装并置于-20℃冻存。建议2周内用完溶解产品。不要保存在无霜冰箱,避免多次反复冻融。

二、 产品应用

用于细胞培养包被基质的建议浓度为1-5μg/cm2,或用作培养基添加剂的建议浓度为5μg/ml。

三、 包被步骤

以下步骤作为参考,依据具体培养体系来确定最佳的包被浓度。

1) 用无血清,不含Ca2+,Mg2+的培养基或者缓冲液稀释纤连蛋白储存液到所需的工作浓度,以最小体积完全覆盖培养表面,推荐包被浓度为1-5μg/cm2。比如,若最终包被浓度为5μg/cm2,稀释储存液到50μg/ml,按照1ml/35mm培养皿,3ml/60mm培养皿等加量。

【注意】:由于纤连蛋白溶液中含CAPS,含有Ca2+,Mg2+的培养基添加到纤连蛋白中可能会引起不溶的金属氢氧化物产生。如果缓冲体系能将稀释液的pH调至8.0或更低,不会发生此情况。

2) 加适量稀释好的纤连蛋白到培养器皿表面。

3) 室温孵育1h。

4) 吸掉多余纤连蛋白溶液。

5) 用去离子水清洗,注意操作过程中不要刮破底层。

6) 此时的培养容器即可使用。或许以潮湿状态保存在2-8℃或无菌条件下风干。

注意事项

1) 如果操作不当,本品中的某些成分可能会导致健康风险。因此,操作本品时注意做好防护,包括穿好衣服和带上眼罩。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

 货号

名称

规格

 JP0910-2ML

Collagen, Type I, from Rat Tail鼠尾胶原蛋白I

2ml(10mg)    

 JP0911-100G    

Gelatin, Type A明胶(A型)

100g

 JP0912-100G

Gelatin, Type B明胶(B型)

100g

 JP0917-25MG

Poly-L-lysine (Mw 70,000-150,000)多聚L-赖氨酸

25mg

 JP0918-25MG

   Poly-L-lysine (Mw 150,000-300,000)多聚L-赖氨酸      

25mg

 JP0925-1MG

Fibronectin from Bovine Plasma牛纤连蛋白

1mg

 JP0926-1MG

Fibronectin from Human Plasma人纤连蛋白

1mg

 JP0927-1MG

Fibronectin fromRatPlasma大鼠纤连蛋白

1mg

 JP0928-1MG

Laminin from Mouse EHS sarcoma小鼠层粘连蛋白

1mg

 

 

 

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

86088-83-7

规格:

5mg

货期:

咨询客服

Fibronectin from Human Plasma 人纤连蛋白

Fibronectin from Human Plasma 人纤连蛋白

货号: JP0926-1MG 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

人纤连蛋白 Fibronectin from Human Plasma

产品标签

Fibronectin纤连蛋白;Laminin 层粘连蛋白;Extracellular matrix, ECM细胞外基质;Cell spreading细胞铺展;Gelatin明胶;CAS NO:86088-83-7

产品信息

  产品名称   产品编号   规格     价格(元)
  Fibronectin from Human Plasma人纤连蛋白     JP0926-1MG   1mg   1068
  Fibronectin from Human Plasma人纤连蛋白   JP0926-5MG   5mg   4698

产品描述

纤连蛋白(Fibronectin, FN),也称为纤维连接蛋白,是一种广谱的、天然的细胞粘附因子。纤连蛋白是一种440-500kDa的二聚体糖蛋白,由两个相似的220-250kDa的亚基通过二硫键连接而成。主要以两种形式存在,可溶形式和不可溶形式,前者以二聚体形式存在血浆中,后者以多聚体形式存在于细胞外基质(ECM)和细胞表面。纤连蛋白首要功能与细胞粘附到细胞外基质有关,通过纤连蛋白上的序列Arg-Gly-Asp-Ser(RGDS)来识别细胞相关的跨膜整合素受体从而调控粘附。纤连蛋白的其他结构域也参与这一粘附过程,可能涉及与胶原蛋白、肝素和其他细胞表面粘多糖的相互作用。粘附后纤连蛋白的构象和方向也很重要,对细胞分布和内皮细胞粘附强度上发挥作用。经纤连蛋白包被的培养器皿用来培养BHK、CHO和其他细胞系呈现出更明显的粘附效应。可以说,纤连蛋白参与体内众多生理过程,比如细胞间的粘附和迁移、细胞骨架组装、酪氨酸磷酸化以及肿瘤转移。

本品是经亲和色谱纯化所得的人血浆来源纤连蛋白,以冻干粉形式提供,适用于细胞粘附和细胞铺展。

产品特性

1)CAS NO:86088-83-7
2)同义名:Fibronectin from Human Plasma;Human Plasma Fibronectin;Natural Human Fibronectin;Human Fibronectin;纤连蛋白,来源于人血浆;天然人纤连蛋白;人纤维连接蛋白;
3)分子量:440kDa(非还原形式)
4)外观:白色粉末
5)组成:100 mM CAPS,0.15M NaCl,1 mM CaCl2,pH 11.0
6)质量控制:1)4-12% SDS-PAGE凝胶电泳和考马斯亮蓝染色来验证蛋白。还原条件下,纯度≥90%;2)细胞粘附实验,表明纤连蛋白能够极好的促进BHK-21细胞的粘附和铺展;3)纤连蛋白经测试细菌、真菌和支原体阴性。

保存与运输方法

保存:2-8℃保存,至少1年有效。 不可冻存。

运输:冰袋运输。

使用方法

一、 产品溶解和使用

将产品从冰箱取出置于室温平衡至少20min。按照1mg/ml浓度加入适量无菌蒸馏水重悬粉末,静置30min让粉末充分进入溶液。不可振动或涡旋。如果所有溶液不能立即用完,请按单次用量分装并置于-20℃冻存。建议2周内用完溶解产品。不要保存在无霜冰箱,避免多次反复冻融。

二、 产品应用

用于细胞培养包被基质的建议浓度为1-5μg/cm2,或用作培养基添加剂的建议浓度为5μg/ml。

三、 包被步骤

以下步骤作为参考,依据具体培养体系来确定最佳的包被浓度。

1) 用无血清,不含Ca2+,Mg2+的培养基或者缓冲液稀释纤连蛋白储存液到所需的工作浓度,以最小体积完全覆盖培养表面,推荐包被浓度为1-5μg/cm2。比如,若最终包被浓度为5μg/cm2,稀释储存液到50μg/ml,按照1ml/35mm培养皿,3ml/60mm培养皿等加量。

【注意】:由于纤连蛋白溶液中含CAPS,含有Ca2+,Mg2+的培养基添加到纤连蛋白中可能会引起不溶的金属氢氧化物产生。如果缓冲体系能将稀释液的pH调至8.0或更低,不会发生此情况。

2) 加适量稀释好的纤连蛋白到培养器皿表面。

3) 室温孵育1h。

4) 吸掉多余纤连蛋白溶液。

5) 用去离子水清洗,注意操作过程中不要刮破底层。

6) 此时的培养容器即可使用。或许以潮湿状态保存在2-8℃或无菌条件下风干。

注意事项

1) 如果操作不当,本品中的某些成分可能会导致健康风险。因此,操作本品时注意做好防护,包括穿好衣服和带上眼罩。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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名称

规格

 JP0910-2ML

Collagen, Type I, from Rat Tail鼠尾胶原蛋白I

2ml(10mg)    

 JP0911-100G    

Gelatin, Type A明胶(A型)

100g

 JP0912-100G

Gelatin, Type B明胶(B型)

100g

 JP0917-25MG

Poly-L-lysine (Mw 70,000-150,000)多聚L-赖氨酸

25mg

 JP0918-25MG

   Poly-L-lysine (Mw 150,000-300,000)多聚L-赖氨酸      

25mg

 JP0925-1MG

Fibronectin from Bovine Plasma牛纤连蛋白

1mg

 JP0926-1MG

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1mg

 JP0927-1MG

Fibronectin fromRatPlasma大鼠纤连蛋白

1mg

 JP0928-1MG

Laminin from Mouse EHS sarcoma小鼠层粘连蛋白

1mg

 

 

 

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

86088-83-7

规格:

1mg

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