genovis产品介绍—IgA1 特异性蛋白酶

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IgASAP Sub1 是一种 IgA1 特异性蛋白酶,可在铰链上方的一个特定位点消化人类 IgA1,产生完整且同质的 Fab 和 Fc 片段。

该酶能够生成完整的单价 Fab 片段以及 IgA1 的中水平分析,从而有助于在疫苗、治疗和诊断等开发过程中进行 IgA1 表征。

  • 实现IgA1 的中层表征质量控制

  • 快速– 在 1 小时内生成均质的 Fab 和 Fc 片段

  • 高度特异性– 人类 IgA1 铰链上方有一个消化位点

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人类 IgA1 的位点特异性消化

为了证明 IgASAP Sub1 的位点特异性,将市售的人骨髓瘤 IgA1 用冻干的 IgASAP Sub1 在 37°C 下消化 1 小时,并与未消化的 IgA1 进行比较。由于 IgA1 携带多个 N- 和 O- 聚糖,因此使用 OmniGLYZOR 试剂盒处理样品,包括在变性条件下使用 PNGaseF 冻干进行额外的去糖基化步骤,以去除所有 N-聚糖,以方便数据解释。
使用 IgASAP Sub1 的消化快速、简单,并且在生理条件下进行,酶的特异性可防止 IgA1 的过度消化。尽管起始材料不同,但数据清楚地显示了人 IgA1 上铰链区 (VPSTPP / TPSPST) 的单个消化位点,并强调了使用中级工作流程为此类复杂样品生成高分辨率质量数据的优势。

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图 1. IgA1 的位点特异性消化。 a)工作流程示意图。来自人骨髓瘤的市售 IgA1的 N-和 O-去糖基化b)重链 (HC) 以及 N-和 O-去糖基化c) scFc 片段和d) 的解卷积质谱使用 IgASAP Sub1 在 37°C 消化 1 小时后的 Fd 片段。 HC 和 scFc 片段的异质性源自多个 C 末端截断和剩余的延伸 O-聚糖,未被 OmniGLYZOR 去除。通过反相色谱(ACQUITY Premier Protein BEH C4,300 Å,1.7 µm 2.1 x 100 mm,Waters™)分离样品,并使用 ESI-QTOF MS(Bruker Impact II)进行分析。

IgASAP Sub1 冻干   货号:I0-IA1-010

用于 IgA1 以上铰链消化的冻干酶。

IgASAP Sub1 冻干剂以冻干粉末形式提供,装在 1000 单位小瓶中,用于消化 1 mg IgA1。

  • 方法开发的灵活格式

  • 可以组合酶以提高效率

  • 适合自动化工作流程

  • 即可使用——只需加水即可!

免疫球蛋白A(IgA)ELISA检测试剂盒免费代测BS-0154


免疫球蛋白A(IgA)ELISA检测试剂盒免费代测

  • 产品型号:BS-0154
  • 简要描述:免疫球蛋白A(IgA)ELISA检测试剂盒免费代测金畔生物公司供应:ELISA试剂盒,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器。
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免疫球蛋白A(IgA)ELISA检测试剂盒免费代测金畔生物公司供应:ELISA试剂盒,血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器。

货号:BS-0154

规格:96T/48T

检测种属:人、大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭、猴ELISA试剂盒等种属。

保存条件及有效期:

1、试剂盒保存:2-8℃。

2、有效期:6个月

标记物:血清、血浆、组织匀浆等

【测试种属】犬、大小鼠、人、豚鼠、兔子、牛羊、猪、鸡鸭elisa试剂盒等种属
【储存方式】:2-8℃
【检测目的】用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
【用途】科研实验,不用于临床诊断。

免疫球蛋白A(IgA)ELISA检测试剂盒免费代测注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

ELISA试剂盒操作步骤:

免疫球蛋白A(IgA)ELISA检测试剂盒免费代测BS-0154

微生物羟胺氧化酶ELISAkit,HAOELISA检测试剂盒

微生物还原酶ELISAkit,NosELISA检测试剂盒

微生物还原酶ELISAkit,NRELISA检测试剂盒

微生物磷脂酰肌醇3磷酸ELISAkit,PI3PELISA检测试剂盒

微生物磷脂酰肌醇3,5二磷酸ELISAkit,PIP2ELISA检测试剂盒

微生物拓扑异构酶2ELISAkit,TOP2ELISA检测试剂盒

微生物DNA回旋酶ELISAkit,ELISAELISA检测试剂盒

微生物金黄色葡萄球菌ELISAkit,SAELISA检测试剂盒

微生物氨单加氧酶ELISAkit,AMOELISA检测试剂盒

微生物聚磷酶ELISAkit,PPKELISA检测试剂盒

微生物半乳糖基转移酶ELISAkit,GALTELISA检测试剂盒

微生物角鲨烯合成酶ELISAkit,SSELISA检测试剂盒

微生物角鲨烯环氧化酶ELISAkit,SEELISA检测试剂盒

微生物羊毛甾醇合成酶ELISAkit,LSSELISA检测试剂盒

微生物碱性磷酸酶ELISAkit,AKPELISA检测试剂盒

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微生物蛋白酶ELISAkit,ProteaseELISA检测试剂盒

 

产品用途:可用于科研实验,不用于临床治疗!

人免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒免费代测BS-0154


人免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒免费代测

  • 产品型号:BS-0154
  • 产品时间:2021-10-21
  • 简要描述:人免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒免费代测上海金畔公司供应:ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器。
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人免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒免费代测上海金畔公司供应:ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器。

本试剂盒仅供研究使用

检测范围: 96T

使用目的:

本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白A(IgA)含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中免疫球蛋白A(IgA)水平。用纯化的免疫球蛋白A(IgA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白A(IgA),再与HRP 标记的免疫球蛋白A(IgA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白A(IgA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中免疫球蛋白A(IgA)浓度。

试剂盒组成:

1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ; 2 酶标试剂 6ml×1 瓶

3 酶标包被板 12 孔×8 条 ; 4 样品稀释液 6ml×1 瓶

5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 ; 6 显色剂B 液 6ml×1/瓶

7 终止液 6ml×1 瓶; 8 标准品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶

9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶; 10 说明书 1 份

11 封板膜 2 张; 12 密封袋 1 个

标本要求

1. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2. 不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制胎盘核糖核酸抑止剂(HPRI)活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

60 ng/L5 号标准品150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液

30 ng/L4 号标准品150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

15 ng/L3 号标准品150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

7.5 ng/L2 号标准品150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

3.75 ng/L1 号标准品150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,

然后再加待测样品 10µl(样品终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽

量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。

7. 温育:操作同 3。

8. 洗涤:操作同 5。

9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15 分钟.

10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

人免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒免费代测

操作程序总结:

人免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒免费代测BS-0154

计算:

以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,

即为样品的实际浓度。

人免疫球蛋白A(IgA)ELISA检测试剂盒注意事项

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值大于标准品孔孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1. 试剂盒保存:;2-8℃。

2. 有效期:6 个月

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