化学试剂DOTA-tris (t-Bu ester)B-260,B-264,B-270


化学试剂DOTA-tris (t-Bu ester)

简要描述:化学试剂DOTA-tris (t-Bu ester),DOTAGA-tetra (t-Bu ester),DOTA-mono-NHS tris (t-Bu ester)销售:Macrocyclics供应,Macrocyclics大环中间体,上海金畔生物科技有限公司专业供应Macrocyclics产品。

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品牌 macrocyclics 供货周期 两周
应用领域 医疗卫生,化工,生物产业,石油,制药

化学试剂DOTA-tris (t-Bu ester),DOTAGA-tetra (t-Bu ester),DOTA-mono-NHS tris (t-Bu ester)销售

美国Macrocyclics公司,制造商定制的螯合剂,致力于前沿发展新的螯合化学平台。公司有着广泛的产品,专为生物靶向结合的单克隆抗体和肽片段的双功能配体。Macrocyclics提供广泛的目录产品库,以满足我们的基础和应用研究客户的需求,以及定制的cGMP产品和服务,以加速早期临床开发项目。Macrocyclics还提供与基础螯合化学和生物结合相关的专家咨询服务。宏观周期公司有一个好的研究和发展战略,旨在满足医学界的新兴需求,同时考虑到商业和学术合作。我们的分子成像平台技术适用于铜64、镓68、锆89等多种放射性核素。用于光学和磁共振成像(MRI)的正电子发射断层扫描(PET)和钆及其他镧系离子。Macrocyclics的产品包括一系列广泛的双功能配体,专门为生物靶向设计,结合单克隆抗体和肽片段。自1995年以来,巨环化合物一直是金属配体螯合技术中值得信赖的名称。

产品

B-260

化学式

C₂₈H₅₂N₄O₈

化学名称

1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三叔丁基乙酸酯-10-乙酸

FW(重量)

572.7

CAS 编号

137076-54-1

纯度

≥ 95%

产品

B-264

化学式

C₃₅H₆₄N₄O₁₀

化学名称

2-[1,4,7,10-四氮杂环十二烷-4,7,10-三(乙酸叔丁酯)]-戊二酸-1叔丁酯

FW(重量)

700.9

CAS 编号

306776-79-4

纯度

≥ 94%

产品

B-270

化学式

C₃₂H₅₅N₅O₁₀·HPF₆

化学名称

1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三叔丁基乙酸酯-10-琥珀酰亚胺乙酸酯

FW(重量)

815.8

CAS 编号

819869-77-7

纯度

≥ 94%

上海金畔生物科技有限公司 是一家专注于分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域,以销售为主的生物技术公司。销售的产品涉及,细胞株和菌株、胎牛血清、生化试剂、ELISA试剂盒、抗体和抗原、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备等。上海金畔生物科技有限公司专业代理进口品牌实验产品货号现货供应,*,欲购从速(敬请咨询)化学试剂DOTA-tris (t-Bu ester),DOTAGA-tetra (t-Bu ester),DOTA-mono-NHS tris (t-Bu ester)销售

化学试剂C-Metyl-Ester-Cyclam, 4 HClC022


化学试剂C-Metyl-Ester-Cyclam, 4 HCl

简要描述:化学试剂C-Metyl-Ester-Cyclam, 4 HCl销售:试剂chematech供应,试剂chematech供应,chematech试剂
上海金畔生物供应chematech产品,上海金畔生物科技有限公司专业代理进口品牌实验产品货号现货供应,*,欲购从速(敬请咨询)

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品牌 CheMatech 供货周期 两周
应用领域 医疗卫生,化工,生物产业,石油,制药

化学试剂C-Metyl-Ester-Cyclam, 4 HCl销售

上海金畔生物科技有限公司 是一家专注于分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域,以销售为主的生物技术公司。销售的产品涉及,细胞株和菌株、胎牛血清、生化试剂、ELISA试剂盒、抗体和抗原、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备等。


CheMatech 是欧洲一家有特色的公司,专门从事螯合剂的设计和合成,特别是 MRI 造影剂的DOTANOTA 衍生物前体、PET 和 SPECT 示踪剂以及放射免疫疗法的治疗剂。CheMatech活动分为三个部分:

  • 螯合剂的定制合成: CheMatech 可以帮助合成从概念到大量制备的目标分子。

  • 螯合剂供应商 CheMatech 为您提供范围广泛的大环多胺和双功能螯合剂。

  • 参与联合研究计划(H2020,Marie Curie,ANR,…)

我们为客户提供市场上*的产品,提高他们的研究效率。我们所有的产品都有库存。我们正在努力以zui有竞争力的价格提供我们的产品。我们为您提供30 年螯合剂设计和合成经验,生产从百毫克到公斤级的新型定制螯合剂。我们反应灵敏的科学团队将很乐意回答您关于新产品、定制和大规模合成以及使用我们产品的要求。

化学式 C12H26N4O2, 4HCl
目录号 C022
CAS 编号 504433-88-9
化学名称 1,4,8,11-四氮杂环十四烷-6-羧酸甲酯
分子量 404,20
颜色 白色的
形式 粉末
笔记 作为 4 HCl 盐出售
应用 双功能仙客来前体

化学试剂C-Metyl-Ester-Cyclam, 4 HCl销售

化学试剂DOTA tris(tBu)esterC076


化学试剂DOTA tris(tBu)ester

简要描述:化学试剂DOTA tris(tBu)ester NHS ester销售:试剂chematech供应,试剂chematech供应,chematech试剂
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品牌 CheMatech 供货周期 两周
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化学试剂DOTA tris(tBu)ester NHS ester销售

上海金畔生物科技有限公司 是一家专注于分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域,以销售为主的生物技术公司。销售的产品涉及,细胞株和菌株、胎牛血清、生化试剂、ELISA试剂盒、抗体和抗原、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备等。


CheMatech 是欧洲一家有特色的公司,专门从事螯合剂的设计和合成,特别是 MRI 造影剂的DOTANOTA 衍生物前体、PET 和 SPECT 示踪剂以及放射免疫疗法的治疗剂。

CheMatech活动分为三个部分:

  • 螯合剂的定制合成: CheMatech 可以帮助合成从概念到大量制备的目标分子。

  • 螯合剂供应商 CheMatech 为您提供范围广泛的大环多胺和双功能螯合剂。

  • 参与联合研究计划(H2020,Marie Curie,ANR,…)

我们为客户提供市场上*的产品,提高他们的研究效率。我们所有的产品都有库存,我们通常在24-72 小时内在整个欧洲交付,在世界其他地区一周内交付。

请记住,化学品的成本对我们的客户来说是一个关键点,我们正在努力以zui有竞争力的价格提供我们的产品。

我们为您提供30 年螯合剂设计和合成经验,生产从百毫克到公斤级的新型定制螯合剂。

我们反应灵敏的科学团队将很乐意回答您关于新产品、定制和大规模合成以及使用我们产品的要求。


目录号 C076
化学式 C32H55N5O10,HPF6
CAS 编号 819869-77-7
化学名称 三叔丁基 2,2',2″-(10-(2-((2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)oxy)-2-oxoethyl)-1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1 ,4,7-三基)三乙酸酯
分子量 815.78
颜色 白色的
形式 粉末
笔记 不适用于美国
应用 对伯胺具有特定反应性的受保护 DOTA。

化学试剂DOTA tris(tBu)ester NHS ester销售

Cyanine7.5 NHS Ester Cy7.5 NHS酯(脂溶性)

Cyanine7.5 NHS Ester Cy7.5 NHS酯(脂溶性)

货号: JP4671-5MG 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

Cyanine7.5 NHS Ester Cy7.5 NHS酯(脂溶性)

产品信息

 产品名称  产品编号  规格  价格(元)
 Cyanine7.5 NHS Ester Cy7.5 NHS酯(脂溶性)  JP4671-1MG    1 mg      1500
 Cyanine7.5 NHS Ester Cy7.5 NHS酯(脂溶性)  JP4671-5MG  5mg    3800

【温馨提示】:见我司金畔生物整理的花菁类染料(Cyanine Dyes)产品专题,了解更多精彩内容。

我司(JP)花菁类染料的优势所在:

1)吲哚啉环氮原子上取代基引入乙氧基,结构同Amershan Pharmacia的花菁类染料,应用于基因芯片的双色荧光检测。结构同美国化学会注册CAS号对应结构。乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式(比如Lumiprobe公司)表现出更好的光稳定性,色牢度,且能更好的防止染料自聚。

2)从化学合成和分离纯化角度来看,乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式要求更高,合成难度更大,成本也随之提高,但我司在保质的基础上仍以更有竞争力的价格提供此系列的花菁类染料,欢迎所有科研用户使用我司的产品。

3)可接受定制包装业务。25mg,100mg,500mg,1g,5g………。联系电话:021-50837765,QQ:2971634497。

产品描述

花菁类染料(Cyanine Dyes)是一种在两个氮原子间含聚亚甲基桥键且携带一非定域电荷的分子【见下图】。

 Cyanine7.5 NHS Ester  Cy7.5 NHS酯(脂溶性)

归其结构特征,花菁素具有极其高的消光系数通常高于100,000 L⋅mol-1⋅cm-1。不同的替代基允许控制发光团的性能比如吸光波长,光稳定性和荧光强度。例如,通过选择不同长度的聚亚甲基桥键能够控制吸光和荧光波长:花菁素越长,吸光和发射波长更高,高达至近红外区。

在生命科学领域广受欢迎的花菁类染料由美国卡耐基梅隆大学(CMU)的Alan Waggoner教授和同事于二十世纪90年代早期研发应用。这些染料呈现出低的生物分子非特异性结合,并由其巨大的消光系数和良好的量子产量产生明亮的荧光。目前商业化可提供各种反应性衍生物,比如点击化学用的N-羟基琥珀酰亚胺酯,马来酰亚胺,叠氮化物和其他衍生物。目前花菁染料常以两种异构体的形式供应:一种非磺化的花菁类染料和磺化的花菁类染料,对于许多应用,两种是可以互相替换的,因其光谱属性基本相同。两种染料都可用于DNA和蛋白质等生物分子的标记。两者的区别在于溶解度:磺化染料具水溶性,可以在水环境中标记,无需有机共溶剂,且在水中不易聚集。

Cyanine7.5是一种脂溶性的,近红外(NIR)发射波长的荧光染料。Cyanine7.5 NHS Ester是Cyanine7.5的胺反应活化酯,用于标记生物分子比如蛋白和多肽的氨基基团,从而通过近红外成像来观察这些分子的体内分布。Cyanine7.5 NHS Ester需要在有机共溶剂的体系内进行标记。若是需要纯水溶性的标记体系,请选择水溶性的Sulfo-Cyanine7.5 NHS Ester(Cat#:JP4660-1MG)。

产品特性

1)CAS NO:N/A
2)同义名:Cyanine7.5 NHS ester; Cy7.5 NHS ester; Cy7.5 SE; Cyanine7.5 N-hydroxysuccinimide ester; Cy7.5琥珀酰亚胺酯;Cy7.5 NHS酯;
3)分子式:C48H51IN2O4
4)分子量:846.85g/mol
5)纯度:≥95%
6)外观:深绿色固体
7)溶解性:溶于DMF,DJPO,几乎不溶于水
8)Ex/Em:778/795 nm
9)消光系数:200, 000 L⋅mol-1⋅cm-1
10)化学结构式:

Cyanine7.5 NHS Ester  Cy7.5 NHS酯(脂溶性)
保存与运输方法

保存:-20°C避光干燥保存,至少1年有效。
运输:室温运输。

注意事项

  1. Cyanine7.5 NHS Ester是脂溶性的,先用有机溶剂如DJPO,DMF配制成母液后,再加入水溶性反应溶液内。纯有机溶剂的母液置于-20℃避光保存,最好2周内用完,避免反复冻融。水溶性反应液必须现配现用,尽快用完。
  2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】:Cy染料和生物分子的比例(F/P)=4~12之间荧光强度最高。F/P过高,荧光探针会自我淬灭并且影响生物分子的活性。CyDye NHS在pH 8.5~9.4内标记抗体10min,F/P可达5~6。但在pH 7.0内几乎无反应。我司内部使用Cy3NHS标记Anti-GST抗体发现按1:1,1:5,1:10,和1:20标记得到的F/P分别为0.28:1,1.16:1,2.3:1和4.6:1。

  1. 水溶性Cy3NHS标记Anti-GST抗体【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

商业化购买的抗体如果含有其他蛋白(如血清白蛋白,明胶等),或溶于带氨基的缓冲液,会影响标记。需在标记前对抗体进行纯化。

    1. 于1L 0.15M NaCl溶液中透析Anti-GST(0.5ml,3mg/ml),室温或4℃透析4h。
    2. 换用1L新鲜的0.15M NaCl溶液,4℃透析过夜。
    3. 第二天再换用1L 0.1M NaHCO3(pH 8.3),4℃透析4h。
    4. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
    5. 用0.1M NaHCO3(pH 8.3)稀释少量的抗体,于280nm测其紫外吸收值并计算标记抗体的总量(IgG抗体摩尔吸光系数为170,000 at 280nm)。
    6. 用DJPO配制Cy3 NHS(Mw:765.95),浓度为10mg/ml。根据CyDye NHS和抗体的使用比值(比如1:20)来计算所需要染料的体积。然后慢慢将其加入到抗体溶液中,同时于暗处低速搅拌,室温45min。
    7. 用1L 0.15M NaCl溶液,常温或4℃避光透析4h,以除去未标记上的Cy3 NHS。
    8. 换用新鲜的1L 0.15M NaCl溶液,4℃避光透析过夜。
    9. 换用1L 0.01M PBS/0.01% NaN3溶液室温或4℃避光透析4h,然后在4℃避光再次透析过夜。
    10. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
    11. 用0.01M PBS/0.01% NaN3溶液整数倍稀释标记抗体,测定280nm(蛋白)和552nm(Cy3)处的紫外可见吸光度。
    12. 产品冷冻干燥成粉末或置于0.01M PBS/0.01% NaN3溶液中,-20℃避光保存。

【F/P计算】:

Cy3在552nm下的摩尔吸光系数为150,000L⋅mol-1⋅cm-1,此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1,不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy3本身在280nm处的吸收是552nm处的8%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy3] = A552/150000; [Antibody] =[A280-(0.08×A552)]/170000

F/Pfinal =[Cy3]/ [Antibody]= [1.13×A552]/[A280-(0.08×A552)]

  1. 水溶性Cy5 NHS标记(D-ser2)- Leu-Enkephalin【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】
  1. 低温保存的Cy5 NHS置于室温回温至少20min。往1mg粉末内加入400μl高品质无水DJPO充分溶解。同样,低温保存的玻璃瓶装的(D-ser2)- Leu-Enkephalin(YSGFLT,0.75mg)室温回温后加入400μl高品质无水DJPO充分溶解。将400μl Cy5 NHS加入400μl多肽内。【染料与多肽通常质量比1:1】。
  2. 再加入15μl三乙胺,常温避光搅拌反应混合物,过夜。【若多肽稳定性较弱,则于4℃反应过夜】。
  3. 用HPLC纯度多肽。使用C18柱子(25cm×10mm),每次上样注入2×400μl,30min梯度洗脱从0.1% TFA水溶液到MeCN:H2O (0.1% TFA)=70:30,流速4ml/min。(对不同的多肽选择不同的合适HPLC梯度流动相)
  4. 收集适当的色带峰,标记多肽的保留时间比未标记的多肽长。
  5. 产品冷冻干燥成粉末或置于水溶液中,-20℃避光保存。必要时可用质谱表征。
  6. CyDye标记的蛋白/多肽稳定性取决于蛋白本身。例如标记的IgG在4℃可避光保存2月,更长保存需加入等体积甘油-20℃避光保存。

【F/P计算】:

Cy5在650nm下的摩尔吸光系数为250,000L⋅mol-1⋅cm-1,此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1,不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy5本身在280nm处的吸收是650nm处的5%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy5] = A650/250000; [Peptide] =[A280-(0.05×A650)]/170000

F/Pfinal =[Cy5]/ [Peptide]= [0.68×A650]/[A280-(0.05×A650)]

 

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货号 名称 规格
JP4666-1MG Cyanine3 NHS Ester  Cy3 NHS酯(脂溶性) 1mg
JP4667-1MG Cyanine5 NHS Ester  Cy5 NHS酯(脂溶性) 1mg
JP4668-1MG Cyanine5.5 NHS Ester  Cy5.5 NHS酯(脂溶性) 1mg
JP4669-1MG Cyanine7 NHS Ester  Cy7 NHS酯(脂溶性) 1mg
JP4671-1MG Cyanine7.5 NHS Ester  Cy7.5 NHS酯(脂溶性) 1mg
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JP4657-1MG Sulfo-Cyanine5 NHS Ester磺化Cy3 NHS酯(水溶性) 1mg
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JP4659-1MG Sulfo-Cyanine7 NHS Ester磺化Cy7 NHS酯(水溶性) 1mg
JP4660-1MG Sulfo-Cyanine7.5 NHS Ester磺化Cy7.5 NHS酯(水溶性) 1mg

 

 

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

5mg

货期:

咨询客服

Cyanine7.5 NHS Ester Cy7.5 NHS酯(脂溶性)

Cyanine7.5 NHS Ester Cy7.5 NHS酯(脂溶性)

货号: JP4671-1MG 品牌: Jinpan 标签: 细胞生物学研究

描述

Cyanine7.5 NHS Ester Cy7.5 NHS酯(脂溶性)

产品信息

 产品名称  产品编号  规格  价格(元)
 Cyanine7.5 NHS Ester Cy7.5 NHS酯(脂溶性)  JP4671-1MG    1 mg      1500
 Cyanine7.5 NHS Ester Cy7.5 NHS酯(脂溶性)  JP4671-5MG  5mg    3800

【温馨提示】:见我司金畔生物整理的花菁类染料(Cyanine Dyes)产品专题,了解更多精彩内容。

我司(JP)花菁类染料的优势所在:

1)吲哚啉环氮原子上取代基引入乙氧基,结构同Amershan Pharmacia的花菁类染料,应用于基因芯片的双色荧光检测。结构同美国化学会注册CAS号对应结构。乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式(比如Lumiprobe公司)表现出更好的光稳定性,色牢度,且能更好的防止染料自聚。

2)从化学合成和分离纯化角度来看,乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式要求更高,合成难度更大,成本也随之提高,但我司在保质的基础上仍以更有竞争力的价格提供此系列的花菁类染料,欢迎所有科研用户使用我司的产品。

3)可接受定制包装业务。25mg,100mg,500mg,1g,5g………。联系电话:021-50837765,QQ:2971634497。

产品描述

花菁类染料(Cyanine Dyes)是一种在两个氮原子间含聚亚甲基桥键且携带一非定域电荷的分子【见下图】。

 Cyanine7.5 NHS Ester  Cy7.5 NHS酯(脂溶性)

归其结构特征,花菁素具有极其高的消光系数通常高于100,000 L⋅mol-1⋅cm-1。不同的替代基允许控制发光团的性能比如吸光波长,光稳定性和荧光强度。例如,通过选择不同长度的聚亚甲基桥键能够控制吸光和荧光波长:花菁素越长,吸光和发射波长更高,高达至近红外区。

在生命科学领域广受欢迎的花菁类染料由美国卡耐基梅隆大学(CMU)的Alan Waggoner教授和同事于二十世纪90年代早期研发应用。这些染料呈现出低的生物分子非特异性结合,并由其巨大的消光系数和良好的量子产量产生明亮的荧光。目前商业化可提供各种反应性衍生物,比如点击化学用的N-羟基琥珀酰亚胺酯,马来酰亚胺,叠氮化物和其他衍生物。目前花菁染料常以两种异构体的形式供应:一种非磺化的花菁类染料和磺化的花菁类染料,对于许多应用,两种是可以互相替换的,因其光谱属性基本相同。两种染料都可用于DNA和蛋白质等生物分子的标记。两者的区别在于溶解度:磺化染料具水溶性,可以在水环境中标记,无需有机共溶剂,且在水中不易聚集。

Cyanine7.5是一种脂溶性的,近红外(NIR)发射波长的荧光染料。Cyanine7.5 NHS Ester是Cyanine7.5的胺反应活化酯,用于标记生物分子比如蛋白和多肽的氨基基团,从而通过近红外成像来观察这些分子的体内分布。Cyanine7.5 NHS Ester需要在有机共溶剂的体系内进行标记。若是需要纯水溶性的标记体系,请选择水溶性的Sulfo-Cyanine7.5 NHS Ester(Cat#:JP4660-1MG)。

产品特性

1)CAS NO:N/A
2)同义名:Cyanine7.5 NHS ester; Cy7.5 NHS ester; Cy7.5 SE; Cyanine7.5 N-hydroxysuccinimide ester; Cy7.5琥珀酰亚胺酯;Cy7.5 NHS酯;
3)分子式:C48H51IN2O4
4)分子量:846.85g/mol
5)纯度:≥95%
6)外观:深绿色固体
7)溶解性:溶于DMF,DJPO,几乎不溶于水
8)Ex/Em:778/795 nm
9)消光系数:200, 000 L⋅mol-1⋅cm-1
10)化学结构式:

Cyanine7.5 NHS Ester  Cy7.5 NHS酯(脂溶性)
保存与运输方法

保存:-20°C避光干燥保存,至少1年有效。
运输:室温运输。

注意事项

  1. Cyanine7.5 NHS Ester是脂溶性的,先用有机溶剂如DJPO,DMF配制成母液后,再加入水溶性反应溶液内。纯有机溶剂的母液置于-20℃避光保存,最好2周内用完,避免反复冻融。水溶性反应液必须现配现用,尽快用完。
  2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】:Cy染料和生物分子的比例(F/P)=4~12之间荧光强度最高。F/P过高,荧光探针会自我淬灭并且影响生物分子的活性。CyDye NHS在pH 8.5~9.4内标记抗体10min,F/P可达5~6。但在pH 7.0内几乎无反应。我司内部使用Cy3NHS标记Anti-GST抗体发现按1:1,1:5,1:10,和1:20标记得到的F/P分别为0.28:1,1.16:1,2.3:1和4.6:1。

  1. 水溶性Cy3NHS标记Anti-GST抗体【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

商业化购买的抗体如果含有其他蛋白(如血清白蛋白,明胶等),或溶于带氨基的缓冲液,会影响标记。需在标记前对抗体进行纯化。

    1. 于1L 0.15M NaCl溶液中透析Anti-GST(0.5ml,3mg/ml),室温或4℃透析4h。
    2. 换用1L新鲜的0.15M NaCl溶液,4℃透析过夜。
    3. 第二天再换用1L 0.1M NaHCO3(pH 8.3),4℃透析4h。
    4. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
    5. 用0.1M NaHCO3(pH 8.3)稀释少量的抗体,于280nm测其紫外吸收值并计算标记抗体的总量(IgG抗体摩尔吸光系数为170,000 at 280nm)。
    6. 用DJPO配制Cy3 NHS(Mw:765.95),浓度为10mg/ml。根据CyDye NHS和抗体的使用比值(比如1:20)来计算所需要染料的体积。然后慢慢将其加入到抗体溶液中,同时于暗处低速搅拌,室温45min。
    7. 用1L 0.15M NaCl溶液,常温或4℃避光透析4h,以除去未标记上的Cy3 NHS。
    8. 换用新鲜的1L 0.15M NaCl溶液,4℃避光透析过夜。
    9. 换用1L 0.01M PBS/0.01% NaN3溶液室温或4℃避光透析4h,然后在4℃避光再次透析过夜。
    10. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
    11. 用0.01M PBS/0.01% NaN3溶液整数倍稀释标记抗体,测定280nm(蛋白)和552nm(Cy3)处的紫外可见吸光度。
    12. 产品冷冻干燥成粉末或置于0.01M PBS/0.01% NaN3溶液中,-20℃避光保存。

【F/P计算】:

Cy3在552nm下的摩尔吸光系数为150,000L⋅mol-1⋅cm-1,此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1,不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy3本身在280nm处的吸收是552nm处的8%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy3] = A552/150000; [Antibody] =[A280-(0.08×A552)]/170000

F/Pfinal =[Cy3]/ [Antibody]= [1.13×A552]/[A280-(0.08×A552)]

  1. 水溶性Cy5 NHS标记(D-ser2)- Leu-Enkephalin【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】
  1. 低温保存的Cy5 NHS置于室温回温至少20min。往1mg粉末内加入400μl高品质无水DJPO充分溶解。同样,低温保存的玻璃瓶装的(D-ser2)- Leu-Enkephalin(YSGFLT,0.75mg)室温回温后加入400μl高品质无水DJPO充分溶解。将400μl Cy5 NHS加入400μl多肽内。【染料与多肽通常质量比1:1】。
  2. 再加入15μl三乙胺,常温避光搅拌反应混合物,过夜。【若多肽稳定性较弱,则于4℃反应过夜】。
  3. 用HPLC纯度多肽。使用C18柱子(25cm×10mm),每次上样注入2×400μl,30min梯度洗脱从0.1% TFA水溶液到MeCN:H2O (0.1% TFA)=70:30,流速4ml/min。(对不同的多肽选择不同的合适HPLC梯度流动相)
  4. 收集适当的色带峰,标记多肽的保留时间比未标记的多肽长。
  5. 产品冷冻干燥成粉末或置于水溶液中,-20℃避光保存。必要时可用质谱表征。
  6. CyDye标记的蛋白/多肽稳定性取决于蛋白本身。例如标记的IgG在4℃可避光保存2月,更长保存需加入等体积甘油-20℃避光保存。

【F/P计算】:

Cy5在650nm下的摩尔吸光系数为250,000L⋅mol-1⋅cm-1,此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1,不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy5本身在280nm处的吸收是650nm处的5%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy5] = A650/250000; [Peptide] =[A280-(0.05×A650)]/170000

F/Pfinal =[Cy5]/ [Peptide]= [0.68×A650]/[A280-(0.05×A650)]

 

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规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

1mg

货期:

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