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MitoPeDPP试剂货号:M466
3-[4-(Perylenylphenylphosphino)phenoxy]propyltriphenylphosphonium iodide
MitoPeDPP
商品信息
储存条件:0-5度保存,避光
运输条件:室温

特点:

● 定位线粒体

● 更深层次脂质过氧化探究

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MitoPeDPP试剂货号:M466

MitoPeDPP试剂货号:M466

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产品概述

MitoPeDPP是一种新型荧光染料,由于其具有三苯基膦结构,因此可以穿过细胞膜并在线粒体中聚集。

聚集在线粒体内膜上的MitoPeDPP可以被脂质过氧化物氧化而释放出强荧光。由于氧化的MitoPeDPP

(Ox-MitoPeDPP) 的激发和发射波长分别是452 nm和470 nm,可以减小样品的光损伤和自发荧光,因此利用

荧光显微镜MitoPeDPP可以检测活细胞中的脂质过氧化物。

特点

1.特异性的在细胞中线粒体内聚集

2.可以检测线粒体膜内的脂质过氧化物

3.可以在488 nm和535 nm的荧光波长下进行检测

* 本产品由福冈大学化学系的Dr. Shioji开发

*由于MitoPeDPP量极少不宜看到,可以通过观察MitoPeDPP DMSO溶液的颜色是否为黄色来判断。

检测原理

MitoPeDPP可以穿过细胞膜并在线粒体中聚集。聚集在线粒体内膜上的MitoPeDPP可以被脂质过氧化物氧化而释放出强荧光。

MitoPeDPP试剂货号:M466

实验例

1.MitoPeDPP和线粒体染色试剂MitoBright共同染色的实施例

在HeLa细胞中添加t-BHP(氢过氧化叔丁基),检测脂质过氧化物

波长(wavelength/band pass)

MitoPeDPP:470/40(Ex),525/50(Em)

MitoBright DeepRed:600/50(Ex),685/50(Em)

结果证实在HeLa细胞内的线粒体中,MitoPeDPP受t-BHP氧化后会发出荧光。另外通过与线粒体染色试剂(MitoBright Deep Red:MT08)的共染色,确认了MitoPeDPP的荧光是定位在线粒体中。

MitoPeDPP试剂货号:M466

2.检测添加Rotenone产生的脂质过氧化物

向HeLa细胞[μ-slide,8孔(由Ibidi制造)]中添加MitoPeDPP之后,添加Rotenone溶液并使用荧光显微镜观察。实验结果证实,添加Rotenone后,检测到细胞中产生了脂质过氧化物。

Rotenone的刺激时间:0 min(左),90 min(中),180 min(右)

MitoPeDPP试剂货号:M466

上部)荧光图,下部)明场图

3.神经细胞使用MitoPeDPP的实验例

A.荧光显微镜检测

向NIE-115细胞(小鼠神经芽细胞瘤)添加异黄素,诱导Ca2+流入细胞内,并通过MitoPeDPP的荧光染色来观察线粒体膜内的脂溶性过氧化物的产生。实验结果证实添加了异霉素的实验组相比对照组来说荧光更强。

MitoPeDPP试剂货号:M466

B. 平均荧光强度数据比较

为了量化对照组细胞和添加了离子霉素的细胞的荧光强度,对两组数据进行基于平均荧光强度的比较。

结果证实,加入离子霉素后30分钟的细胞对比对照组的细胞,观察到的荧光强度显着增加。

数据提供(Free Radical Research, in press)

MitoPeDPP试剂货号:M466

参照芝浦工业大学系统理工学院 福井浩二副教授、中村沙希[参考文献3]

4.MitoPeDPP反应的选择性

在不含细胞的反应体系中,MitoPeDPP可以与各种过氧化物如H2O2,t-BHP和ONOO- 反应,但是在细胞中,积

累在线粒体中的MitoPeDPP可以被t-BHP氧化而释放出较强荧光 (图3A),却和其它ROS或RNS反应很弱 (图3B)。

A) 在HepG2细胞中加入MitoPeDPP培养15 min,然后用100 μmol / l的t-BHP处理。

B) 在HepG2细胞中加入MitoPeDPP培养15 min后,加入ROS、RNS诱导剂。

分别加入100 μmol / l (H2O2,NO和ONOO-诱导剂)和10  μmol / l  PMA(O2-.诱导剂) 。

左边为明场图,右边为荧光图

* t-BHP:tert-Butylhydroperoxide; PMA, Phorbol myristate acetate;

SIN-1, 3-(Morpholinyl)sydnonimine, hydrochloride;

NOC 7, 1-Hydroxy-2-oxo-3-(N-methyl-3-aminopropyl)-3-methyl-1-triazene

波长/带通滤波器:470/40 (Ex), 525 /50 (Em)

MitoPeDPP试剂货号:M466

参考文献

1) K. Shioji K, Y. Oyama, K. Okuma and H. Nakagawa, “Synthesis and properties of fluorescence probe for detection of peroxides in mitochondria.”, Bioorg Med Chem Lett., 2010, 20, (13), 3911.

2) S. Oka, J. Leon, K. Sakumi, T. Ide, D. Kang, F. M. LaFerla and Y. Nakabeppu, “Human mitochondrial transcriptional factor A breaks the mitochondria-mediated vicious cycle in Alzheimer’s disease”, Scientific Reports ., 2016, DOI: 10.1038/srep37889 , .

3) S. Nakamura, A. Nakanishi, M. Takazawa, S. Okihiro, S. Urano and K. Fukui, “Ionomycin-induced calcium influx induces neurite degeneration in mouse neuroblastoma cells: Analysis of a time-lapse live cell imaging system”, Free Radical Research., 2016, 50, (11), 1214.

4) M. Akimoto, R. Maruyama, Y. Kawabata, Y. Tajima and K. Takenaga, “Antidiabetic adiponectin receptor agonist AdipoRon suppresses tumour growth of pancreatic cancer by inducing RIPK1/ERKdependent necroptosis”, Cell Death Dis., 2018, 9, 804.

5) M. Álvarez-Córdoba, A. Fernández Khoury, M. Villanueva-Paz, C. Gómez-Navarro, I. Villalón-García, J. M. Suárez-Rivero, S. Povea-Cabello, M. Mata, D. Cotán, M. Talaverón-Rey, A. J. Pérez-Pulido, J. J. Salas, E. M. Pérez-Villegas, A. Díaz-Quintana, J. A. Armengol, J. A. Sánchez-Alcázar , “Pantothenate Rescues Iron Accumulation in Pantothenate Kinase-Associated Neurodegeneration Depending on the Type of Mutation.”, Mol. Neurobiol. ., 2019, 56, (5), 3638.

6)Yaxu Li, Qiao Ran, Qiuhui Duan, Jiali Jin, Yanjin Wang, Lei Yu, Chaojie Wang, Zhenyun Zhu, Xin Chen, Linjun Weng, Zan Li, Jia Wang, Qi Wu, Hui Wang, Hongling Tian, Sihui Song, Zezhi Shan, Qiwei Zhai, Huanlong Qin, Shili Chen, Lan Fang, Huiyong Yin, Hu Zho“7-Dehydrocholesterol dictates ferroptosis sensitivity”Nature.626, 411-418(2024).

5M Sodium Chloride (5M NaCl) 氯化钠TBS5064


5M Sodium Chloride (5M NaCl) 氯化钠

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5M Sodium Chloride (5M NaCl) 氯化钠(货号:TBS5064)

氯化钠广泛用于生物化学和分子生物学研究。氯化钠的应用包括核酸纯化、蛋白质制备和结晶。在18兆欧水中配制5M氯化钠溶液,并过滤0.2μm。

 

应用程序

该产品适用于分子生物学应用、细胞培养、蛋白质化学和生化分析。

 

贮藏条件

该产品应储存在室温下。

Tribioscience是一家专注于为生命科学研究实验室和公司提供试剂的生物技术公司,是一家私人控股的生物技术公司,由斯坦福大学的一群科学家于2010年创立。公司专注于为分子生物学、生物化学、免疫学、传染病、基因治疗、神经科学、动物实验和药物开发领域的生命科学研究实验室和生物技术公司提供高质量的产品。产品涵盖抗体、生化测试、ELISA试剂盒、PCR及相关试剂等。我们还为生物技术行业和学术界提供CRO(研究合同组织)服务。我们的动物建模服务已被用于动物模型开发和活泼的高排名大学的评估。

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氢氧化钠溶液10M Sodium Hydroxide (NaOH) SolutionTBS5052


氢氧化钠溶液10M Sodium Hydroxide (NaOH) Solution

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氢氧化钠溶液10M Sodium Hydroxide (NaOH) Solution(货号:TBS5052) 

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盐酸溶液6M Hydrochloric Acid (HCl) SolutionTBS5051


盐酸溶液6M Hydrochloric Acid (HCl) Solution

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盐酸溶液6M Hydrochloric Acid (HCl) Solution(货号:TBS5051) 

6M盐酸溶液由高纯度酸和超纯水制成。这种解决方案通常用于多种生物分析。

应用程序

应用包括蛋白质结构、折叠分析和其他生物分析。

集中度

该溶液在水中含有6M HCl。

贮藏条件

室温下储存。

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盐酸溶液6M Hydrochloric Acid (HCl) Solution(货号:TBS5051) 

磷酸二钠溶液Disodium Phosphate Solution (1M)TBS5046


磷酸二钠溶液Disodium Phosphate Solution (1M)

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磷酸二钠溶液Disodium Phosphate Solution (1M)(货号:TBS5046)  

磷酸二钠(Na2HPO4)也称为磷酸氢二钠、磷酸氢钠或磷酸氢二钠。它有水合和无水两种形式。磷酸氢二钠水溶液的pH值在8.0和11.0之间。

贮藏条件

提供1M磷酸二钠溶液,500mL。
室温下储存。

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磷酸二钠溶液Disodium Phosphate Solution (1M)(货号:TBS5046)