在哺乳动物细胞培养中表达重组病毒载体和疫苗是一种高效的生产商品化用量的基因治疗和疫苗等相关生物制品的方法。然而，在生产和纯化这些产品的工艺过程中，通常需要使用核酸内切酶去除内源宿主细胞DNA和RNA，以及病毒载体生产中未结合的质粒DNA。在纯化过程中，内切酶的污染必须降低到最低水平。

Cygnus EndonucleaseGTP ELISA试剂盒（货号F960）中的抗体是对来自粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）并通过基因工程改造的核酸内切酶免疫亲和纯化得到的。该试剂盒检测限约为0.06 ng/ml，是一种灵敏、特异的检测内切酶残留的方法，适用于纯化工艺开发、工艺监控、日常质量控制以及产品放行测试中。该试剂盒操作方法简便，主要原理是含有核酸内切酶的样品同时与HRP标记的anti-endonuclease检测抗体和96孔板中包被的anti-endonuclease捕获抗体发生免疫反应结合。EndonucleaseGTP ELISA试剂盒中包含了用于评估核酸内切酶残留的所有组分，以及一套校准的核酸内切酶标准品。

EndonucleaseGTP ELISA检测试剂盒有如下特点：

      极高的灵敏度 LOD约为0.06 ng/ml，LLOQ约为0.31 ng/ml；

      各项参数通过内部验证 如批内和批间准确度、精密度、灵敏度等；

      操作简便 两小时内即可得到检测结果；

      适用于整个工艺过程 如工艺开发和监控、质量控制、产品放行等；

      适用大部分样本 适用于定量检测市面常用Benzonase和DENARASE等核酸酶。

EndonucleaseGTPELISA标准曲线示例

EndonucleaseGTPELISA批间和批内稳定性

Cygnus EndonucleaseGTP ELISA试剂盒与同类型产品技术参数及操作步骤比较

产品信息

对于疫苗、细胞及基因治疗领域，Cygnus还提供针对不同常用表达系统的宿主蛋白残留检测试剂盒、检测不同细胞培养基组份，如BSA、HAS、Transferrin、Insulin等ELISA试剂盒、以及宿主残留DNA提取和检测试剂盒。如需了解详情，请致电上海金畔021-50837765更多资料。

如何从肿瘤组织中分离出大量的高纯化肿瘤细胞并使其原代细胞培养成功一直是困扰人们的一大难题，获得大量的高纯化的肿瘤细胞和肿瘤细胞原代培养的成功与否又常常是有关肿瘤疾病研究的关键，分离得到同源的肿瘤细胞对于后继的试验非常重要。另外，在干细胞的研究中，也遇到了类似的问题。

然而由于实体瘤成分复杂，因此比较难以获得纯化的同源肿瘤细胞。目前实验室里用于肿瘤分离纯化的方法可以通过胰酶消化实体瘤后，采用差速离心或者Ficoll的方法获得纯化的肿瘤细胞。但这样的效果不总是很理想，总是存在肿瘤细胞不纯、分离效率较低、分离后肿瘤细胞状态差等缺点。也有采用流式细胞仪进行肿瘤细胞分离的，但是成本较贵。

CytoSelect™ Clonogenic Tumor Cell Isolation Kit克隆原性肿瘤细胞分离试剂盒提供了一个更优的肿瘤细胞分离纯化方案。其分离原理是大多数实体瘤细胞均能在软琼脂上生长并形成克隆，利用该原理，可以将少量的肿瘤细胞从大多数非恶性细胞内分离出来。该克隆原细胞分离试剂盒首先对实体瘤进行消化获得单个细胞，然后将细胞置于半干的软琼脂中培养6-8天，待形成克隆后，使用细胞筛获得肿瘤单细胞，并用于后继的实验。另外，由于肿瘤干细胞具有相似的特征，因此该肿瘤细胞分离试剂盒除了能用于实体瘤细胞的分析，也可以应用于肿瘤干细胞的分离。

Cell Biolabs的CytoSelect™肿瘤细胞分离试剂盒由于使用了半干琼脂培养基，利用肿瘤细胞在软琼脂上的克隆形成能力，能更有效的分离开肿瘤细胞的克隆和不能形成克隆的单细胞，不需要离心设备，提高了分离细胞的存活性和纯度；不仅能分离肿瘤细胞，还能应用于肿瘤干细胞的分离纯化。

每个试剂盒能进行5次分离操作，每次能从一个6孔板或35mm培养皿中分离出足够数量的细胞。一般说来，将分离出的大约500,000个细胞接种后培养1周，能获得50-1000个肿瘤细胞单一性纯克隆。Cell Biolabs还提供较大需求的克隆性肿瘤细胞分离试剂盒，能进行25次分离实验。

Cell BioLabs为您提供全套的细胞分析检测方案，针对于细胞的克隆形成及细胞转化，除了上述肿瘤细胞的克隆性肿瘤细胞分离试剂盒外，还有针对细胞转化的软琼脂克隆形成以及药物敏感性分析试剂盒提供。另外，Cell Biolabs还开发出其他多方位的基于细胞功能特征，特别是肿瘤细胞特性的细胞粘附分析、细胞转移与浸润、细胞吞噬快速分析、细胞活力/死亡/毒性分析、细胞衰老及收缩检测，以及血管生成分析等多种分析试剂盒。如果您对上述细胞分析方案感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询细胞研究的相关实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

逆转录病毒载体是常用的病毒载体之一。反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10kb左右，以很高的转染率感染宿主细胞，特别是分裂中的细胞，如干细胞等。反转录病载体多半用于基因治疗，由于病毒载体在宿主细胞基因组上随机插入，人们担心会引起不安全的后果，这种载体还在不断改进之中。

常规的逆转录病毒纯化一般采用超速密度离心法（利用不同大分子，如DNA、蛋白、病毒颗粒、细胞碎片等具有不同的密度进行梯度离心而分离出来的原理）分离病毒颗粒，但是耗时耗力。而且，逆转录病毒的低滴度一直是其软肋。Cell Biolabs为此研制出的拥有专利技术的ViraBind™ 逆转录病毒纯化试剂，再结合新型的纯化装置，能在4-6小时内，每次能将100ml病毒上清纯化500-1000倍，从而获得10⁹-10¹⁰TU/ml感染滴度的逆转录病毒颗粒。采用该Kit纯化获得的逆转录病毒液，不含有游离的包装蛋白以及转导抑制物，因此非常有利于后继的逆转录病毒操作。

Cell Biolabs提供两种逆转录病毒纯化方案，一种是用纯化柱装置，另一种是PLUS的采用透析柱装置。前者纯化过程快速，只需3小时；后者采用了透析柱装置，时间上要过夜透析，但是纯度很高。具体纯化步骤及大概区别如下图所示：

Cell Biolabs逆转录病毒浓缩纯化试剂盒中普通纯化逆转录病毒Kit每次纯化100ml，分2次/5次/25次三种规格；PLUS纯化Kit分中提（50ml每次）和大提（500ml每次），中提包装可使用2次，大提又分为2次和10次。每次能将100ml病毒上清纯化500-1000倍，从而获得10⁹-10¹⁰TU/ml感染滴度的逆转录病毒颗粒。采用该Kit纯化获得的逆转录病毒液，不含有游离的包装蛋白以及转导抑制物，因此非常有利于后继的逆转录病毒操作。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为逆转录病毒研究人员提供完备的重组逆转录病毒表达系统及其相关产品和服务，产品包括逆转录病毒的最新一代表达系统，针对逆转录病毒滴度低的软肋而专门设计的逆转录病毒浓缩纯化试剂盒，逆转录病毒的快速定量，以及逆转录病毒高效转染试剂和用于包装重组逆转录病毒的包装细胞系等，几乎覆盖反转录病毒研究中的所有技术环节。如果您对上述逆转录病毒包装细胞系感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

近年来，改进的重组腺病毒载体在基因治疗上迅速流行，因为他们没有免疫原性，宿主范围光，并可实现长期的转基因表达。在宿主细胞扩增之后的腺病毒纯化是一个关键的步骤。当表达载体在辅助载体的帮助下去感染包装细胞系，并产生重组的腺病毒颗粒后，一些病毒颗粒会裂解细胞并释放到培养液上清中，还有一些仍然会保留在细胞里，因此需要对上清及细胞进行处理和纯化以获得纯的感染性腺病毒颗粒。

常规的腺病毒纯化一般采用CsCl超速密度离心法（利用不同大分子，如DNA、蛋白、病毒颗粒、细胞碎片等具有不同的密度进行梯度离心而分离出来的原理）分离病毒颗粒，但是耗时耗力。Cell Biolabs的大部分纯化试剂盒都采用了新颖的专利ViraBind™技术，力求使用最前沿的技术为客户提供最完美的解决方案。Cell Biolabs为腺病毒纯化提供了两种不同的纯化方案，一种使用离心柱，一种是注射器样的透析柱（注：腺病毒纯化均未采用Matrix胶吸附，而是采用了新型的纯化装置，因此操作时间上只需要30分钟），常规离心即可。

其中小提（Miniprep）试剂盒，即离心柱式纯化如下，Kit包括以下4个组分：收集管收集柱、Loading缓冲液、洗液、洗脱液。无需超速离心，只通过一般实验室的常规离心（2000g）小提腺病毒。超过90%的回收率，但是只需要30min即可完成，一次可以提纯T75培养瓶或10cm培养皿内的感染细胞，最多可获得1×10¹¹个病毒颗粒，可进行10次提取。

还有一种是注射器式滤器纯化，又可分为中提和大提系列，每次分别可以用来纯化获得2.5×10¹²和2.5×10¹³病毒颗粒（大概相当于40和400个T75培养瓶的感染细胞），分别能进行10次和1次纯化；回收效率很高，超过90%。Kit内包括纯化滤器、洗液、洗脱液、再生液共4样组分，该Kit与上述Miniprep小提Kit基本类似，只不过是使用了注射器样的滤器装置用于更快速和大量的纯化，无需离心。整个操作只需要30分钟，无需离心设备。

美国著名细胞学试剂专家Cell BioLabs为您提供全套的腺病毒技术解决方案，RAPAD®腺病毒表达系统有多种样式供您选择，还有预装有多种重组基因的腺病毒供您直接使用，ViraBind™腺病毒小提及中提大提试剂盒采用了专利技术能让你获得更高滴度和纯度的腺病毒，Cell BioLabs还有转为腺病毒载体用的293AD细胞及高效转染试剂供您选择，如果您对腺病毒产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询腺病毒相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。