蛋白酶抑制剂混合物II(通用/广谱)——Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose

从细胞或组织中提取纯化蛋白时需要破碎细胞,此时蛋白酶就会被释放出来或被激活,降解蛋白质,最终影响试验结果。为了避免这些情况的出现,建议在样品制备时尽可能在低温下进行。此外,许多蛋白酶在pH9以上就失活了,因此Tris碱,碳酸钠或碱性载体两性电蛋白酶抑制剂混合物II(通用/广谱)——Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose解质往往能抑制蛋白水解。但是有些蛋白酶在上述条件下仍然保持着活性,此时应当使用蛋白酶抑制剂。因此,选择有效的蛋白酶抑制剂对于蛋白纯化路线设计来讲显得尤为重要。

蛋白酶抑制剂种类繁多,通常使用许多化学物质作为蛋白酶抑制剂,如PMSF 和Leupeptin。而且由于一种蛋白酶抑制剂只对某一类蛋白酶起作用,因此通常建议复合使用蛋白酶抑制剂,如广谱蛋白酶抑制剂“鸡尾酒”,即Protease Inhibitor Cocktail。德国AppliChem提供一系列的蛋白酶抑制剂Protease Inhibitor Cocktail产品,适用于细胞裂解,蛋白提取和多种生化反应。根据不同的样本来源和实验要求,又分为5种Cocktail套装供您选择。这包括了专门用于细胞蛋白提取的Cocktail 1,多用途的蛋白提取Cocktail 2,专用于细菌蛋白提取的Cocktail 3,适用于组织、细胞核细菌蛋白提取的Cocktail 4,通用的细胞组织蛋白提取的Cocktail 5以及专用于细胞中His标签蛋白的提取纯化的Cocktail 6。

上海金畔生物科技有限公司提供的原装进口Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose(蛋白酶抑制剂混合物2)是一种通用/广谱的蛋白酶抑制剂混合物,适用于各种样本的裂解液的制备,如细胞裂解液、组织裂解液等。由AEBSF、Aprotinin、E-64、EDTA及Leupeptin等组成,可以广泛抑制各种蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、类胰蛋白酶以及酯酶等。可以广泛抑制各种蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶以及类胰蛋白酶等。 其中AEBSF是AppliChem独有的蛋白酶抑制剂,其通过磺酰化蛋白酶活性中心的一个基团,不可逆地抑制凝血酶thrombin和其他一些丝氨酸蛋白酶(chymotrypsin, kallikrein, plasmin, proteinase K, trypsin)。AEBSF是PMSF和DFP的低毒替代品,具有较高的水溶性,溶液状态的pH为酸性,且稳定性较高。EDTA能很好的通过螯合作用抑制金属蛋白酶的活性。

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose(蛋白酶抑制剂混合物2) A7719_0001 冻干粉形式,用1ml H2O复溶后可得100×浓缩液

上海金畔生物科技有限公司向您推荐德国AppliChem原装进口的Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose(蛋白酶抑制剂混合物2)产品-20°C稳定保存3年以上。用1ml H2O复溶后可得100X浓缩液,溶解后于冷冻保存一个月。

作为多家进口品牌的代理,上海金畔生物科技有限公司将一如既往的为您提供最优质的生化试剂和高品质的产品技术服务。除了多种单独的蛋白酶抑制剂以及专门不同的蛋白酶抑制剂混合物-Protease Inhibitor Cocktail产品,上海金畔生物科技有限公司还有多种蛋白提取、蛋白电泳、免疫学一抗、二抗产品以及显色发光底物等实际。我们能为您提供一站式的产品及实验解决方案。如果您对我们的产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询蛋白提取纯化相关的实验解决方案,或者问询您所感兴趣的产品类型。

木瓜蛋白酶(Papain)

产品说明:木瓜蛋白酶(Papain)简称木瓜酶。是利用未成熟的番木瓜果表皮的白色乳汁,采用现代生物工程技术提炼而成的纯天然生物酶。木瓜蛋白酶(Papain)是一种含巯基(-SH)肽链内切酶,具有蛋白酶和酯酶的活性,有较广泛的特异性,对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力,同时,木瓜蛋白酶Papain还具有合成功能,能把蛋白水解物合成为类蛋白质。

溶解性:溶于水和甘油,水溶液无色,有时呈乳白色;较大溶解度为6%,几乎不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂。

酶活性:Activity (BAEE):大约2U/mg;Activity Casein (pH=6, 40°C):>30000 USP U/mg

木瓜蛋白酶(Papain)的最适合PH值5.7(一般3~9.5皆可),在中性或偏酸性时亦有作用,等电点18.75;最适合温度55~60℃(一般10~85℃皆可),耐热性强,在90℃时也不会完全失活;受氧化剂抑制,还原性物质激活。

上海金畔公司提供的木瓜蛋白酶Papain(货号为A3824)现货供应,有意者欢迎来电垂询,我们将为您提供最优质的服务。电话021-50837765

Protease Inhibitor Cocktail Set V (EDTA free) (×100), Lyophilized 蛋白酶抑制剂混合物V (无EDTA),(x 100), 冻干粉 品牌:Wako CAS No.:


品牌:Wako
CAS No.:
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168-26033

for Cellbiology 1 ml,for×5 2,850.00


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四种抑制剂混合物的冻干粉,浓度:1 vial /1mL4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐(50mM), 抑蛋白酶肽(15&maicro;M), E-64, 

蛋白酶抑制剂(0.1mM), 亮肽素(0.1mM)目标蛋白酶: 丝氨酸蛋白酶, 半胱氨酸蛋白酶,酯酶,胰酶样蛋白酶

α-1-抗胰蛋白酶缺乏症和自身免疫性疾病关联介绍

α-1-抗胰蛋白酶缺乏症和自身免疫性疾病关联介绍

α-1-抗胰蛋白酶(AAT)是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂(丝氨酸蛋白酶抑制剂),在人体内由SERPINA1主要由肝细胞合成。  AAT的主要功能是保护正常身体组织免受非特异性中性粒细胞蛋白水解酶的损害,如中性粒细胞弹性蛋白酶,它可以攻击肺弹性蛋白并损害支气管和肺泡壁的完整性。  的许多突变SERPINA1基因已经被鉴定,其中许多导致AAT缺陷;与AAT缺陷症相关的最常见突变是342位谷氨酸被赖氨酸取代的单碱基对。  这种突变导致约70%的AAT在肝脏中降解,约15-20%被错误折叠1.  结果,循环AAT的水平严重降低,并经常导致肺气肿病例。  AAT的输注提供了对肺部蛋白酶的保护,并且治疗方案继续取得进展。

尽管AAT缺乏症通常与肺部疾病有关,但它也与自身免疫性疾病和炎症性疾病有关,AAT疗法对这些疾病显示出良好的疗效。  这方面的例子有1型糖尿病、类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮:

α-1-抗胰蛋白酶治疗1型糖尿病(T1D)

T1D的胰岛素不足特征是由于产生胰岛素的胰腺β细胞的自身免疫性破坏。  t细胞驱动的自身免疫和炎症因子导致了该疾病,并且已经观察到T1D患者的AAT活性受损。  使用非肥胖糖尿病(NOD)小鼠模型,研究人员测试了AAT基因疗法,发现70%接受治疗的NOD小鼠在8个月内没有糖尿病。  临床级AAT的直接治疗也预防或逆转了NOD小鼠的糖尿病。  基于这些临床前研究,已经进行了AAT治疗的初步人体试验,并证明AAT在新发T1D患者中是安全且耐受性良好的。  剂量优化研究正在进行中。

这些研究的一个有趣的副产品来自在胰岛细胞移植研究中测试AAT作为抗排斥剂。  胰岛细胞的同种异体移植被认为是T1D的一种治疗方法,但移植细胞的排斥仍然是一个挑战。  鉴于AAT的抗炎作用,在小鼠模型中结合胰岛移植对其进行了评估,AAT治疗显著延长了胰岛同种异体移植物的存活时间。  未来的研究可能会检查AAT疗法是否可以用作其他治疗的抗排异剂。

α-1-抗胰蛋白酶治疗类风湿性关节炎(RA)

类风湿性关节炎是一种全身性自身免疫性疾病,其特征是慢性关节炎症和破坏。  RA相关自身抗体的靶点似乎是瓜氨酸化蛋白。瓜氨酸是一种不在基因组中编码的氨基酸,而是通过肽基精氨酸脱亚胺酶(PAD)催化蛋白质中精氨酸残基的翻译后修饰产生的。  许多蛋白质可以被瓜氨酸化,包括组蛋白、细胞表面受体和细胞外结缔组织成分。已经确定了AAT的抗炎作用,在II型胶原诱导的关节炎小鼠模型中评估了AAT蛋白和基因疗法的治疗效果;两种类型的治疗都延缓了关节炎和关节损伤的发展,并减少了抗II型胶原的自身抗体,这表明AAT在控制类风湿性关节炎自身免疫方面具有潜力。

α-1-抗胰蛋白酶治疗系统性红斑狼疮

系统性红斑狼疮(SLE)是一种毁灭性的自身免疫性疾病,影响着全球数百万患者(大多数为女性)。  系统性红斑狼疮对多个器官造成损害,包括肾脏、大脑、皮肤和心脏,目前没有治愈系统性红斑狼疮的方法。  在SLE病例中已发现多种自身抗体靶点,包括双链DNA(dsDNA)、线粒体RNA、核糖核蛋白(Sm/RNP)和干燥综合征相关抗原A和b  这些自身抗体也在其他炎症疾病中被发现。

树突细胞和1型干扰素似乎在SLE的发病和维持中起着关键作用。 在MRL/lpr小鼠(自发性狼疮小鼠模型)中测试了AAT的C端片段,发现抗dsDNA、IL-17和IL-12的自身抗体水平降低。  在一项类似的研究中4全长AAT的治疗抑制了小鼠骨髓中树突细胞的成熟以及TNF-α、IL-1β和1型干扰素的分泌。  该疗法还降低了狼疮特异性自身抗体、抗dsDNA和抗核抗体的血清水平,并部分逆转了MRL/lpr小鼠的狼疮肾炎。

显然,SLE是一种复杂的疾病,在疾病的不同阶段有一系列自身抗体作用于不同的细胞靶点。  目前的研究表明AAT在控制系统性红斑狼疮中的潜在益处,未来的研究无疑将揭示AAT帮助调节该疾病中自身抗体产生的确切机制。

结论

因为AAT是一种复杂的多功能蛋白质,它可以通过不同的机制发挥其治疗作用,例如:

  • 蛋白酶抑制
  • 与炎症介质的相互作用
  • 基因表达的改变
  • 抑制自身抗体的产生
  • 树突细胞成熟和功能的抑制

挑战仍然是解开AAT的各种功能以及自身免疫性疾病的复杂性。  需要更多的研究来证实AAT的治疗潜力,但迄今为止收集的证据鼓励进一步研究哪些自身免疫性疾病患者可以从AAT疗法中获益。

protean重组蛋白——Pro3C HRV-3C 蛋白酶介绍

protean重组蛋白——Pro3C HRV-3C 蛋白酶介绍

Pro3C (HRV-3C, Prescission) 蛋白酶是一种来自人鼻病毒 3C (HRV3C) 的转基因序列特异性半胱氨酸蛋白酶。由于其高序列特异性,它经常用于融合蛋白的切割以及体外和体内重组蛋白的标签去除。

这种重组蛋白酶是人鼻病毒 3C 的基因改良版本。它包含位于蛋白质 N 末端的 His6 标签,使其能够固定在 Ni 基亲和树脂上并从裂解反应中去除。它在很宽的温度范围内(4-34°C)都具有活性。最佳温度为 30°C,但对于温度敏感目标,它在 4°C 时也能发挥作用。优选的识别序列是Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln|Gly-Pro (LEVLFQ|GP)。请使用我们的3C 底物 #1409FRET 底物作为阳性对照。

protean重组蛋白——Pro3C HRV-3C 蛋白酶介绍

应用

蛋白质纯化后从融合蛋白中切割亲和标签。直接在溶液中或固定在亲和树脂上切割融合蛋白。 Protean Ltd. 提供的酶是在符合 ISO 9001 和 ISO 13485 国际标准的认证环境中生产的,符合下游 GMP 认证流程的使用条件。

纯化方法

亲和层析

公式

50 mM Tris pH 7.0、150 mM NaCl、1 mM EDTA、1 mM DTT、50% 甘油

特异性

其八氨基酸序列具有高度特异性和活性,且脱靶效应最小。活性取决于靶蛋白的类型。应针对每种目标蛋白测试最佳酶用量。

贮存

-20°C,请勿储存在-80°C