生物体内活性氧的生成与清除处于动态平衡状态，当各种因素打破这一平衡而导致活性氧浓度超过生理限度时就会损伤生物大分子，包括脂质过氧化、DNA的氧化损伤、蛋白质的氧化和单糖氧化等。活性氧对蛋白质的作用包括修饰氨基酸，使肽链断裂，形成蛋白质的交联聚合物，改变构像和免疫原性等五个方面。

目前对于蛋白质氧化损伤的检测指标主要有两个，分别是蛋白羰基生成（羰基化）和二酪氨酸的生成（蛋白质中酪氨酸硝基化）。Cell BioLabs为您提供完整的蛋白质氧化损伤检测方案，其OxiSelect™ Protein Carbonyl Assay Kits（蛋白质羰基化分析试剂盒）专门用于快速检测蛋白质发生氧化应激后，其羰基化程度；OxiSelect™ Protein Nitration (Nitrotyrosine) Assay Kits（蛋白质硝基化分析试剂盒）为检测细胞内蛋白质是否发生硝基化反应提供了便捷的解决方案；而OxiSelect™ AOPP Assay Kits（终末氧化蛋白产物分析试剂盒）则能快速的检测蛋白氧化后的损伤后果。

NO被超氧自由基氧化成（过氧化）亚硝酸离子，能够和蛋白质中的酪氨酸残基发生反应生成3-硝基酪氨酸(Nitrotyrosine)残基，也可以作为蛋白质氧化损伤的指标。但这种指标受到蛋白质样品种类的限制。如牛血清中酪氨酸含量比较多，容易观察到3-硝基酪氨酸的生成；而铜锌超氧化物歧化酶中仅含4个酪氨酸分子，因此一般不易观察到3-硝基酪氨酸的生成。并且，3-硝基酪氨酸的生成有一定的限度。即当3-硝基酪氨酸的生成达到饱和后，继续增加氧化物浓度不再增加3-硝基酪氨酸的量。3-硝基酪氨酸的生成可以用Amado方法，采用325 nm的激发光，415 nm处发射荧光是二酪氨酸的特征。

Cell BioLabs的OxiSelect™ Protein Nitration (Nitrotyrosine) Assay Kits（蛋白质硝基化分析试剂盒），直接检测硝基化蛋白内3-硝基酪氨酸的含量，参照阳性对照硝基化BSA中的3-硝基酪氨酸含量的标准曲线，得到实验数值。该检测方法高效灵敏，对于3-硝基酪氨酸的含量的检测灵敏度达到20nM-8.0μM。试剂盒内包含阳性对照，可完成96次检测。另外，该蛋白质硝基化分析试剂盒为您的蛋白质氧化损伤检测提供了多样选择。您可以根据您的实验要求，选择ELISA（目录号：STA-305/STA-305-5）、免疫印迹（目录号：STA-303）检测方法中的任何一种。

上海金畔生物科技有限公司与美国知名细胞试剂服务商Cell BioLabs共同为您定制最优的细胞生物学解决方案，除了蛋白质的羰基化、硝基化以及终末氧化蛋白产物分析等蛋白氧化损伤检测方案；还为您提供脂质过氧化过程中壬烯(HNE)和丙二醛(MDA)检测试剂盒；另外对于核酸DNA、RNA的损伤检测，除了传统的8-OHdG/8-OHG定量、AP位点分析等，还有基于单细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析；针对活性氧基团和抗氧化剂的活力检测，也由多种试剂和试剂盒供您选择。如果您对以上产品感兴趣，请请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

自由基对蛋白质的作用包括蛋白质肽链断裂、蛋白质分子相互间交联聚合、蛋白质氨基酸发生氧化脱氨反应、氧自由基攻击蛋白质还原性基团、脂类氧化裂解所产生的丙二醛与蛋白质上的氨基产生分子间的交联等。目前对于蛋白质氧化损伤的检测指标主要有两个，分别是蛋白羰基生成（羰基化）和二酪氨酸的生成（蛋白质中酪氨酸硝基化）。Cell BioLabs为您提供完整的蛋白质氧化损伤检测方案，其OxiSelect™ Protein Carbonyl Assay Kits（蛋白质羰基化分析试剂盒）专门用于快速检测蛋白质发生氧化应激后，其羰基化程度；OxiSelect™ Protein Nitration (Nitrotyrosine) Assay Kits（蛋白质硝基化分析试剂盒）为检测细胞内蛋白质是否发生硝基化反应提供了便捷的解决方案；而OxiSelect™ AOPP Assay Kits（终末氧化蛋白产物分析试剂盒）则能快速的检测蛋白氧化后的损伤后果。

蛋白质羰基化是指氨基酸残基侧链中的氨基或亚氨基受到氧自由基攻击最后转变成醛基,并释放NH3的过程。其在体内的形成主要是通过金属离子催化氧化系统完成。在这个过程中，二价铁离子与蛋白质上的氨基酸残基形成铁(Ⅱ)一蛋白质配位复合物。H202作用于此配位复合物的铁(Ⅱ)上，产生·OH、OH-和铁(Ⅲ)一蛋白质配位复合物。·OH从侧链氨基酸上提出一个氢原子，使侧链氨基酸上的碳上有一个不配对电子。在此不配对电子作用下，铁(Ⅲ)一蛋白质配位复合物又重新变回铁(Ⅱ)一蛋白质配位复合物，随后配位键断开，二价铁离子和NH3与复合物分离，由此在蛋白质侧链形成羰基或羰基衍生物。蛋白质中的赖氨酸、精氨酸、脯氨酸、苏氨酸残基都有可能参与糖基化。

蛋白质氧化损伤羰基化的检测目前主要使用2，4-二硝基苯肼法。传统方法多是采用比色法，虽然操作简单但是误差很大，但不能满足精密的蛋白质糖化测定要求。Buss及其同事采用免疫反应的原理使用DNP抗体检测蛋白质羰基化程度，但是在具体的操作中，用TCA沉淀蛋白的时候会有至少20%的总蛋白损失，导致了其结果的不准确。Cell BioLabs的OxiSelect™ Protein Carbonyl Assay Kits（蛋白质羰基化分析试剂盒）则提供了更优的选择，使用该羰基化检测试剂盒，无需蛋白浓缩沉淀从而降低了中间的损失，而且检测灵敏度也由原来的>4 mg/mL大幅提高到10 μg/mL。

OxiSelect™ 蛋白质羰基化分析试剂盒为您提供多种检测方案，您可以根据您的实验要求，选择ELISA（目录号：STA-310/STA-310-5）、免疫印迹（目录号：STA-308）或者分光光度计（目录号：STA-315）检测方面中的任何一种。

上海金畔生物科技有限公司与美国知名细胞试剂服务商Cell BioLabs共同为您定制最优的细胞生物学解决方案，除了蛋白质的羰基化、硝基化以及终末氧化蛋白产物分析等蛋白氧化损伤检测方案；还为您提供脂质过氧化过程中壬烯(HNE)和丙二醛(MDA)检测试剂盒；另外对于核酸DNA、RNA的损伤检测，除了传统的8-OHdG/8-OHG定量、AP位点分析等，还有基于单细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析；针对活性氧基团和抗氧化剂的活力检测，也由多种试剂和试剂盒供您选择。如果您对以上产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

氧化应激是指机体在遭受各种有害刺激时,体内高活性分子如活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)产生过多,氧化程度超出氧化物的清除,氧化系统和抗氧化系统失衡,从而导致组织损伤。在氧化应激过程中，由于受到自由基的氧化胁 迫，构成细胞组织的各种物质如脂质、糖类、蛋白质、脱氧核糖核酸（DNA）等所有的大分子物质，都会发生各种程度的氧化反应，引起变性、交联、断裂等氧化 损伤，进而导致细胞结构和功能的破坏以及机体组织的损伤和器官的病变，甚至癌变等。

氧化应激的定量评价方法大致分做三类：1）测定由活性氧修饰的化合物；2）测定活性氧消除系统酶和抗氧化物质的量；3）测定含有转录因子的氧化应激 指示物。而根据氧化应激的物质种类，又可主要分为蛋白质氧化损伤标志物检测、脂质过氧化标志物检测、核酸DNA/RNA损伤检测以及活性氧消除系统酶和抗 氧化物质检测等。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为您提供完备的细胞氧化应激分析解决方案，其产品包含蛋白质羰基化、硝基化损伤及晚期氧化蛋白产物（AOPP）分析，脂质过氧化的标志物壬 烯(HNE)和丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a快速检测试剂盒，核酸DNA/RNA的常规损伤分析如8-OHdG/8-OHG和AP位点检测， 还包括细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析试剂盒；除此之外，还有多种抗氧化物的活性检测方案供您选择，如过氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶 （CAT）及ORAC指标（氧基抗氧化能力）和HORAC指标（羟基抗氧化能力）等。

• 蛋白质氧化损伤分析
• 脂质过氧化分析
• 核酸DNA/RNA损伤分析
• 活性氧基团和抗氧化剂分析

蛋白质氧化损伤分析（Assay for Oxidative Protein Damage）

在氧化应激过程中，自由基对蛋白质的作用包括蛋白质肽链断裂、蛋白质分子相互间交联聚合、蛋白质氨基酸发生氧化脱氨反应、氧自由基攻击蛋白质还原性 基团、脂类氧化裂解所产生的丙二醛与蛋白质上的氨基产生分子间的交联等。目前对于蛋白质氧化损伤的检测指标主要有两个，分别是蛋白羰基生成（羰基化）和二 酪氨酸的生成（蛋白质中酪氨酸硝基化）。

Cell BioLabs为您提供完整的蛋白质氧化损伤检测方案，其OxiSelect™ Protein Carbonyl Assay Kits（蛋白质糖基化分析试剂盒）专门用于快速检测蛋白质发生氧化应激后，其羰基化程度；OxiSelect™ Protein Nitration (Nitrotyrosine) Assay Kits（蛋白质硝基化分析试剂盒）为检测细胞内蛋白质是否发生硝基化反应提供了便捷的解决方案；而OxiSelect™ AOPP Assay Kits（晚期氧化蛋白产物分析试剂盒）则能快速的检测蛋白氧化后的损伤后果。

脂质过氧化分析（Assay for Lipid Peroxidation）

脂质过氧化现象在动物和植物中都会发生，并且已经被用作细胞和组织氧化应激下的反应标志物。脂质过氧化为ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应，形成脂质 过氧化产物(lipid peroxide, LPO)如丙二醛 (MDA)和4-羟基壬烯醛(HNE)，从而使细胞膜的流动性和通透性发生改变,最终导致细胞结构和功能的改变。4-羟基壬烯醛(HNE)和丙二醛 (MDA)是两个强毒力的脂质过氧化终产物,常常是作为判断脂质过氧化的指标。

上海金畔生物科技有限公司向您推荐美国著名细胞试剂专家Cell BioLabs的细胞氧化压力检测全套方案，该方案中包括的脂质过氧化分析检测试剂除包括经典的脂质过氧化指标4-羟基壬烯醛(HNE)和丙二醛 (MDA)的快速ELISA检测和基于TBRS（硫代巴比妥酸反应物）的MDA定量分析，还有在动脉粥样化形成、风湿性关节炎以及癌变的过程中脂质过氧化 重要检测指标8-异前列腺素F2a的ELISA分析试剂盒。

DNA & RNA损伤分析（Assays for DNA & RNA Damage）

活性氧(ROS)自由基可以直接攻击生物大分子DNA/RNA诱发DNA/RNA氧化损伤。在各种氧化损伤中，以鸟嘌呤8位碳原子氧化后形成8-羟 基-[脱氧]鸟嘌呤(8-OHdG/8-OHG)最为常见。还有一些嘌呤或者嘧啶碱基直接脱去的反应，这样也就形成了核酸中无嘌呤（apurinic）和 脱嘧啶（apyrimidinic）位点，统简称AP位点。除了上述氧化损伤外，DNA双链断裂（DSBs）是细胞内多种类型的DNA损伤中最危险、最严 重的一种。

OxiSelect™ Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits (8-OHdG or 8-OHG Quantitation)提供了快速高效检测核酸中8-OHG或8-OHdG含量的实验方案，而OxiSelect™ Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites)则专门为AP位点的高灵敏检测而定制，可用于细胞、组织等来源的基因组样品。针对于DNA双链断裂的检测，OxiSelect™ DNA Double-Strand Break Assay则可以让用户能在3小时内在荧光显微镜下观察到DNA断裂的实验结果。

彗 星实验（Comet Assay）是近年发展起来的在单细胞水平上定量检测DNA损伤的灵敏方法。经过不断改进和完善,用该方法检验的基因损伤已成为鉴别遗传毒性物质的敏感标 记物,在致癌作用机制、环境污染监测评价等研究中，均发挥了重要作用。但是传统的实验室方法步骤繁琐，需要单独配置裂解试剂，需要提前对样品DNA进行处 理，且每次检测样品有限，染色过程中需要EB等致癌染料。

OxiSelect™ Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)彗星分析克服了上述障碍，可以一次进行多个样品的处理，解决了由于处理时间不同而导致的实验结果差异；并且使用一站式试 剂盒，简单快捷，直接使用细胞进行实验；另外在检测时，也可以试验结果可以直接在免疫荧光显微镜下观察。

活性氧自由基和抗氧化剂分析（Assays for Reactive Oxygen Species and Antioxidants）

需氧细胞在代谢过程中产生一系列活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)，细胞内存在各种活性酶及抗氧化剂以维持氧化和抗氧化的平衡，这其中多种氧自由基酶类发挥了重要的作用。SOD（过氧化物歧化酶）主要存在于胞液 和线粒体基质中，是防御生物体氧化损伤的一种十分重要的酶。它的作用底物是超氧阴离子自由基O^2-·，可将其催化歧化为氧气和过氧化氢。CAT（过氧化氢酶）是过氧化物酶体的标志酶,存在于红细胞及某些组织内的过氧化体中，它的主要作用就是催化H₂O₂分解为H₂O与O₂，使得H₂O₂不致于与O₂在铁螯合物作用下反应生成非常有害的-OH。

OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay（过氧化物歧化酶活性分析）和OxiSelect™ Catalase Activity Assay Kit（过氧化氢酶活性分析）试剂盒为氧化应激研究中，细胞内两种重要的过氧化物酶的检测提供了快捷的检测方案。

另外，在细胞分子水平上检测细胞内生物大分子的抗氧化能力，可由ORAC指标（氧基抗氧化能力）和HORAC指标（羟基抗氧化能力）反应出来。 OxiSelect™ ORAC and HORAC Activity Assay Kits试剂盒能在2小时内完成相应活力的检测，并能通过荧光分析仪读取数据。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为您提供完备的细胞氧化应激分析解决方案，其产品包含蛋白质羰基化、硝基化损伤及晚期氧化蛋白产物（AOPP）分析，脂质过氧化的标志物壬 烯(HNE)和丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a快速检测试剂盒，核酸DNA/RNA的常规损伤分析如8-OHdG/8-OHG和AP位点检测， 还包括细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析试剂盒；除此之外，还有多种抗氧化物的活性检测方案供您选择，如过氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶 （CAT）及ORAC指标（氧基抗氧化能力）和HORAC指标（羟基抗氧化能力）等。如果您对以上产品感兴趣，请请致电 021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。