jenabioscience:酵母多聚(A)聚合酶介绍

jenabioscience:酵母多聚(A)聚合酶介绍

酵母多聚(A)聚合酶:重组、过表达酿酒酵母Poly(A) 聚合酶的大肠杆菌

适合一般实验室使用。

单位定义: 1个单位定义为在37℃下1分钟内催化1pmol AMP结合成酸不溶形式所需的酶量。

运输:通过凝胶包运输

储存条件: -20°C 储存,
避免冷冻/解冻循环

保质期: 12个月

纯度: ≥95%(SDS-PAGE)

形式:液体

浓度: 600单位/μl

描述:
酵母Poly(A) 聚合酶催化 AMP 转移至 RNA 分子的 3'-羟基末端。该反应不依赖于模板,需要 ATP 作为底物和 Mg 2+或 Mn 2+作为辅因子。在某些 Poly(A) 加尾和 RNA 标记反应中,它比大肠杆菌Poly(A) 聚合酶更有效(例如,更短的孵育时间、更广泛地接受 RNA 模板大小)。

多聚腺苷酸化可提高 (m)RNA 稳定性,从而提高真核细胞转染和显微注射实验中的翻译效率。

有关使用体外转录反应混合物作为模板的 (m)RNA 聚腺苷酸化的信息,请参阅 Poly(A) Tailing Enzyme Testkit (#RNT-004)

含量:
酵母 Poly(A) 聚合酶
#RNT-006-S:1x 50 μl(600 单位/μl)
#RNT-006-L:3x 50 μl(600 单位/μl)
20 mM Tris-HCl(pH 8.0), 50 mM KCl、0.5 mM DTT、50% 甘油 (v/v)

酵母 Poly(A) 聚合酶反应缓冲液
1x 1.2 ml (5x)
100 mM Tris-HCl (pH 7.0)、3 mM MnCl 2、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、0.5 mg/ml 乙酰化 BSA、50% 甘油 (v/五)

ATP – 溶液
1x 100 μl (100 mM)


Jena Bioscience 由马克斯普朗克分子生理学研究所(多特蒙德)的科学家团队于 1998 年成立,利用超过 25 年的学术知识为来自 100 多个国家的研究和工业客户开发创新试剂。迄今为止,耶拿生物科学仍然是一家所有者经营的企业。

rpicorp 酵母提取物8013-01-2


rpicorp 酵母提取物

简要描述:rpicorp 酵母提取物 RPI, Corp. 成立于 1970 年,主要生产用于生命科学研究的专业产品。

详细介绍

产品咨询

品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,化工,生物产业,制药

rpicorp 酵母提取物

rpicorp 酵母提取物

 8013-01-2

室温


干酵母自溶物,含有高含量的氨基氮和水溶性 B 族复合维生素。由于其低 NaCl 含量,这种品质非常适合组织培养。

原料:

总氮 (TN):~9.8%
氨基氮 (AN):~5.1%
AN/TN 比率:~0.52
氯化钠:~0.3%
pH(1% 溶液):~7.0

 12.4 磅

 10.00 x 7.50 x 10.00



仅供研究或进一步制造使用,不得用于食品或药物。



上海金畔生物科技有限公司

国内试剂耗材经销代理。

国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

进出口货物代理服务。

公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。


质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。


公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。




















novocib酵母提取物简介

novocib酵母提取物简介

富含美味核苷酸的酵母提取物

5'-核苷酸IMP 和 GMP(也称为肌苷酸鸟苷酸)是参与“鲜味”味道的强风味增强剂 (E626-E633)。由于酵母富含核糖核酸 (RNA),即 5' 核苷酸(GMP、AMP、CMP 和 UMP)的天然来源,因此富含 5' 核苷酸 IMP 和 GMP 的酵母提取物目前被用作味道增强剂。

novocib酵母提取物简介

5'-核苷酸酶和磷酸酶是普遍存在的水解酶,它们催化核苷酸水解成磷酸盐和核苷,从而失去风味增强特性。核苷进一步水解为嘌呤和嘧啶碱基。嘌呤基次黄piao呤具有强烈的苦味。酵母提取物中的核苷酸/核苷/碱基含量根据生长状态和制备方法而变化。

酵母提取物核苷酸的质量控制 NOVO CIB通过离子对高效液相色谱和二极管阵列检测,提供一系列分析服务,从游离 5' 核苷酸的表征到酵母提取物中全谱核苷酸的分析。该服务可以控制酵母提取物样品中风味核苷酸的含量。

ZYMO Frozen-EZ YeastTransformation II Kit Frozen-EZ酵母转化试剂盒Ⅱ

ZYMO Frozen-EZ YeastTransformation II Kit Frozen-EZ酵母转化试剂盒Ⅱ

价格随时变动,展示价格仅供参考,下单前咨询客服客服!

货号: T2001 品牌: ZYMO 标签: 实验耗材

描述

Frozen-EZ酵母转化试剂盒Ⅱ

ZYMO Frozen-EZ YeastTransformation II Kit Frozen-EZ酵母转化试剂盒Ⅱ

产品亮点
快速:可以在不到10分钟的时间内制备具有高转化效率的酵母细胞。
简单:用载体DNA在不到1小时的时间内用单个或多个质粒转化的简便方法。
用途广泛:可与酿酒酵母以及其他真菌(包括白色念珠菌,粟酒裂殖酵母和巴斯德毕赤酵母)一起使用。与环状和线性DNA兼容。
  
产品描述

与现有方法相比,Frozen-EZ酵母转化II试剂盒旨在使酵母转化和文库筛选更加容易和高效。用Frozen-EZ Yeast Transformation II试剂盒制备的酵母细胞可立即用于转化,或可储存(即≤-70°C)以备后用。用该试剂盒制备的酵母可以用环状和线性DNA转化。另外,Frozen-EZ酵母转化II试剂盒可与其他真菌一起使用,包括白色念珠菌,粟酒裂殖酵母和牧羊犬。
 
 技术指标

感受态细胞稳定性    -70°C≥1年
处理时间      ≤15分钟
产品储存      0-4°C
转化DNA输入        0.2-1.0微克
转型效率               10 5 – 10 6 CFU /微克质粒DNA。

 

常见问题

Q1:该套件中有什么?它如何工作?

该套件中使用的程序在某种程度上类似于基于锂阳离子的方法进行设计。不涉及原生质球步骤。该机制可能涉及一些我们尚不完全了解的代谢途径。

问题2:此套件可用于白色念珠菌,粟酒裂殖酵母或巴斯德毕赤酵母吗?

是。根据其他实验室和我们实验室的数据,该试剂盒在白色念珠菌,粟酒裂殖酵母或毕赤酵母以及啤酒酵母中也能正常工作。

问题3:我的感受态酵母细胞在-70°C以下可以保存多长时间?

在-70°C以下储存半年后,转换效率不会降低。6个月后,转换效率逐渐开始下降。

Q4:我应该如何解冻储存的冷冻感受态细胞?

在室温下解冻。

问题5:冻结和解冻的频率会影响转化效率吗?

在冷冻的第一个周期后,我们通常会看到转化子增加10-30%。您可以重新冷冻和融化感受态酵母细胞3-4次,而对转化效率没有明显影响。进一步的冻融循环不利地影响转化效率。

问题6:在转化的第2步中,我是否需要严格在30°C下孵育?

不能。温度在30°C至37°C之间处于最佳温度范围。低于或高于此范围的温育会大大降低转化效率。

Q7:是否可以不经纯化直接使用限制性酶消化的DNA?

是。不同的消化缓冲液对转化效率的影响很小。您应该通过提高消化反应中DNA的浓度,尝试将每个转化实验的DNA体积保持在5 µl。

Q8:我应该在选择性板上撒多少转化混合物?

对于大多数环形质粒转化,50 µl就足够了。但是,如果您使用线性化DNA或使用多个选择标记,则可以在每块板上上样多达200 µl的转化混合物,以增加转化体的数量。转化子的数量随着施加到每个板上的转化混合物的数量线性增加。

Q9:我需要使用带有山梨糖醇的平板吗?

否。请使用适合您实验的任何平板。

Q10:我需要添加载体DNA吗?

不需要。不需要载体DNA。

 

引文

Plasmids were transformed with high efficiency using the Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit in the construction of synthetic yeast promoters. Researchers showed that decreasing nucleosome affinity correlated with increasing promoter strength and expression levels higher than native species.

Curran KA, et. al. (2014) Design of synthetic yeast promoters via tuning of nucleosome architecture. Nat Commun. 5:4002.

The Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit was used to integrate various TEF1 promoter mutants upstream of a gene in Saccharomyces cerevisiae. Efficient transformation allowed comparison of gene activity and, therefore, determination of promoter strength.

Nevoigt, E., et al. (2006) Engineering of promoter replacement cassettes for fine-tuning of gene expression in Saccharomyces cerevisiae. Appl Environ Microb, 72(8): 5266-5273.

规格信息

品牌:

ZYMO

CAS:

N/A

规格:

120Rxns

货期:

现货1~3天 期货30天

Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

货号: MF0212-10G 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus

酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌

温馨提示

见我司(金畔生物)整理的Zymolyase®酵母细胞壁溶解酶(酵母裂解酶)产品专题。

产品标签

Zymolyase® 酵母细胞壁溶解酶;Yeast lytic enzyme 酵母裂解酶;Lyticase;Glusulase;Protoplast 原生质体;Spheroplast 原生质球;

产品信息

产品名称 产品编号 规格    价格(元)      
Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌             MF0212-200MG       200mg             980
MF0212-1G 1g 3680
MF0212-10G 10g 23680

产品描述

Zymolyase®-20T是藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)深层发酵产生并通过硫酸铵沉淀纯化获得的一种新型酶制品,具有强烈的酵母菌活细胞壁溶解活性,产生各种酵母细胞株的原生质体或原生质球。本酶制品决定酵母细胞壁溶解活性的必需酶是β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶(β-1,3-glucan laminaripentaohydrolase),该酶水解β-1,3-连接的线性化葡萄糖聚合物,释放出特异性的昆布五糖(也是最主要和最小的水解产物单元)。Zymolyase®-20T的溶解范围根据酵母类型、酵母生长周期或培养条件有所变化。

本品以冻干粉形式提供,酶比活力为20,000 units/g,易溶于水,适用于原生质体/原生质球制备、酵母细胞融合、酵母细胞转化和酵母遗传学研究。

产品规格

来源 藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)
外观 冻干粉
纯化方式 硫酸铵沉淀
比活力 20,000 units/g
必需酶 β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶
含有的其他活性酶* β-1,3-葡聚糖酶 约1.5 x 106units/g
蛋白酶 约1.0 x 104units/g
甘露聚糖酶 约1.0 x 106units/g
污染酶 淀粉酶,木聚糖酶,磷酸酶 微量
最佳pH和温度 pH7.5, 35°C(裂解活酵母细胞);pH6.5, 45°C(水解酵母葡聚糖)
稳定pH范围 pH 5-10
热稳定性 60°C,5min酶活性完全损失
激活剂 巯基化合物比如半胱氨酸,β-巯基乙醇或DTT
特异性(溶解范围) Ashbya, Candida, Debaryomyces, Eremothecium, Endomyces, Hansenula, Hanseniaspora, Kloeckera, kluyveromyces, Lipomyces, Metschnikowia, Pichia, Pullularia, Torulopsis, Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, Schwanniomyces, etc.
[*]:参考文献Kitamura, K., Kaneko, T., Yamamoto, Y., Appl. Microbiol., 18, 57 (1972)进行各种酶活力定义。

 

活力测定

1. 单位定义:在以下反应条件的反应体系中吸光值A800下降30%定义为一个酶活力单位(unit)。

2. 反应体系

底物                       3ml 啤酒酵母细胞悬液(2mg干重/ml)
缓冲溶液 5ml 1/15M磷酸盐缓冲液, pH 7.5
酶溶液 1ml Zymolyase®-20T Solution: 0.05-0.1mg/ml       
去离子水 1ml
总体积 10ml

3. 反应程序

25°C孵育2h后轻轻混匀体系,于800nm处测定吸光值。以1ml去离子水替代酶溶液的混合液作为对照。

4. 计算酶活力

A800降低百分比=(对照组A800-反应组A800)×100/对照组起始A800

当A800吸光度减少60%,相当于2 units。此时反应体系中啤酒酵母细胞完全裂解,意味着1 unit Zymolyase®-20T能裂解3mg干重啤酒酵母。

保存与运输方法

保存:2-8℃干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1. Zymolyase®-20T冻干粉置于30℃,3个月酶活力损失约70%。

2. 当需要制备无菌酶溶液,可用除硝酸纤维素膜之外的滤膜过滤除菌。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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货号 名称 规格
MF0209-3KU Lyticase (10U/μl) 酵母溶壁酶 3KU
MF0210-5KU Lyticase fromArthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌 5KU
MF0212-200MG       Zymolyase-20T fromArthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌 200mg         
MF0211-500MG Zymolyase-100T fromArthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌      500mg
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MF0203-100MG RNase A from Bovine Pancreas 核糖核酸酶A,来源于牛胰腺 100mg

 

近期有很多客户使用我司(金畔生物)的Zymolyase-20T(酵母裂解酶,酵母溶壁酶)(Cat#:MF0212),经常问到产品如何溶解,使用剂量等问题,现对以下问题做出描述。有更多的问题,请和我司联系,或发邮件到tech@maokangbio.com

 

常见问题(Frequently asked questions):

产品如何保存?

答复:本品以冻干粉形式提供,收到产品需2-8℃干燥保存。本品置于30℃,3个月酶活力损失约70%。本品溶于缓冲液配制成储存液后,短期置于2-8℃保存,约2周稳定。长期请置于-20℃保存,约数月稳定。

冻干粉如何溶解?

答复:本品易溶于水。建议用1/15M phosphate buffer(pH 7.5)溶解,或用自己实验体系相关缓冲液来溶解。储存液的制备方法比较多,主要根据自身的实验体系,或参考文献来操作。短期置于2-8℃保存,约2周稳定。长期请置于-20℃保存,约数月稳定。

如何制备无菌酶溶液?

答复:若需要制备无菌酶溶液,请用除硝酸纤维素膜之外的0.22µm孔径的滤膜过滤除菌。

酶的比活力是多少?

答复:Zymolyase-20T指的是酶的比活力约20,000 units/g (20 Ku/mg),具体批次酶的比活力是有变化的,详细请见产品标签或质检报告。

Zymolyase适用于哪些菌株类型?

答复:该酶的裂解谱(lytic spectrum)包含以下菌属:Ashbya(阿舒囊霉属), Candida(假丝酵母菌属), Debaryomyces(德巴利(氏)酵母属), Eremothecium(假囊酵母属), Endomyces(内孢霉), Hansenula(汉逊氏酵母), Hanseniaspora(孢汉逊酵母属), Kloeckera(克勒克酵母属), kluyveromyces(克鲁维酵母属), Lipomyces(油脂酵母属), Metschnikowia(梅奇酵母属), Pichia(毕赤酵母属), Pullularia(芽霉菌属), Torulopsis(球拟酵母菌), Saccharomyces(酵母属), Saccharomycopsis(复膜酵母菌属), Saccharomycodes(类酵母属), Schwanniomyces(许旺酵母菌属),等等。其他未罗列在内的菌属请查阅文献或和我司联系是否有相关应用数据。

Zymolyase适用于丝状真菌吗?

答复:该酶主要用于酵母细胞壁的裂解,对于丝状真菌,虽然与酵母细胞壁在结构上有很多相似,但裂解效果因菌株类型有差异。建议用复合酶的形式来特异裂解丝状真菌,或选用我司(金畔生物)提供的真菌溶壁酶(Cat#:JP7356)。

酶的工作浓度一般是多少?

不同的酵母菌株对酶的敏感性会有差异,请参阅文献或根据实际的裂解经验来设定合适的工作浓度。操作方法可参考下方流程。

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

10g

货期:

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