HDAC比色分析试剂盒(HDAC Colorimetric Assay Kit)TBS2065


HDAC比色分析试剂盒(HDAC Colorimetric Assay Kit)

简要描述:HDAC比色分析试剂盒(HDAC Colorimetric Assay Kit)组蛋白是染色质的主要蛋白质成分。通过乙酰化和去乙酰化修饰组蛋白影响染色质结构并调节基因表达。组蛋白高乙酰化与转录增加密切相关,而低乙酰化与转录抑制相关。

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品牌 其他品牌 货号 TBS2065
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HDAC荧光测定试剂盒(HDAC Fluorometric Assay Kit)

组蛋白是染色质的主要蛋白质成分,它们充当DNA缠绕的线轴。组蛋白通过乙酰化和去乙酰化的共价修饰影响染色质结构并调节基因表达。组蛋白高乙酰化与转录增加密切相关,而低乙酰化与转录抑制相关。组蛋白去乙酰化酶(HDACs)催化组蛋白上ɛ-N-acetyl赖氨酸氨基酸乙酰基的去除,并作为基因的转录阻遏物。组蛋白去乙酰化酶被分为三类。第一类(HDAC 1、2、3、8)和第二类(HDAC 4、5、6、7和9)是含锌水解酶。III类脱乙酰酶由sirtuin酶家族成员(Sir 1至7)组成。正在研究HDAC II类和I类抑制剂作为癌症和神经退行性疾病(如亨廷顿舞蹈症和阿尔茨海默病)的治疗方法。sir tuin 1(III类)酶代表了治疗年龄相关疾病和II型糖尿病的靶点。

The TriboHDAC比色测定试剂盒提供了一种方便、灵敏和简单的方法,使用比色底物来定量各种来源的酶的HDAC活性。在HDAC试验中,乙酰化底物与含HDAC的样品一起孵育。底物的脱乙酰化使其在HDAC显色剂的存在下敏化,并产生比色底物,可在OD400nm处检测到。试剂盒中包含的底物是细胞可渗透的,该试验可以在96孔板的细胞培养中直接测量HDAC活性,而无需耗时的细胞提取步骤。该试剂盒也可用于具有提取物或纯化酶的HDAC抑制剂的HTS。

贮藏条件

将基材储存在-20°C的避光环境中。其他成分可储存在4°c下。保质期:12个月。

HDAC比色分析试剂盒(HDAC Colorimetric Assay Kit)

HDAC荧光测定试剂盒(HDAC Fluorometric Assay Kit)TBS2060


HDAC荧光测定试剂盒(HDAC Fluorometric Assay Kit)

简要描述:HDAC荧光测定试剂盒(HDAC Fluorometric Assay Kit)组蛋白是染色质的主要蛋白质成分。通过乙酰化和去乙酰化修饰组蛋白影响染色质结构并调节基因表达。组蛋白高乙酰化与转录增加密切相关,而低乙酰化与转录抑制相关。组蛋白去乙酰化酶(HDACs)催化组蛋白上N-乙酰赖氨酸氨基酸中乙酰基的去除,通常导致转录沉默。组蛋白去乙酰化酶被分为四类。

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品牌 其他品牌 货号 TBS2060
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HDAC荧光测定试剂盒(HDAC Fluorometric Assay Kit)

组蛋白是染色质的主要蛋白质成分。通过乙酰化和去乙酰化修饰组蛋白影响染色质结构并调节基因表达。组蛋白高乙酰化与转录增加密切相关,而低乙酰化与转录抑制相关。组蛋白去乙酰化酶(HDACs)催化组蛋白上N-乙酰赖氨酸氨基酸中乙酰基的去除,通常导致转录沉默。组蛋白去乙酰化酶被分为四类。第一类(HDAC 1、2、3、8)和第二类(HDAC 4、5、6、7和9)是含锌水解酶。第三类HDACs由sirtuin酶家族成员(Sir 1至7)组成。第四类仅包括HDAC11。TriboTM HDAC活性检测试剂盒为测量各种酶源的HDAC活性提供了一种便捷、均一的方法。它使用荧光底物提供HDAC活性的定量。在HDAC试验中,乙酰化底物与含HDAC的样品一起孵育。底物的脱乙酰化使其对HDAC显影剂敏感,并产生AMC荧光团,可在Ex354nm/Em442nm处检测到。试剂盒中包含的底物是细胞可渗透的,该试验可以在96孔板的细胞培养中直接测量HDAC活性,而无需耗时的细胞提取步骤。该试剂盒也可用于具有提取物或纯化酶的HDAC抑制剂的HTS。

方法

  • 荧光计

贮藏条件

将试剂盒储存在–20°的避光环境中。保质期:12个月。

HDAC荧光测定试剂盒(HDAC Fluorometric Assay Kit)

cisbio 磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 细胞试剂盒64HH3PEG


cisbio 磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 细胞试剂盒

简要描述:磷酸化组蛋白 H3 (Ser10) 检测能够检测组蛋白 H3 尾部的 Ser10 磷酸化,组蛋白 H3 是基因表达和有丝分裂的关键调节因子。Ser10 的磷酸化与有丝分裂和减数分裂期间的染色体浓缩密切相关。cisbio 磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 细胞试剂盒

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应用领域 医疗卫生,生物产业,制药,综合

cisbio 磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 细胞试剂盒

cisbio 磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 细胞试剂盒

概述:磷酸化组蛋白 H3 (Ser10) 检测能够检测组蛋白 H3 尾部的 Ser10 磷酸化,组蛋白 H3 是基因表达和有丝分裂的关键调节因子。Ser10 的磷酸化与有丝分裂和减数分裂期间的染色体浓缩密切相关。

磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 检测原理cisbio 磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 细胞试剂盒64HH3PEG

磷酸化组蛋白 H3 (Ser10) 检测可测量在 Ser10 位点磷酸化的组蛋白 H3。与 Western Blot 不同,该检测基于平板,不需要凝胶、电泳或转移。磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 检测使用 2 种标记抗体:一种带有供体荧光团,另一种带有受体。选择第一种抗体是因为它能特异性结合蛋白质上的磷酸化基序,第二种是因为它能够独立于蛋白质的磷酸化状态识别蛋白质。蛋白质磷酸化能够形成涉及标记抗体的免疫复合物,并使供体荧光团靠近受体,从而产生 FRET 信号。

磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 2 板检测方案

cisbio 磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 细胞试剂盒64HH3PEG

2 板协议涉及在裂解前在 96 孔板中培养细胞,然后将裂解物转移到 384 孔低体积检测板,然后添加磷酸组蛋白 H3 (Ser10) HTRF 检测试剂。该协议使细胞的生存能力和汇合度得到监测。

磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 1 板测定方案

cisbio 磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 细胞试剂盒64HH3PEG

使用 HTRF 试剂检测磷酸化组蛋白 H3 (Ser10) 可以在用于培养、刺激和裂解的单个板中进行。无需洗涤步骤。这种 HTS 设计的协议可实现小型化,同时保持稳健的 HTRF 质量。

HTRF 磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 检测与蛋白质印迹法的比较

cisbio 磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 细胞试剂盒64HH3PEG

将指数生长的 Hela 细胞培养至 80% 汇合度,并用诺考达唑处理 16 小时。培养基去除和裂解后,通过离心收集可溶性上清液。等量的裂解物用于 WB 和 HTRF 的并排比较。HTRF 检测的灵敏度是 Western Blot 的 25 倍。使用 HTRF 磷酸组蛋白 H3 (Ser10),仅 256 个细胞就足以进行最小信号检测,而 Western Blot 信号则需要 6,400 个细胞。HTRF 检测的灵敏度是 Western Blot 的 25 倍。

磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 作为细胞增殖的有丝分裂生物标志物

cisbio 磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 细胞试剂盒64HH3PEG

将 Hela 和 A431 细胞接种在 96 孔板中,并用 Nocodazole 处理 16 小时,Nocodazole 是一种抗有丝分裂剂,可解聚微管并在组蛋白 H3 Ser10 磷酸化达到最大时阻断细胞有丝分裂。去除细胞培养基后,加入 50 µl、100 µl 或 200 µl 裂解缓冲液孵育 30 分钟。将 16 µl 的每种裂解物转移到 384sv 白板上进行 HTRF 分析。将裂解体积增加至 200µl 可改善 HTRF 检测信号的线性度。

磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 作为极光激酶 B 抑制的读数

cisbio 磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 细胞试剂盒64HH3PEG

cisbio 磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 细胞试剂盒64HH3PEG

细胞周期中的磷酸组蛋白 H3-Ser10

总体组蛋白磷酸化在细胞周期期间波动非常显着,其特征在于有丝分裂中丝氨酸 10 上组蛋白 H3 磷酸化的峰值。极光激酶 B 直接负责有丝分裂组蛋白 H3 Ser10 磷酸化。与 BORA 复合的 Aurora 激酶 A 负责在 G2 期初始激活 PLK1,导致在 G2/M 转换检查点激活细胞周期蛋白依赖性激酶 1 有丝分裂进入。极光激酶 A 在人类癌症中经常被扩增,极光激酶 A 在人类肿瘤中的过度表达与不良预后和基因组不稳定相关。此外,极光激酶 B 的高表达水平与胶质母细胞瘤、卵巢癌和肝细胞癌的不良预后相关。

cisbio 磷酸组蛋白 H3 (Ser10) 细胞试剂盒64HH3PEG

博百欧天然组蛋白抗原系列,让AHAs检测更准确

组蛋白(Histone)是细胞核内的一种碱性蛋白,由H1, H2A, H2B, H3和H4五个家族成员组成。 其中, H2A-H2B二聚体与H3-H4二聚体各两组形成一个八聚体的核(Core),DNA缠绕于核外侧,共同构成核小体的拓扑结构。H1作为连接元件(Linker)与核小体之间的DNA连接区结合。

博百欧天然组蛋白抗原系列,让AHAs检测更准确

图片来源:Database (Oxford). 2016; 2016: baw014.

这5种组蛋白都有各自对应的自身抗体。抗DNA的自身免疫反应与抗组蛋白的自身免疫反应间具有连锁性,抗DNA抗体阳性的患者常同时能检出抗组蛋白自身抗体(AHAs),但AHAs阳性并不一定伴有抗DNA抗体。

抗组蛋白自身抗体(AHAs)常见于多种自身免疫性疾病,在30-70%的系统性红斑狼疮(SLE)患者体内可见,其中H1和H2A-H2B是最常见的抗体靶点。AHAs也普遍存在于Felty综合征(80%)、RA相关的血管炎(75%)和幼年型类风湿关节炎JRA(60%)中。在非风湿性自身免疫疾病中,原发性胆汁性肝硬化患者血清中AHAs的阳性检出率约有76%,且大部分是抗H1抗体。AHAs在药物性狼疮患者中的检出率也很高(>95%)。普鲁卡因酰胺诱导的狼疮患者体内主要出现抗H2A-H2B二聚体的IgG类抗体,且抗体与疾病的临床活动性密切相关。

遗传学研究发现,组蛋白的氨基酸序列在哺乳动物物种之间高度保守。博百欧天然组蛋白抗原(包含所有五种主要组蛋白:H1、H3、H2B、H2A和H4)是在温和的理化条件下用多种色谱层析纯化技术从小牛胸腺中制备的,以获得对病人自身抗体的较大反应性。与此同时,针对AHAs成分复杂,临床检测工作中常发生信号强度弱甚至漏检的情况,博百欧除了提供了两种不同提取工艺生产的全组分Histones,还进一步从小牛胸腺组蛋白中分离纯化出了H1单体,H2A-H2B二聚体以及核心组蛋白(Core Histones,包括H3、H2B、H2A和H4),诊断试剂开发人员可以根据自身工艺平台的特点及需求单独或混合使用。

博百欧天然组蛋白抗原系列,让AHAs检测更准确

Histones聚丙烯酰胺凝胶电泳图

博百欧天然组蛋白抗原系列产品

抗原名称

货号

规格

Histone 组蛋白抗原

PB-HIS

0.2mg / 1.0mg

Histone 组蛋白抗原(盐提取)

PB-HST

0.2mg / 1.0mg

Histone H1 组蛋白H1抗原

PB-HH1

0.2mg / 1.0mg

Histone H2A-H2B 组蛋白H2A-H2B

PB-HH2

0.2mg / 1.0mg

Histone core Histone 核心组蛋白抗原

PB-HCH

0.2mg / 1.0mg

武汉博百欧生物科技有限公司(ProBio)坐落于华中地区国家级生物产业基地——武汉光谷生物城。博百欧作为国内体外诊断试剂核心原料自主研发和生产的高新技术企业,目前专注于自身免疫系统疾病诊断抗原的研发和生产,品种涵盖系统性红斑狼疮,类风湿关节炎、干燥综合征、硬皮病、皮肌炎、血管炎、抗磷脂综合征、自免性肝病、自免性肾病、自免性甲状腺及胃肠道疾病等的诊断。公司现已完成了近30种天然自身免疫抗原和多种重组抗原的研发和批量生产,产品具备高纯度、高稳定性、高活性、高特异性、低批间差等特点,经多方验证证明博百欧产品的质量与进口同类产品一致,部分抗原效价优于进口对照产品。今后博百欧还将陆续推出更多重组抗原及抗体产品,为自身免疫疾病领域诊断客户提供一站式产品服务, 将IVD原料的核心技术牢牢掌握在中国人自己手里,打破我国IVD原料市场被进口垄断的被动局面!

博百欧天然组蛋白抗原系列,让AHAs检测更准确

上海金畔生物科技有限公司是博百欧中国一级代理商,为客户提供一站式体外诊断产品服务。如您对上述产品感兴趣还可拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。

参考文献

  1. Hardin, J. A., et. al. (1983) Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 80(24):7410-7414.
  2. Schett, G. et al. (2002) Lupus.  11(11):704-715
  3. González, G. et al. (2005)  Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. 42(3)
  4. Dema, B. et al. (2016) Antibodies. 5(1): 2
  5. Emanuele, C. et al. (2014) Autoimmune Dis. 2014:321359

博百欧天然组蛋白抗原系列,让AHAs检测更准确

蛋白(Histone)是细胞核内的一种碱性蛋白,由H1,H2A, H2B, H3和H4五个家族成员组成。其中,H2A-H2B二聚体与H3-H4二聚体各两组形成一个八聚体的核(Core),DNA缠绕于核外侧,共同构成核小体的拓扑结构。H1作为连接元件(Linker)与核小体之间的DNA连接区结合。

博百欧天然组蛋白抗原系列,让AHAs检测更准确

图片来源:Database (Oxford). 2016; 2016: baw014.

这5种组蛋白都有各自对应的自身抗体。抗DNA的自身免疫反应与抗组蛋白的自身免疫反应间具有连锁性,抗DNA抗体阳性的患者常同时能检出抗组蛋白自身抗体(AHAs),但AHAs阳性并不一定伴有抗DNA抗体。

抗组蛋白自身抗体(AHAs)常见于多种自身免疫性疾病,在30-70%的系统性红斑狼疮(SLE)患者体内可见,其中H1和H2A-H2B是最常见的抗体靶点[1]。AHAs也普遍存在于Felty综合征(80%)、RA相关的血管炎(75%)、和幼年型类风湿关节炎JRA(60%)中。在非风湿性自身免疫疾病中,原发性胆汁性肝硬化患者血清中AHAs的阳性检出率约有76%,且大部分是抗H1抗体。AHAs在药物性狼疮患者中的检出率也很高(>95%)。普鲁卡因酰胺诱导的狼疮患者体内主要出现抗H2A-H2B二聚体的IgG类抗体,且抗体与疾病的临床活动性密切相关。

遗传学研究发现,组蛋白的氨基酸序列在哺乳动物物种之间高度保守。博百欧天然组蛋白抗原(包含所有五种主要组蛋白:H1、H3、H2B、H2A和H4)是在温和的理化条件下用多种色谱层析纯化技术从小牛胸腺中制备的,以获得对病人自身抗体的较大反应性。与此同时,针对AHAs成分复杂,临床检测工作中常发生信号强度弱甚至漏检的情况,博百欧进一步从小牛胸腺组蛋白中分离纯化出了组蛋白H1单体及H2A-H2B二聚体,诊断试剂开发人员可以根据自身工艺平台的特点及需求单独或混合使用。

博百欧天然组蛋白抗原系列产品:

抗原名称

货号

规格

Histone  组蛋白抗原

PB-HIS-

0.2mg / 1.0mg

Histone H1  组蛋白H1单体

PB-HH1-

0.2mg / 1.0mg

Histone H2A-H2B  组蛋白H2A-H2B

PB-HH2-

0.2mg / 1.0mg

武汉博百欧生物科技有限公司(ProBio)坐落于华中地区较大的国家级生物产业基地——武汉光谷生物城。公司由海外归国技术专家团队领衔创办,目前主要从事天然蛋白的提取和纯化,现已完成了近20种天然抗原的研发和批量生产,涵盖类风湿关节炎、结缔组织病(系统性红斑狼疮、干燥综合征、硬皮病、肌炎等)、血管炎、抗磷脂综合征、自免性肝病、自免性甲状腺及胃肠道疾病等的诊断,具备高纯度、高稳定性、高活性、高特异性、低批间差等特点。博百欧今后还将研发生产重组抗原及抗体,将IVD原料的核心技术牢牢掌握在中国人自己手里,打破我国IVD原料市场被进口垄断的局面。

博百欧天然组蛋白抗原系列,让AHAs检测更准确

上海金畔生物科技有限公司是博百欧中国一级代理商,为客户提供一站式体外诊断产品服务。上海金畔生物科技有限公司联合博百欧推出的抗原特价测试活动正在火热进行中(详情点击http://www.jinpanbio.cn/article/281),欢迎广大客户咨询和测试。如您对上述产品感兴趣还可拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。

参考文献

  1. Hardin, J. A., et. al. (1983) Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 80(24):7410-7414.