Mirus CHO细胞高滴度瞬转表达系统助力新冠肺炎疫苗和单抗研发!

在新冠肺炎疫情的严峻考验下,我国生物医药领域的科研人员正在争分夺秒的研发疫苗和单抗药物,如何快速高效的获得大量新型冠状病毒重组蛋白和单抗是面临的重要问题。今天小编为大家推荐一款能在短时间内获得大量重组蛋白的CHO细胞瞬时转染和蛋白高滴度表达系统——CHOgro® High Yield Expression System。

Mirus CHO细胞高滴度瞬转表达系统助力新冠肺炎疫苗和单抗研发!

CHOgro® High Yield Expression System由上海金畔生物科技有限公司代理的Mirus品牌在2019年推出,一经上市就被国内外多家生物医药企业验证并获得一致好评。该产品不仅能提高CHO细胞瞬转效率,还能大幅提升重组蛋白产量。更重要的是,这套系统操作流程精简,从转染到收获蛋白最快只需要7天,是当下提升药物研发效率的不二之选。

Mirus CHO细胞高滴度瞬转表达系统助力新冠肺炎疫苗和单抗研发!

CHOgro® High Yield Expression System(货号MIR6270)产品信息如上表所示,其核心组分是CHO细胞CD培养基(货号MIR6200)和CHO细胞高效转染试剂盒(转染试剂TransIT-PRO+Titer Enhancer,货号MIR6225),此外还包含了复合物形成溶液Complex Formation Solution(货号MIR 6210)和泡沫稳定剂Poloxamer 188 Solution(货号MIR 6230)等转染辅助试剂。该套系统的组分可以根据实验需要任意搭配购买,其中,CD培养基可兼容多种转染方法,CHO细胞高效转染试剂盒也能任意搭配其他的培养基。因此,这不仅是一个CHO细胞的瞬转系统,更是一套可以自由组合和优化的蛋白表达平台!

CHOgro®产品优势特色

      高产量 –最快在7天内就能获得较高的蛋白表达量;

      快捷简单的操作流程 -转染、添加Enhancer和转移培养温度一天内完成;

      无动物源成分配方,无法规风险;

      更低成本,高性价比;

      整套产品内组分可随意搭配优化。

CHOgro®产品使用效果

与PEI的转染方法相比,CHOgro系统在转染效率及蛋白产量方面都有明显优势。

Mirus CHO细胞高滴度瞬转表达系统助力新冠肺炎疫苗和单抗研发!

下图是CHOgro® High Yield Expression System(红色)与其他品牌CHO细胞瞬转系统(灰色)在表达几个不同单抗的产量对比。Mirus CHO细胞高滴度瞬转表达系统的蛋白产量与竞争品牌相比具有显著优势。

Mirus CHO细胞高滴度瞬转表达系统助力新冠肺炎疫苗和单抗研发!

值得强调的是,如此高效的瞬转表达系统,操作流程却非常简单。如下图所示,仅需在细胞转染当天加入Titer Enhancer,并将细胞转移到32℃,8% CO2培养7-14天即可收获蛋白。

Mirus CHO细胞高滴度瞬转表达系统助力新冠肺炎疫苗和单抗研发!

综上所述,提高CHO细胞瞬转的蛋白产量,节约研发时间,同时还能降低培养成本,MirusCHOgro® High Yield Expression System是一个非常好的选择。

如果您对该产品感兴趣,欢迎随时联系Mirus中国代理上海金畔生物科技有限公司,我们会为您提供一站式产品方案,全面的产品资料和技术支持服务,还有试用名额可以申请哦!更多产品详情欢迎致电上海金畔生物科技有限公司全国客服热线021-50837765或登录上海金畔生物科技有限公司官网www.jinpanbio.cn查询。

蛋白免疫印迹检测试剂盒

蛋白免疫印迹检测试剂盒酶联免疫分析(EIA)用亲和力抗体检测蛋白是一种很特殊的方法。用酶标亲和力抗体和敏感底物一起用免疫组化的方法来检测与膜蛋白绑定的样本。随着蛋白结合在膜上后,用一抗选择性的和蛋白结合。通过特定单抗和血清样本的筛选,相应蛋白会结合到膜上。与碱性磷酸酶相偶联的酶标二抗直接作用于此部位。AP的底物用的是5-bromo-4-chloro-3-indolyl- phosphate/nitroblue tetrazolium (BCIP/NBT)。碱性磷酸酶可以促进BCIP的去磷酸化,从而在抗体作用部位形成不溶于水的紫色沉淀物。当曝光时颜色会有些许衰退。

蛋白免疫印迹检测试剂盒包含酶标记的具有亲和性的纯化抗体来检测小鼠,兔或者血清样本。使用中,酶标二抗(试剂盒提供)还可以在没有中介抗体的情况下直接检测小鼠,兔的膜蛋白。此试剂盒无需其他缓冲液。

产品名称

货号

规格

价格

详情

PRINCIPLE OF THE PROTEIN DETECTOR‘ WESTERN BLOT KIT

55-11-50

2500cm2

欢迎咨询

说明书

随着实验进行,目的蛋白一定会被固定在检测膜上。硝化纤维素,聚乙二烯二氟化物(PDVP)和聚酰胺纤维膜都可以应于于此试剂盒。对斑点印迹实验来说,蛋白以斑点形式出现并被固定到膜上;对免疫印迹实验来说,蛋白通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分来并通过电转仪转移到膜上。

以上产品来自KPL公司,它是美国最早实现亲和素纯化二抗商业化的生物公司,同时也是世界上较大的二抗和底物显色系统生产商。产品有:亲和纯化的抗体,WB、IHC、ELISA 底物及 Kit,蛋白检测和纯化试剂盒,核酸标记和检测等试剂。为全球科研与诊断试剂生产厂商持续提供最优质的产品。

另外上海金畔生物科技有限公司公司还会根据客户的实际需求提供不同类型的生化试剂产品,你所需要都能在上海金畔生物科技有限公司公司找到一个圆满的解决方案。作为一站式服务和生命科学研究解决方案提供者,上海金畔生物科技有限公司还有多种蛋白提取、蛋白电泳、细胞染料以及显色发光底物等试剂。我们能为您提供一站式的产品及实验解决方案。如果您对上述产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的最优产品和解决方案,或索取相关手册和资料。我们会为您做的更多!

Western Blot内参抗体如何选择?

内参是由管家基因编码表达的蛋白,它们在各组织和细胞中表达相对恒定。主要用来校正蛋白质定量、上样过程中存在的误差,从而保证实验结果的准确性。也可以作为空白对照,检测蛋白转膜情况是否完全、整个蛋白免疫印迹显色发光体系是否正常。内参抗体种类很多,常见的内参抗体包括β-actin、β-tubulin、GAPDH等,那么我们该如何选择合适的内参抗体呢?

样本种属来源:

      哺乳动物的组织或者细胞样本通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、HistoneH3等

      植物样本则可以选择actin、Rubisco等

      研究者也需要参照文献报导,选择合适的蛋白作为内参

目的蛋白表达部位:

      全细胞蛋白检测一般用GAPDH、β-actin、β-tubulin等抗体作为内参。而针对于核蛋白的定量,特别是样本蛋白就是核蛋白时,选择恰当的核蛋白内参则更能体现内部参照的价值。常用的核内参抗体有Lamin A、Lamin B、Histone H3;除此之外,其它常见的核蛋白内参还有PCNA、K70、K80等;在一些文献报道中,ERK2、TATA binding protein (TBP) 以及c-Jun、c-Fos等都有使用。而对于膜蛋白检测,常用的内参抗体为Na+ /K+-ATPase。

      对于一些植物的样本,则需要特别的植物Actin蛋白作为内参。当实验样品中只是核蛋白,而不是细胞总蛋白提取液时,可以用组蛋白H(Histone H),或者增殖细胞核抗原(PCNA)等作为核内参抗体。对于线粒体蛋白的检测,常用COX IV或VDAC1作为内参抗体,这里面COX IV又是被引用最多的线粒体内参。对于叶绿体蛋白的检测,常用Rubisco作为内参。

目的蛋白大小:

选择内参抗体时应考虑目的蛋白分子量大小,通常保证目的蛋白与内参蛋白分子量相差5kDA以上

蛋白表达要恒稳:

挑选的内参是否会受实验变化影响。例如,GAPDH是常用的内参,但在缺氧和糖尿病等疾病存在下,会增加GAPDH在特定细胞和组织中的表达,在代谢糖酵解的研究中就不适合作为内参。

上海金畔生物科技有限公司为您推荐Cali-Bio和Agrisera公司经过验证的,高质量的内参抗体,产品如下:

Western Blot内参抗体如何选择?

产品示例:

Western Blot内参抗体如何选择?AS132640(Actin)Western Blot内参抗体如何选择?AS03037(Rubisco)

具有增强活性&稳定性的免疫蛋白


具有增强活性&稳定性的免疫蛋白

具有增强活性&稳定性的免疫蛋白

具有增强活性&稳定性的免疫蛋白

AdipoGen Life Sciences专注于从哺乳动物细胞中生产具有增强活性和稳定性的重组蛋白。通过采用专有的内部技术以及成熟且公开的技术,为细胞治疗研究等不同研究领域设计、开发与生产创新重组蛋白。

 


为in vivo/in vitro研究提供解决方案

NEW   与 Fc 结合的单体蛋白(KIH技术)

AdipoGen Life Sciences利用knobs-into-holes(KIH)技术将各种白细胞介素(如IL-2、IL-37和IL-38)与Fc融合蛋白结合。最终的KIH蛋白为单体蛋白,可极大地增强稳定性并改善药代动力学(PK),同时保持细胞因子活性。



具有增强活性&稳定性的免疫蛋白

产品编号

产品名称

来源

规格

AG-40B-0223

IL-2 (human) Superkine H9T   (monomeric):Fc-KIH (human)(rec.)
    IL-2 (人) Superkine H9T (单体):Fc-KIH (人) (重组)

HEK 293细胞

3 x 10 μg

10 μg

100 μg

AG-40B-0224

IL-2 (human) (monomeric):Fc-KIH   (human) (rec.)
    IL-2 (人) (单体):Fc-KIH (人) (重组)

HEK 293细胞

3 x 10 μg

10 μg

100 μg

AG-40B-0225

IL-2 (mouse) (monomeric):Fc-KIH   (human) (rec.)
    IL-2 (小鼠) (单体):Fc-KIH (人) (重组)

HEK 293细胞

3 x 10 μg

10 μg

100 μg

TNF配体多聚体蛋白/MultimericLigands

内源性TNF超家族配体以膜的形式(如FasL、TRAIL、CD40L、OX40L)表现出活性,或通过与细胞(如APRIL)表面的蛋白聚糖结合来寡聚化分泌和激活。

MultimericLigands™由两个三聚体TNFSF配体组成,它们通过脂联素【ACRP30headless】的寡聚胶原结构域连接,模拟天然配体的自然膜辅助聚集。

具有增强活性&稳定性的免疫蛋白

产品编号

产品名称

来源

规格

作用

AG-40B-0010

CD40L (human) (multimeric)   (rec.)
    重组人CD40L(多聚体)

CHO 细胞

3 x 10 μg

有效的B细胞扩增工具

10 μg

AG-40B-0130

FasL (human) (multimeric)   (rec.)
    重组人FasL(多聚体)

HEK 293细胞

3 x 10 μg

诱导人Jurkat T细胞的凋亡

10 μg

COMP-融合蛋白

COMP-融合蛋白基于软骨低聚基质蛋白(COMP)的五聚体化结构域(最小的盘绕结构域),通过一个特定的连接体与目标蛋白融合。AdipoGen Life Sciences利用这项技术生产出更具亲和力和生物活性的细胞因子。

具有增强活性&稳定性的免疫蛋白

产品编号

产品名称

来源

规格

AG-40B-0147

COMP (rat):Angiopoietin-1   (human) (rec.)
    重组型COMP (大鼠):血管生成素-1 (人)

CHO 细胞

5 x 10 µg

50 µg

10 μg

AG-40B-0181

VISTA (mouse):COMP (mouse)   (rec.) (His)
    VISTA(小鼠):COMP(小鼠)(重组)(His)

HEK 293细胞

50 µg

Fc融合蛋白(野生型或非溶解性)

细胞因子序列与IgG(人或小鼠)Fc结构域的融合决定了其在体内持续循环的半衰期。Fc结构域独立折叠,可以提高伴侣分子在体外和体内的溶解度和稳定性。非溶解性Fc融合蛋白含有IgGs Fc片段的补体(C1q)和FcgR I结合位点的突变,这使得融合蛋白不会具有抗体靶向的细胞毒性(ADCC)和补体靶向的细胞毒性(CDC)。


具有增强活性&稳定性的免疫蛋白

产品编号

产品名称

来源

规格

CHI-MF-120A4

CD152 [CTLA-4] (mouse):Fc   (mouse) (rec.) (non-lytic)
    CD152 [CTLA-4] (小鼠):Fc (小鼠) (重组) (非溶解性)

NS1 细胞

100 μg

500 µg

CHI-MF-11135

IL-35 (mouse):Fc (human)   (rec.)
    白介素35 (小鼠):Fc (人) (重组)

CHO细胞

5 μg

25 μg

AG-40B-0039

LAG-3 (mouse):Fc (mouse)   (rec.)
    重组型LAG-3(小鼠):Fc(小鼠)

CHO细胞

50 μg

※以上产品仅供实验研究用

蛋白低吸附容器系列 Proteosave™ SS


蛋白低吸附容器系列 Proteosave™ SS

蛋白低吸附容器系列 Proteosave™ SS

蛋白低吸附容器系列 Proteosave™ SS

Proteosave™是一种采用 S-BIO 创新开发的光交联超亲水性聚合物,固定在塑料容器内部使其形成高密度亲水基团,能够有效抑制蛋白和肽的非特异性吸附的产品。

◆特点


● 减少样品损失,防止从容器中析出溶出物

在塑料容器内部均匀地涂抹光交联超亲水性聚合物、並风干以及通过 UV 照射,使涂膜硬化,并制造高密度亲水基团表面,从而抑制蛋白和肽的非特异性吸附,减少样品损失,并进一步防止从容器中析出溶出物


 耐有机溶剂性与耐热性也大幅度提升

通过光交联与基体之间产生共价键,使得传统的涂抹难以实现的耐有机溶剂性和耐热性也得以保持。

◆用途


● 蛋白提取样品的制备和保存容器

理想情况下是尽量在native的状态下处理提取蛋白,并短时间内完成实验。

通过使用Proteosave™ SS可尽可能抑制提取蛋白的变性,提高回收率。

当必须延长实验时间的时候,亦可在-80°C下长期保存,并且仍能保持回收率。


● 蛋白纯化的纯化容器和色谱馏分收集器

由于吸附时瞬间发生的,即使高效地完成了一系列操作,回收率还是很低,在极端的案例中,也有在提高纯度时,目标蛋白消失的例子。

Proteosave™ SS在纯化时可作为馏分收集器,防止蛋白变性、失活和损失,并且还能作为高纯度贵重样品的保存容器。


● 蛋白定量样品的制备和反应容器

对于在痕量区域中的定量来说,吸附引起的样品本身的浓度变化也是一个问题,但也需要注意标准曲线的标准浓度变化。

由于没有办法验证其可靠性,所以可能会在没有意识的情况下相信错误的结果。

Proteosave™ SS可防止这类样品的浓度变化,提高定量结果的信赖性。


● 蛋白分析的样品制备、反应容器和色谱馏分收集器

在检测生物活性时,表面活性剂等的蛋白稳定或吸附防止剂的混入可能会抑制反应。

通过使用Proteosave™ SS,无需添加此类添加物,可在native的状态下分析样品。

此外,使用Proteosave™ SS保存的酶可以维持良好的活性,还能有效地用作蛋白酶等的酶保存、制备和反应容器。

◆应用实例

蛋白组学中的使用示例


■与其他公司低吸附产品比较LC-MS中肽的鉴定值

蛋白低吸附容器系列 Proteosave™ SS

实验条件


容器:Proteosave™ SS 1.5 mL微管、其他公司5种

样品:肝癌细胞Hep3B来源肽

容量:300 ng

机种:nanoLC-Ultra 2D with TripleTOF® 5600

色谱柱:75 μm×150 mm, ChromXP C18-CL, 3 μm 120 Å

洗脱液:A溶液:0.1% FA and 1% CAN

洗脱液:B溶液:0.1% FA and 99% CAN

肽鉴定软件:Mascot Server


数据提供:国立研究开发法人国立癌症研究中心研究所 创药临床研究邻域 纸田正博

小分子化合物的使用案例

■比较各容器中小分子化合物的吸附


蛋白低吸附容器系列 Proteosave™ SS

实验条件


容器:Proteosave™ SS 1.5 mL微管、无涂层1.5 mL微管

浓度:0.1 μg/mL

样品:易吸附于容器的非离子性小分子化合物

1. Digoxin(心绞痛药)

2. Paclitaxel(抗癌药)

检测方法:将样品放置于管内1 h,使用LC-MS/MS确认

Adsorption (%) = 100 – Concentration in the 0 and 1h sample / Concentration in the initial sample x 100


· 据Sekisui Medical Co., Ltd. 药物研发支持中心评估

耐有机溶剂性与耐热性/耐寒性


 对应产品:材质为聚丙烯的产品

 使用微管1.5 mL进行实验

■有机溶剂


1H

5H

10%

50%

100%

10%

50%

100%

甲醇

乙醇

2-丙醇

甘油

乙腈

丙酮

DMSO

2-巯基乙醇

○:没问题;-:未确认;×:劣化



■耐热性/耐寒性

10 min

30 min

24 h

6 month

120℃(高温灭菌)

×

100℃(煮沸)

60℃

40℃

-4℃

-80℃

 ○:没问题;-:未确认;×:劣化


■表面活性剂

0.10%

1.00%

CHAPS

TritonX

Tween20

SDS

○:没问题;-:未确认;×:劣化

◆产品列表


Proteosave™ SS(耐有机溶剂;耐热型)


蛋白低吸附容器系列 Proteosave™ SS

蛋白低吸附容器系列 Proteosave™ SS

产品编号

产品名称

材质

规格

包装

MS-4205MZ

Proteosave™ SS 微管0.5 mL

聚丙烯

未灭菌

500 pcs/case

MS-4255MZ

Proteosave™ SS 微管0.5 mL R

辐射灭菌

500 pcs/case

MS-4215MZ

Proteosave™ SS 微管1.5 mL

未灭菌

500 pcs/case

MS-4265MZ

Proteosave™ SS 微管1.5 mL R

辐射灭菌

500 pcs/case

MS-4201XZ

Proteosave™ SS 离心管0.5 mL

未灭菌

500 pcs/case

MS-4202XZ

Proteosave™ SS 离心管1.5 mL

未灭菌

500 pcs/case

储存温度:室温   保质期:生产后两年

Proteosave™ SS

蛋白低吸附容器系列 Proteosave™ SS

蛋白低吸附容器系列 Proteosave™ SS

蛋白低吸附容器系列 Proteosave™ SS

产品编号

产品名称

材质

规格

包装

MS-52150Z※1

Proteosave™ SS 离心管15 mL

PET

未灭菌

100 pcs/case

MS-52550Z

Proteosave™ SS 离心管50 mL R

聚丙烯

辐射灭菌

100 pcs/case

MS-8296FZ

Proteosave™ SS孔板96F

聚苯乙烯

无盖,未灭菌

50 pcs/case

MS-8296VZ

Proteosave™ SS孔板96V

聚丙烯

无盖,未灭菌

20 pcs/case

MS-3296UZ

Proteosave™ SS孔板96U

聚苯乙烯

无盖,未灭菌

50 pcs/case

储存温度:室温   保质期:生产后两年

※1 规格可能温度:-80°C~40°C

※以上产品仅供实验研究用