Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针

货号: JP4544-500UG 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针

 

订购信息:

产品名称

产品编号 规格 价格(元)

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant镁离子荧光探针

JP4544-100UG

2×50μg

812

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant镁离子荧光探针 JP4544-500UG 10×50μg

2982

 

产品描述

具细胞膜渗透性的Mag-Fluo-4 AM是Fluo-4 AM(货号:JP4504-50UG)的一种结构类似物,对镁离子(Mg2+)和钙离子(Ca2+)的Kd值分别是4.7mM和22µM,是一种非常有用的细胞内镁离子指示剂和低亲和性钙离子指示剂。

产品特征

1)镁离子指示探针

Mag-Fluo-4与Thermo(invitrogen)公司的Magnesium Green indicator相比,具更加灵敏的Mg2+荧光反应。由于细胞内Mg2+的生理波动幅度通常很小,这一点点灵敏度的提高都是值得考虑的优势。与Fluo-4一样,Mag-Fluo-4在不含二价阳离子的情况下基本无荧光,一旦与Mg2+结合后,呈明显的荧光加强,但无光谱迁移(见下图)。

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针

图. Mag-Fluo-4在0-50mM Mg2+溶液内的荧光发射光谱

2)钙离子指示探针

Mag-Fluo-4是Fluo-4的类似物,具有更低钙离子结合亲和性,特别适合用于检测1 µM~1 mM范围内的胞内钙离子水平。

产品特性

1) 同义名:Mag-Fluo-4acetoxymethyl ester,cell permeant

2) 分子式:C37H33F2NO18

3) 分子量:817.65g/mol

4) 外观:橙色固体

5) 纯度:≥90%

6) Ex/Em:494/516 nm

7) 溶解性:溶于DJPO

8) 化学结构式:Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针

保存与运输方法

保存:-20ºC干燥避光保存,至少一年有效。

运输:冰袋运输。

 

注意事项

1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

1.储存液制备

取一管低温保存的Mag-Fluo-4 AM,置于室温回温至少20min。之后加入高质量无水DJPO配制成1~5mM储存液,比如50μgMag-Fluo-4 AM(Mw:817.65 g/mol)溶于12μl DJPO,充分溶解后,即得到5mM储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,且要避光保存。尽快使用完。

 

2.操作步骤

【注意】以下使用方法仅作参考,需根据具体的细胞类型和实验要求做出调整。加载温度范围是RT~37℃,更高温度会提高加载速度,但更低温度能最小化染料的内在化现象。表面活性剂Pluronic®F-127有时加入能促进AM探针在水溶性缓冲液内的均匀分散。

2.1 在所需温度(25℃~37℃)预孵育细胞10min,使其离子梯度达到稳定和平衡。

2.2 取4μl Mag-Fluo-4 AM储存液和5μl 20% Pluronic®F-127,加入1ml细胞培养液,剧烈漩涡混匀得到均匀的探针分散液。

2.3 取250μl上述制备的探针分散液加入750μl含细胞的培养基内,混匀,此时得到终浓度为1~5μM的工作液,根据起始母液浓度来确定。

2.4 根据需求探针孵育15~60min。

2.5 细胞清洗3次,之后继续孵育30min以保证细胞内的探针完全去酯化。之后选择合适的仪器,进行荧光测定。

  

应用示例(来自文献,仅用作参考)

文献一、Zheng JM et al. MagT1 regulated the odontogenic differentiation of BMJPCs induced byTGC-CM via ERK signaling pathway. Stem Cell Res Ther. 2019 Jan 31;10(1):48.

使用方法(细胞内镁离子水平的流式检测):1)用生理培养液(120 mM NaCl, 20 mM HEPES, 4.7 mM KCl, 1.2 mM KH2PO4, 1.2 mM MgSO4, 1.25 mM CaCl2, and 10 mM glucose)于37℃预孵育BMJPCs细胞10min使其达到离子梯度的稳定和平衡;2)用DJPO配制Mag-Fluo-4-AM储存液1mM;3)取4ul Mag-Fluo-4-AM储存液(1mM)和5ul 20% F-127,加入1ml培养基内,充分混匀;4)取0.25ml 分散液加入0.75ml含细胞培养液,使得探针终浓度为1uM;继续孵育30min,之后清洗细胞3次,之后再孵育30min保证细胞内AM基团的完全去酯化;5)之后用流式细胞仪分析荧光强度(Ex/em:480/520nm)。

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针

Fig 1. MagT1 knockdown reduced intracellular Mg2+ level in BMJPCs. Intracellular Mg2+ level was significantly reduced in MagT1 knockdown BMJPCs measured by indicator Mag-Fluo-4-AM using flow cytometry.

文献二、Ainbinder A et al. Role of Mitofusin-2 in Mitochondrial Localization and Calcium Uptake in Skeletal Muscle. Cell Calcium. 2015 Jan;57(1):14-24.

使用方法(肌浆钙离子的mag-fluo-4光度测定):趾短屈肌(FDB)肌肉纤维用Mag-Fluo-4-AM(4 µM)室温加载20min,之后用加含25 µM BTS的无探针溶液清洗20min。之后对纤维进行电刺激,用一系列抽搐刺激(1 ms pulse at 2 Hz)或5个连续性的强直电刺激。mag-fluo-4用480±15nm激发和535±30nm发射检测。

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针

Fig 2. Measurement of mitochondrial Ca2+ uptake during twitch stimulation in mt-pericam expressing CTRL and Mfn2 KD FDB fibers. A. Average (±SE) traces of mt-pericam fluorescence (402 nm excitation/515 nm emission) in CTRL (black circles) and Mfn2 KD (white circles) fibers during twitch stimulation. B. Average (±SE) relative change in mt-pericam fluorescence (ΔF/F) in CTRL and Mfn2 KD FDB fibers during twitch stimulation. C. Representative mag-fluo-4 traces during twitch stimulation of CTRL (black trace) or Mfn2 KD (grey trace) FDB fibers. D. Average (±SE) relative change in myoplasmic mag-fluo-4 fluorescence during twitch stimulation of CTRL or Mfn2 KD FDB fibers.

相关产品

货号

名称 规格
JP4301-1G Pluronic® F-127, Cell Culture Tested细胞培养级 1g
JP4302-1ML Pluronic® F-127 (20% Solution in DJPO), Cell Culture Tested 1ml
JP4541-1MG Mag-Fura-2 Tetrapotassium Salt, Cell Impermeant镁离子荧光探针 1mg
JP4542-500UG Mag-Fura-2 AM, Cell Permeant镁离子荧光探针 10×50μg
JP4543-500UG Mag-Fluo-4 Tetrapotassium Salt, Cell Impermeant镁离子荧光探针 10×50μg
JP4544-100UG Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant镁离子荧光探针

2×50μg

 

  

——Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/JP金畔所有】

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

10×50μg

货期:

咨询客服

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针

货号: JP4544-100UG 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针

 

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产品名称

产品编号 规格 价格(元)

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant镁离子荧光探针

JP4544-100UG

2×50μg

812

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant镁离子荧光探针 JP4544-500UG 10×50μg

2982

 

产品描述

具细胞膜渗透性的Mag-Fluo-4 AM是Fluo-4 AM(货号:JP4504-50UG)的一种结构类似物,对镁离子(Mg2+)和钙离子(Ca2+)的Kd值分别是4.7mM和22µM,是一种非常有用的细胞内镁离子指示剂和低亲和性钙离子指示剂。

产品特征

1)镁离子指示探针

Mag-Fluo-4与Thermo(invitrogen)公司的Magnesium Green indicator相比,具更加灵敏的Mg2+荧光反应。由于细胞内Mg2+的生理波动幅度通常很小,这一点点灵敏度的提高都是值得考虑的优势。与Fluo-4一样,Mag-Fluo-4在不含二价阳离子的情况下基本无荧光,一旦与Mg2+结合后,呈明显的荧光加强,但无光谱迁移(见下图)。

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针

图. Mag-Fluo-4在0-50mM Mg2+溶液内的荧光发射光谱

2)钙离子指示探针

Mag-Fluo-4是Fluo-4的类似物,具有更低钙离子结合亲和性,特别适合用于检测1 µM~1 mM范围内的胞内钙离子水平。

产品特性

1) 同义名:Mag-Fluo-4acetoxymethyl ester,cell permeant

2) 分子式:C37H33F2NO18

3) 分子量:817.65g/mol

4) 外观:橙色固体

5) 纯度:≥90%

6) Ex/Em:494/516 nm

7) 溶解性:溶于DJPO

8) 化学结构式:Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针

保存与运输方法

保存:-20ºC干燥避光保存,至少一年有效。

运输:冰袋运输。

 

注意事项

1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

1.储存液制备

取一管低温保存的Mag-Fluo-4 AM,置于室温回温至少20min。之后加入高质量无水DJPO配制成1~5mM储存液,比如50μgMag-Fluo-4 AM(Mw:817.65 g/mol)溶于12μl DJPO,充分溶解后,即得到5mM储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,且要避光保存。尽快使用完。

 

2.操作步骤

【注意】以下使用方法仅作参考,需根据具体的细胞类型和实验要求做出调整。加载温度范围是RT~37℃,更高温度会提高加载速度,但更低温度能最小化染料的内在化现象。表面活性剂Pluronic®F-127有时加入能促进AM探针在水溶性缓冲液内的均匀分散。

2.1 在所需温度(25℃~37℃)预孵育细胞10min,使其离子梯度达到稳定和平衡。

2.2 取4μl Mag-Fluo-4 AM储存液和5μl 20% Pluronic®F-127,加入1ml细胞培养液,剧烈漩涡混匀得到均匀的探针分散液。

2.3 取250μl上述制备的探针分散液加入750μl含细胞的培养基内,混匀,此时得到终浓度为1~5μM的工作液,根据起始母液浓度来确定。

2.4 根据需求探针孵育15~60min。

2.5 细胞清洗3次,之后继续孵育30min以保证细胞内的探针完全去酯化。之后选择合适的仪器,进行荧光测定。

  

应用示例(来自文献,仅用作参考)

文献一、Zheng JM et al. MagT1 regulated the odontogenic differentiation of BMJPCs induced byTGC-CM via ERK signaling pathway. Stem Cell Res Ther. 2019 Jan 31;10(1):48.

使用方法(细胞内镁离子水平的流式检测):1)用生理培养液(120 mM NaCl, 20 mM HEPES, 4.7 mM KCl, 1.2 mM KH2PO4, 1.2 mM MgSO4, 1.25 mM CaCl2, and 10 mM glucose)于37℃预孵育BMJPCs细胞10min使其达到离子梯度的稳定和平衡;2)用DJPO配制Mag-Fluo-4-AM储存液1mM;3)取4ul Mag-Fluo-4-AM储存液(1mM)和5ul 20% F-127,加入1ml培养基内,充分混匀;4)取0.25ml 分散液加入0.75ml含细胞培养液,使得探针终浓度为1uM;继续孵育30min,之后清洗细胞3次,之后再孵育30min保证细胞内AM基团的完全去酯化;5)之后用流式细胞仪分析荧光强度(Ex/em:480/520nm)。

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针

Fig 1. MagT1 knockdown reduced intracellular Mg2+ level in BMJPCs. Intracellular Mg2+ level was significantly reduced in MagT1 knockdown BMJPCs measured by indicator Mag-Fluo-4-AM using flow cytometry.

文献二、Ainbinder A et al. Role of Mitofusin-2 in Mitochondrial Localization and Calcium Uptake in Skeletal Muscle. Cell Calcium. 2015 Jan;57(1):14-24.

使用方法(肌浆钙离子的mag-fluo-4光度测定):趾短屈肌(FDB)肌肉纤维用Mag-Fluo-4-AM(4 µM)室温加载20min,之后用加含25 µM BTS的无探针溶液清洗20min。之后对纤维进行电刺激,用一系列抽搐刺激(1 ms pulse at 2 Hz)或5个连续性的强直电刺激。mag-fluo-4用480±15nm激发和535±30nm发射检测。

Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针

Fig 2. Measurement of mitochondrial Ca2+ uptake during twitch stimulation in mt-pericam expressing CTRL and Mfn2 KD FDB fibers. A. Average (±SE) traces of mt-pericam fluorescence (402 nm excitation/515 nm emission) in CTRL (black circles) and Mfn2 KD (white circles) fibers during twitch stimulation. B. Average (±SE) relative change in mt-pericam fluorescence (ΔF/F) in CTRL and Mfn2 KD FDB fibers during twitch stimulation. C. Representative mag-fluo-4 traces during twitch stimulation of CTRL (black trace) or Mfn2 KD (grey trace) FDB fibers. D. Average (±SE) relative change in myoplasmic mag-fluo-4 fluorescence during twitch stimulation of CTRL or Mfn2 KD FDB fibers.

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货号

名称 规格
JP4301-1G Pluronic® F-127, Cell Culture Tested细胞培养级 1g
JP4302-1ML Pluronic® F-127 (20% Solution in DJPO), Cell Culture Tested 1ml
JP4541-1MG Mag-Fura-2 Tetrapotassium Salt, Cell Impermeant镁离子荧光探针 1mg
JP4542-500UG Mag-Fura-2 AM, Cell Permeant镁离子荧光探针 10×50μg
JP4543-500UG Mag-Fluo-4 Tetrapotassium Salt, Cell Impermeant镁离子荧光探针 10×50μg
JP4544-100UG Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant镁离子荧光探针

2×50μg

 

  

——Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/JP金畔所有】

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

2×50μg

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Mag-Fluo-4 Tetrapotassium Salt, Cell Impermeant 镁离子荧光探针

Mag-Fluo-4 Tetrapotassium Salt, Cell Impermeant 镁离子荧光探针

货号: JP4543-500UG 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

Mag-Fluo-4Tetrapotassium Salt, Cell Impermeant

镁离子荧光探针

 

订购信息:

产品名称 产品编号 规格 价格(元)   
Mag-Fluo-4 Tetrapotassium Salt, Cell Impermeant JP4543-500UG 10×50μg   2582

 

产品描述

不具细胞膜渗透性的Mag-Fluo-4四钾盐(Mag-Fluo-4 Tetrapotassium Salt)是Fluo-4的一种结构类似物,对镁离子(Mg2+)和钙离子(Ca2+)的Kd值分别是4.7mM和22µM,是一种非常有用的细胞内镁离子指示剂和低亲和性钙离子指示剂。这一水溶性的镁离子指示探针能通过显微注射或膜片钳灌注加载进入胞内。

 

产品特性

1) 同义名:Mag-fluo-4 potassium salt; Mag-Fluo-4四钾盐;Mag-Fluo-4钾盐;

2) 分子式:C25H13F2K4NO10

3) 分子量:681.77g/mol

4) 外观:橙色固体

5) 纯度:≥90%

6) Ex/Em:494/516 nm

7) 溶解性:溶于水

8) 化学结构式:Mag-Fluo-4 Tetrapotassium Salt, Cell Impermeant 镁离子荧光探针

 

 

保存与运输方法

保存:-20ºC干燥避光保存,至少一年有效。

运输:冰袋运输。

 

注意事项

1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存液制备

取一管低温保存的Mag-Fluo-4四钾盐,,置于室温回温至少20min。之后加入适量蒸馏水或水溶性缓冲液配制成相应浓度的储存液。未使用的储存液分装储存在-20℃,且避光保存。至少能稳定保存6个月。

 

相关产品

货号 名称 规格
JP4301-1G Pluronic® F-127, Cell Culture Tested细胞培养级 1g
JP4302-1ML Pluronic® F-127 (20% Solution in DJPO), Cell Culture Tested 1ml
JP4541-1MG Mag-Fura-2 Tetrapotassium Salt, Cell Impermeant镁离子荧光探针 1mg
JP4542-500UG Mag-Fura-2 AM, Cell Permeant镁离子荧光探针 10×50μg
JP4543-500UG Mag-Fluo-4 Tetrapotassium Salt, Cell Impermeant镁离子荧光探针 10×50μg
JP4544-100UG Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant镁离子荧光探针 2×50μg
JP0049-5MG Valinomycin缬氨霉素 5mg
MZ2157-5MG Nigericin, Sodium Salt尼日利亚菌素(钠盐) 5mg
MZ8001-5MG Oligomycin (Mixture of A, B, C)寡霉素(A,B,C混合物) 5mg
JP0070-10MG Antimycin A抗霉素A 10mg
MZ2151-1MG Ionomycin, Free Base离子霉素(游离酸) 1mg
MZ2153-1MG Calcium Ionophore A23187钙离子载体 1mg
MZ2154-1MG Calcium Ionophore 4-bromo-A23187钙离子载体4-溴-A23187 1mg

 

 

——Written/Edited by V. Shallan【版权归集奇生物/JP金畔所有】

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品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

10×50μg

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