代理最专业转染试剂专家Mirus——高效广谱低毒转染试剂TransIT®2020

       考虑到最高的效率并一定能得到最好的实验结果,许多商品化的转染试剂均称它们的产品具有高效率,但也具有一定的细胞毒性。因此,在分析特定的细胞信号转导通路时,可能由于诱导细胞凋亡或细胞应激反应,而使得出错误的结论。越来越多的文献报道表明,脂质体类型的转染试剂会参与细胞生理活动,如参与PKC(蛋白激酶C)通路调节;如抑制ATP酶的活性;如与线粒体膜发生作用;转染siRNA造成脱靶效应等等,所以这类转染试剂会不同程度上引起基因表达的上调或下调。

具体可以参考文献更多请参考:
1. Inhibition of protein kinase C by cationic amphiphiles. Biochemistry.1992, 22; 31(37): 9025-30.
2. Inhibition of the ATPase activity of the catalytic portion of ATP synthases by cationic amphiphiles. Biochim Biophys Acta.2008, 1777(4):362-8.

       Mirus在成立之初就以其高效低毒的王牌转染试剂Trans LT1深受广大客户的亲睐,作为全球第一款高效低毒血清兼容型转染试剂,是一款非脂质体转染试剂,相比传统转染试剂更高效,对细胞的毒性更低,而且不需要更换培养基,操作简单,自1995年开发出来就申请了美国专利(US 5,744,335)。

      同时,Mirus的研究者们一直都在不断追求进取,研发更高质量的转染试剂,2009年,Trans LT1的升级版Trans 2020上市,它相对LT1来讲,除了具有LT1所拥有的低毒优点之外,对于大多数的细胞系的转染效率会更高,对于许多原代细胞和干细胞,也具有更高的转染效率,更重要的是该试剂所有组分是不含动物来源成分的,大大降低了细胞污染的可能性,尤其符合制药生产的需求。另外TransIT-2020也同样适用于昆虫细胞的转染。

主要优点如下:
1. 广谱型:适用大多数细胞系,有效节省实验时间和成本;
2. 高效性:对于大多数细胞系而言,转染DNA质粒效果非常好,尤其在某些细胞系中转染效果要高于Lipofectamine™2000和Fugene HD;
3. 低细胞毒性:试剂本身对细胞的毒性极小,降低了实验中的变异因素;
4. 血清兼容型:TransIT LT1适用于在含血清培养基的转染实验,不需要更换培养基,操作方便;
5. 细胞密度需求低:对于大多数细胞系,在使用TransIT LT1转染时,细胞密度仅需要50-70%,节约了我们培养细胞的时间和实验材料;
6. 不含动物来源成份,大大降低了细胞污染的可能性,尤其符合制药生产的需求;
7. 对于一些昆虫细胞,也有非常高的转染效率;

代理最专业转染试剂专家Mirus——高效广谱低毒转染试剂TransIT®2020

Fig1. TransIT®-2020 Reagent Exhibits Higher Expression and Lower Cellular Toxicity Compared to Other Transfection Reagents.

代理最专业转染试剂专家Mirus——高效广谱低毒转染试剂TransIT®2020

Figure 2. Superior Gene Expression in a Broad Spectrum of Cell Types.

产品信息:

品牌

货号

品名

规格

Mirus

MIR 5404

TransIT-2020 Transfection Reagent

0.4 ml

Mirus

MIR 5400

TransIT-2020 Transfection Reagent

1 ml

Mirus

MIR 5405

TransIT-2020 Transfection Reagent

5 X 1 ml

      Mirus公司是世界上最早开发高效、低细胞毒性转染试剂的公司之一,同时也是目前该类试剂最主要的供应商之一。Mirus的生物学家利用他们在核酸化学、细胞及分子生物学领域的专长,建立了创新的技术和产品开发,这些技术和产品被广泛应用于生命科学研究。Mirus被公认为是核酸研究试剂开发的领跑者,其杰出成就受到世界公认。

      更多产品可点击Mirus查询具体信息。上海金畔生物科技有限公司成为美国Mirus中国地区一级代理,双方携手为国内科研工作者提供专业的转染试剂,同时,上海金畔生物科技有限公司也为广大客户提供免费试用装,欢迎您来电咨询和申请。

细胞培养基重要原料——氨基酸

氨基酸是一种同时含有羧基(-COOH)和氨基(-NH2)的化学分子,是构成蛋白质的基本单位。在Eagle(1955)、Dulbecco和Freeman(1959)等人开创性地研究出了一种含有氨基酸、维生素的营养液(Dulbecco’s Modification of Eagles Medium, DMEM),使得细胞可以在体外进行单层贴壁培养开始,氨基酸就被认为是细胞体外培养必不可少的营养成分。

细胞培养基重要原料——氨基酸

氨基酸化学式

氨基酸在细胞内的重要生理作用主要体现在以下几个方面:

  • 氨基酸作为蛋白质的基本组成单位,参与合成细胞内所有蛋白质,包括细胞骨架、酶、受体和信号分子等;
  • 氨基酸可以用于合成某些具有重要生理作用的含氮化合物,如核酸、尼克酰胺等;
  • 某些氨基酸还具有独特的生理作用,如甘氨酸参与生物转化作用,丙氨酸和谷氨酸参与细胞内氨的运输等;
  • 氨基酸还可以转变成糖和脂肪,参与氧化途径并为细胞代谢提供能量。

下图展示了CHO细胞中氨基酸参与的细胞内代谢途径(绿色线条表示碳代谢途径,单字母表示氨基酸)。

细胞培养基重要原料——氨基酸

图片来源:Kanehisa et al. 2014

氨基酸作为在大规模细胞培养中不可缺少的成分之一,对细胞的状态,高密度的维持以及蛋白产量、质量都发挥着重要的作用。并且细胞培养过程中氨基酸会随细胞表达的蛋白不同而发生变化和消耗,通常需要在细胞培养工艺的不同阶段添加不同成分和比例的氨基酸进行补充。

细胞能利用的氨基酸是L型同分异构体,D型氨基酸不能被利用。不同的细胞对氨基酸的需求各异,但根据细胞自身能否合成,可将常见的20种氨基酸分为必需氨基酸(Essential amino acids)和非必需氨基酸(Nonessential amino acids)。其中,必需氨基酸不能由细胞自身合成,只能从培养基中获取,包括组氨酸(L-Histidine)、异亮氨酸(L-Isoleucine)、亮氨酸(L-Leucine)、赖氨酸(L-Lysine)、甲硫氨酸(L-Methionine)、苯丙氨酸(L-Phenylalanine)、苏氨酸(L-Threonine)、色氨酸(L-Tryptophan)、缬氨酸(L-Valine)、半胱氨酸(L-Cysteine)、酪氨酸(L-Tyrosine)、精氨酸(L-Arginine)及谷氨酰胺(L-Glutamine),因此在细胞培养基配方中,必需氨基酸的浓度通常较高。非必需氨基酸(Nonessential amino acids)包括了丙氨酸(L-Alanine)、天冬氨酸(L- Aspartic acid)、天冬酰胺(L- Asparagine)、谷氨酸(L- Glutamic acid)、脯氨酸(L- Proline)、丝氨酸(L-Serine)、甘氨酸(Glycine),这些氨基酸虽然可以由细胞自身合成,或通过转氨作用由其他物质转化而来,但在细胞培养基中添加适当浓度的非必需氨基酸能减轻细胞在合成方面的负担,提高其他营养成分的利用率。除了上述20种编码蛋白质的氨基酸以外,在细胞培养基中常用到的还包括L-胱氨酸(由2个L-半胱氨酸以二硫键结合形成)和L-羟脯氨酸等。

上海金畔生物科技有限公司代理的Applichem品牌可提供品类齐全的高品质非动物源氨基酸系列产品,可满足生物制药企业大规模细胞培养的高标准级别需求,产品详情见下表。

货号

中文名称

英文名称

级别

CAS No.

A3198

L-丙氨酰-L-谷氨酰胺

L-Alanyl-L-Glutamine

细胞培养级

39537-23-0

A1688

L-丙氨酸

L- Alanine

欧洲药典、美国药典

56-41-7

A1668

L-天冬酰胺,一水

L-Asparagine 1-hydrate

欧洲药典、美国药典

5794-13-8

A1701

L-天冬氨酸

L-Aspartic Acid

欧洲药典、美国药典

56-84-8

A1425

L-半胱氨酸

L-Cysteine

药典级

52-90-4

A1702

L-半胱氨酸盐酸盐,一水

L-Cysteine Hydrochloride 1-hydrate

欧洲药典、美国药典

7048-04-6

A1703

L-胱氨酸

L-Cystine

欧洲药典

56-89-3

A0622

L-胱氨酸盐酸盐

L-Cystine Dihydrochloride

化学纯

30925-07-6

A1704

L-谷氨酸

L-Glutamic Acid

欧洲药典、美国药典

56-86-0

A1420

L-谷氨酰胺

L-Glutamine

欧洲药典、美国药典

56-85-9

141340

甘氨酸

Glycine

欧洲药典、美国药典

56-40-6

A1705

L-羟脯氨酸

L-Hydroxyproline pure

化学纯

51-35-4

A1440

L-异亮氨酸

L-Isoleucine

欧洲、美国药典

73-32-5

A1426

L-亮氨酸

L-Leucine

欧洲药典、美国药典

61-90-5

A1342

L-赖氨酸 一水

L-Lysine

药典级

39665-12-8

A1706

L-赖氨酸盐酸盐

L-Lysine Monohydrochloride

欧洲药典、美国药典

657-27-2

A1340

L-甲硫氨酸

L-Methionine

欧洲药典、美国药典

63-68-3

A1344

L-苯丙氨酸

L- Phenylalanine

欧洲药典、美国药典

63-91-2

A1707

L-脯氨酸

L- Proline

欧洲药典、美国药典

147-85-3

A1708

L-丝氨酸

L-Serine

欧洲药典、美国药典

56-45-1

A1419

L-苏氨酸

L-Threonine

欧洲药典、美国药典

72-19-5

A1645

L-色氨酸

L-Tryptophan

欧洲药典、美国药典

73-22-3

A1677

L-酪氨酸

L-Tyrosine

欧洲药典、美国药典

60-18-4

A1637

L-缬氨酸

L-Valine

欧洲药典、美国药典

72-18-4

细胞培养基重要原料——氨基酸

PanReac AppliChem是来自欧洲品质优良的生物化学试剂与制药原料生产商之一,已通过多项ISO 9001质量体系认证,是全球科研、知名CRO企业、大型制药、诊断、食品、化妆品等工业企业的重要供应商。作为全球多家知名培养基生产企业和制药企业长期固定供应商,AppliChem全面提供细胞培养级、符合药典级、生化级、超纯级等培养基化学品组分,包括氨基酸、蛋白质、维生素、抗生素、脂类、无机盐、缓冲液、泡沫稳定剂、指示剂等和制药工艺中常用化学品如尿素、Tris、葡聚糖等。

上海金畔生物科技有限公司是PanReac AppliChem的中国区一级代理商,为用户提供完善的技术支持与售后服务。如对以上产品感兴趣欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。

参考文献:

  1. Salazar A, Keusgen M , Hagen J V . Amino acids in the cultivation of mammalian cells[J]. Amino Acids, 2016, 48(5).
  2. Ritacco F V , Wu Y , Khetan A. Cell culture media for recombinant protein expression in Chinese hamster ovary (CHO) cells: History, key components, and optimization strategies[J]. Biotechnology Progress, 2018, 34(6).

Cell Biolabs彗星实验试剂盒

由于环境因素和细胞内的正常代谢过程造成的DNA损伤,每个细胞每天都会发生1,000到1,000,000个。虽然这些只占人类基因组约60亿个碱基中的一小部分,但如果关键基因损伤未及时修复,可能会阻碍细胞的正常生理功能,进而增加癌变可能。彗星实验,或称单细胞凝胶电泳(Single cell gel electrophoresis,SCGE),是一种测量单个细胞DNA损伤的常用技术。其原理很简单,即在电泳场中,将受损细胞DNA(包含片段和链断裂)与完整的DNA分离,通过显微镜可观察到损伤细胞呈现出典型的彗星状尾巴,然后通过测量计算彗尾大小对比出细胞DNA损伤的程度。因为彗星实验的特点,该方法几乎被用来评估任何类型的真核细胞的 DNA 修复能力,包括双、单链断裂的不同的 DNA 损伤情况。是一种能快速、大通量检测真核细胞DNA损伤进而判别遗传毒性的技术。

Cell Biolabs彗星实验试剂盒

彗星实验结果图

彗星实验原理虽简单,但操作繁琐,需要丰富的实验经验和技巧,尤其常常出现的“脱胶”问题,困扰了许多科研人员。除此之外,有时为了跑出完美的“彗星”图案放在paper里,还需要重复做许多次实验,费时费力。为了解决上述问题,我们推荐CellBiolabs的OxiSelectTMComet Assay Kit即彗星实验试剂盒来检测细胞的DNA损伤。该试剂盒不仅能让彗星实验化繁为简,还有两种不同规格(3孔和96孔)的细胞电泳凝胶板供选择,让少量样本和大量样本的DNA损伤检测通通轻松hold住。用该试剂盒做彗星实验流程如下图。

Cell Biolabs彗星实验试剂盒

除了操作简便,OxiSelectTMComet Assay Kit还有以下优点:

1)      适用于各种DNA损伤检测,是一款非常好用的DNA损伤检测筛选工具;

2)      试剂盒中的载玻片经过特殊处理以粘附低熔点琼脂糖,避免“脱胶”问题出现;

3)      采用特殊的DNA荧光染料,能有效降低背景干扰,更加方便读取实验结果。


彗星实验试剂盒信息:

品名

货号

规格

说明

OxiSelectTM Comet Assay Kit (3-Well Slides)

STA-350

15 assays

试剂盒内有5张3孔载玻片和彗星实验所需的低熔点琼脂糖、裂解液及DNA荧光染料等,共可检测15个样品。

OxiSelectTM Comet Assay Kit (3-Well Slides)

STA-351

75 assays

试剂盒内有25张3孔载玻片和彗星实验所需的低熔点琼脂糖、裂解液及DNA荧光染料等,共可检测75个样品。

OxiSelectTM Comet Assay Kit (96-Well Slides)

STA-355

96 assays

试剂盒内有1张96孔载玻片和彗星实验所需的低熔点琼脂糖、裂解液及DNA荧光染料等,共可检测96个样品。

为了满足客户更多样的实验需求,彗星实验试剂盒内特殊处理电泳载玻片还可以单独购买,详情如下:

品名

货号

规格

产品图片

Comet Assay Slides, 3-Well

STA-352

5 slides

Cell Biolabs彗星实验试剂盒

STA-353

25 slides

Comet Assay Slides, 96-Well

STA-356

1 slides

Cell Biolabs彗星实验试剂盒

STA-356-5

5 slides

产品部分发表文献:

  • Wang, T. et al. (2021). The effects of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency on benzene-induced hematotoxicity in mice. Ecotoxicol Environ Saf. 226:112803. doi: 10.1016/j.ecoenv.2021.112803.
  • Ciminera, A.K. et al. (2021). Elevated glucose increases genomic instability by inhibiting nucleotide excision repair. Life Sci Alliance. 4(10):e202101159. doi: 10.26508/lsa.202101159.
  • Hudita, A. et al. (2021). Bioinspired silk fibroin nano-delivery systems protect against 5-FU induced gastrointestinal mucositis in a mouse model and display antitumor effects on HT-29 colorectal cancer cells in vitro. Nanotoxicology. doi: 10.1080/17435390.2021.1943032.
  • Hung, S.Y. et al. (2021). Bavachinin Induces G2/M Cell Cycle Arrest and Apoptosis via the ATM/ATR Signaling Pathway in Human Small Cell Lung Cancer and Shows an Antitumor Effect in the Xenograft Model. J Agric Food Chem. doi: 10.1021/acs.jafc.1c01657.
  • Cho, K. et al. Suppressor of cytokine signaling 2 is induced in Huntington’s disease and involved in autophagy. Biochem Biophys Res Commun. 559:21-27. doi: 10.1016/j.bbrc.2021.04.089.
  • Cho, D.H. et al. (2021). Far-infrared irradiation inhibits breast cancer cell proliferation independently of DNA damage through increased nuclear Ca2+/calmodulin binding modulated-activation of checkpoint kinase 2. J Photochem Photobiol B. doi: 10.1016/j.jphotobiol.2021.112188.
  • Li, J. et al. (2021). Melatonin ameliorates cypermethrin-induced impairments by regulating oxidative stress, DNA damage and apoptosis in porcine Sertoli cells. Theriogenology. 167:67-76. doi: 10.1016/j.theriogenology.2021.03.011.
  • Li, M.Z. et al. (2021). Discovery of MTR-106 as a highly potent G-quadruplex stabilizer for treating BRCA-deficient cancers. Invest New Drugs. doi: 10.1007/s10637-021-01096-4.
  • Jeske, R. et al. (2021). Agitation in a Microcarrier-based Spinner Flask Bioreactor Modulates Homeostasis of Human Mesenchymal Stem Cells. Biochem Eng J. doi: 10.1016/j.bej.2021.107947.
  • Zhou, W. et al. (2021). Fine polystyrene microplastics render immune responses more vulnerable to two veterinary antibiotics in a bivalve species. Mar Pollut Bull. 164:111995. doi: 10.1016/j.marpolbul.2021.111995.
  • Park, K. et al. (2021). Aicardi-Goutières syndrome-associated gene SAMHD1 preserves genome integrity by preventing R-loop formation at transcription–replication conflict regions. PLoS Genet. 17(4): e1009523. doi: 10.1371/journal.pgen.1009523.
  • Ramos, H. et al. (2021). A selective p53 activator and anticancer agent to improve colorectal cancer therapy. Cell Rep. 35(2):108982. doi: 10.1016/j.celrep.2021.108982.
  • Planelló, R. et al. (2021). Genotoxic effects and transcriptional deregulation of genetic biomarkers in Chironomus riparius larvae exposed to hydroxyl- and amine-terminated generation 3 (G3) polyamidoamine (PAMAM) dendrimers. Sci Total Environ. doi: 10.1016/j.scitotenv.2021.145828.
  • Fan, D. et al. (2021). A Novel Salt Inducible Kinase 2 Inhibitor, ARN-3261, Sensitizes Ovarian Cancer Cell Lines and Xenografts to Carboplatin. Cancers (Basel). 13(3):446. doi: 10.3390/cancers13030446.
  • Siemionow, M. et al. (2020). Transplantation of Dystrophin Expressing Chimeric (DEC) Human Cells of Myoblast/MSC Origin Improves Function in Duchenne Muscular Dystrophy Model. Stem Cells Dev. doi: 10.1089/scd.2020.0161.
  • Lammert, C.R. et al. (2020). AIM2 inflammasome surveillance of DNA damage shapes neurodevelopment. Nature. doi: 10.1038/s41586-020-2174-3.
  • Shibayama, Y. et al. (2020). Aberrant (pro)renin receptor expression induces genomic instability in pancreatic ductal adenocarcinoma through upregulation of SMARCA5/SNF2H. Commun Biol. 3(1):724. doi: 10.1038/s42003-020-01434-x.
  • Han, J. et al. (2020). Elevated CXorf67 Expression in PFA Ependymomas Suppresses DNA Repair and Sensitizes to PARP Inhibitors. Cancer Cell. doi: 10.1016/j.ccell.2020.10.009.
  • Hays, E. et al. (2020). The SWI/SNF ATPase BRG1 stimulates DNA end resection and homologous recombination by reducing nucleosome density at DNA double strand breaks and by promoting the recruitment of the CtIP nuclease. Cell Cycle. doi: 10.1080/15384101.2020.1831256.
  • Ibnu Rasid, E.N. et al. (2020). Effect of Dioscorea hispida var. Daemona (Roxb) Prain & Burkill on Oxidative Stress and DNA Damage in the Liver of Pregnant Rats. Int J Biomed Sci. 16(3).
  • Le, B.V. et al. (2020). TGFβR-SMAD3 Signaling Induces Resistance to PARP Inhibitors in the Bone Marrow Microenvironment. Cell Rep. 33(1):108221. doi: 10.1016/j.celrep.2020.108221.
  • Klotz-Noack, K. et al. (2020). SFPQ Depletion Is Synthetically Lethal with BRAFV600E in Colorectal Cancer Cells. Cell Rep. 32(12):108184. doi: 10.1016/j.celrep.2020.108184.
  • Ito, S.S. et al. (2020). Inhibition of the ATR kinase enhances 5-FU sensitivity independently of non-homologous end-joining and homologous recombination repair pathways. J Biol Chem. doi: 10.1074/jbc.RA120.013726.
  • Klak, M. et al. (2020). Irradiation with 365 nm and 405 nm wavelength shows differences in DNA damage of swine pancreatic islets. PLoS One. 15(6):e0235052. doi: 10.1371/journal.pone.0235052.
  • Khalil, A.M. et al. (2020).  Association between Mobile Phone Using and DNA Damage of Epithelial Cells of the Oral Mucosa. J Biotechnol Biomed. 3(2020): 50-66. doi: 10.26502/jbb.2642-91280027.
  • Wang, Y. et al. (2020). Targeting therapeutic vulnerabilities with PARP inhibition and radiation in IDH-mutant gliomas and cholangiocarcinomas. Sci Adv. doi: 10.1126/sciadv.aaz3221.
  • Fang, Y. et al. (2020). Epigenetic dysregulation of Mdr1b in the blood-testis barrier contributes to dyszoospermia in mice exposed to cadmium. Ecotoxicol Environ Saf. 190:110142. doi: 10.1016/j.ecoenv.2019.110142.
  • Cupello, S. et al. (2019). Distinct roles of XRCC1 in genome integrity in Xenopus egg extracts. Biochem J. 476(24):3791-3804. doi: 10.1042/BCJ20190798.
  • Naci, D. et al. (2019). Cell adhesion to collagen promotes leukemia resistance to doxorubicin by reducing DNA damage through the inhibition of Rac1 activation. Sci Rep. 9(1):19455. doi: 10.1038/s41598-019-55934-w.
  • Lu, S. et al. (2019). Additive effects of a small molecular PCNA inhibitor PCNA-I1S and DNA damaging agents on growth inhibition and DNA damage in prostate and lung cancer cells. PLoS One. 14(10):e0223894. doi: 10.1371/journal.pone.0223894.

Cell Biolabs彗星实验试剂盒

上海金畔生物科技有限公司是Cell Biolabs品牌全国一级代理,为用户提供完善的技术支持与售后服务。如对产品感兴趣欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或了解更多信息。

细胞转化分析—CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成试剂盒

肿瘤是指细胞在致瘤因素作用下,基因发生了改变,失去对其生长的正常调控,导致异常增生。在癌变过程中,发生转化的细胞也具有上述特征,如生长过程中对外源生长刺激因子的依赖减少、失去细胞接触抑制效应,并通常导致永生化,这种锚定-不依赖性生长是肿瘤细胞的标识之一,也是检测恶性转化细胞最准确和严谨的标识。软琼脂培养法常用于检测肿瘤细胞和转化细胞系,该分析方案是监测锚定-不依赖性生长的常用手段。软琼脂培养法原理是利用癌细胞接触抑制效应的丧失,能在悬浮状态下能很好地成簇生长(一般正常的非转化细胞不能在悬浮状态下生长)。

细胞转化分析—CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成试剂盒常规软琼脂克隆形成实验是将细胞置于包含有软琼脂半干培养基的100mm或者60mm大小培养皿中,让细胞在软琼脂中培养3-4周以形成克隆,然后手动计数细胞克隆的形成数。该方法较为繁琐并耗时,不适合同时监测大量样品,而且在手动计数过程中带有非常大的不确定性,特别是当形成的细胞克隆大小差异较大时,很难得到更有效、精确的数据。

Cell BioLabs的CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成分析试剂盒(CytoSelect™  96-Well Cell Transformation Assay)克服了上述难题,使用该试剂盒不再需要3-4周漫长的克隆形成过程,只需要6-8天;而且无需进行手动计数,而是应用MTT(普通光分析)或CyQuant® GR Dye荧光染料(荧光分析),最终使用分光光度计或荧光计读取数值。由于采用上述技术,该软琼脂克隆形成分析试剂盒提供了一个定量的、高通量的方案来精确的检测细胞转化;另外,由于减少了细胞培养时间(6-8天),因此非常适用于一些原癌基因或siRNA的瞬时转染实验中的细胞分析。

常规软琼脂克隆形成分析 高级软琼脂克隆形成分析(可回收)

细胞转化分析—CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成试剂盒

细胞转化分析—CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成试剂盒

  • 克隆形成时间由原来的2-3周减少为仅需要一周
  • 结果可以直接使用荧光计读取,无需手动计数
  • 克隆形成时间由原来的2-3周减少为仅需要一周
  • 结果可以直接使用分光光度计或荧光计读取,无需手动计数
  • 经形成实验分析后的细胞可以回收并能用于后继实验
  •    
    产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
    CytoSelect™ 96-Well Cell Transformation Assay (Soft Agar Colony Formation)  CBA-130 荧光法检测,一次96孔板分析
    CBA-130-5 荧光法检测,五次96孔板分析
    产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
    CytoSelect™ 96-Well Cell Transformation Assay (Cell Recovery Compatible)    CBA-135 光度计检测,一次96孔板分析
    CBA-135-5 光度计检测,五次96孔板分析
    CBA-140 荧光计检测,一次96孔板分析
    CBA-140-5 荧光计检测,五次96孔板分析

    Cell BioLabs的CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成分析试剂盒分两种,一种是常规软琼脂克隆形成分析,另一种是改进后的高级软琼脂克隆形成分析。常规软琼脂形成试剂盒能大大减少实验时间,并使用荧光染料提高了数据的准确性;高级软琼脂克隆形成分析试剂盒则提供了细胞回收方案,而且还分为分光光度计和荧光剂两种检测手段,您可根据您的实验要求选择最合适的细胞转化分析方案。

    Cell BioLabs为您提供全套的细胞分析检测方案,针对于细胞的克隆形成及细胞转化,除了上述软琼脂克隆形成试剂盒外,还有针对细胞包括肿瘤细胞的药物敏感性分析和克隆性肿瘤细胞分离试剂盒提供。另外,Cell Biolabs还开发出其他多方位的基于细胞功能特征,特别是肿瘤细胞的特性的细胞粘附分析、细胞转移与浸润、细胞吞噬快速分析、细胞活力/死亡/毒性分析、细胞衰老及收缩检测,以及血管生成分析等多种分析试剂盒。如果您对上述细胞分析方案感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询细胞研究的相关实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

    高效实现细胞表面与胞内蛋白共染的流式细胞处理方法

    在科研和临床诊断中,因流式细胞术可以对细胞内的生物标志物进行免疫染色和鉴定,其在鉴定细胞表型和功能中的应用已越来越重要。在细胞表型鉴定工作中,由于一些典型的膜分子定位在细胞质内,如未分化白细胞的CD3和CD22定位在细胞质中,因此除了对细胞表面分子的染色,细胞内生物分子的免疫染色是必不可少的。

    高效实现细胞表面与胞内蛋白共染的流式细胞处理方法

    为了使细胞内生物分子的免疫染色达到更好的效果,Nordic-MUbio推出了一款适用于流式细胞固定和通透的试剂盒FIX&PERM®,该试剂盒可以同时对细胞表面和细胞内的生物标志物进行免疫染色,将整个流式细胞免疫染色时间缩短到1h以内,为细胞内生物分子的鉴定提供了一种更好、更高效的选择。有研究者使用FIX&PERM®试剂盒,对多种细胞表面CD分子和细胞内Ki-67(一种细胞内的增殖标志物)进行双重染色,通过流式分析增殖细胞(Ki-67阳性)数量,来证明疾病状态之间存在着显著差异。

    FIX&PERM®试剂盒由A液和B液两个试剂构成,其中A液能够温和地固定细胞,B液则起到通透细胞膜的作用。FIX&PERM®试剂盒的独特配方能有效地降低背景,把通透液和抗体一起加入细胞,还能让抗体更高效地穿过细胞膜,与细胞内生物分子结合(如细胞质或核酶、癌蛋白、细胞因子、免疫球蛋白等)。

    FIX&PERM® Cell Fixation and Permeabilization Kit

    货号: GAS-002

    规格:8 x 5ml

    应用:Flow Cytometry

    FIX&PERM®优势特点:

    • 固定细胞更加温和,保持细胞在流式细胞仪中的分散性;
    • 可同时对细胞内和细胞表面的生物分子进行双重染色;
    • 用时更短——-整个处理过程可在1h内完成,处理后的细胞可以立即检测,也可以暂时保存后检测(不超过24h);
    • 质控更严格——每个批次产品都要用已标定的血液样本检测,通过比较获得的白细胞分散性特征来确保不同批次试剂盒的一致性和稳定性。
    • FIX&PERM®试剂盒还可搭配Nordic-MUbio的细胞内生物标志物抗体,使流式检测效果更佳。

    FIX&PERM®使用方法

    1. 取50µl待测样品(如全血、骨髓或单核细胞悬液)于5ml离心管中;
    2. 加入100µl A液(固定液),室温孵育15min;
    3. 加入5ml PBS,300g离心5min;
    4. 移除上清,加入100µl B液(通透液)和20µl流式抗体,低速涡旋1-2s;
    5. 室温孵育15min;
    6. 参照第3步,用PBS再洗一遍细胞;
    7. 移除上清,用鞘液重悬细胞后做流式分析;如不能立即检测,可用0.5ml 1.0%甲醛重悬细胞,2-8℃避光保存,并在24h内检测。

    Nordi-MUbio热销单克隆流式抗体

    Nordic-MUbio还提供了一些列小鼠抗人PE/FITC耦连单克隆流式抗体,与FIX&PERM®试剂盒配合使用效果更佳。

    抗原

    克隆

    IgG类型

    抗体偶联物

    规格

    货号

    CD3

    UCHT1

    IgG1

    Purified

    0.2 mg

    GM-4011

    FITC-labeled

    100 tests

    GM-4012

    PE-labeled

    100 tests

    GM-4013

    CD22

    RFB4

    IgG1

    Purified

    0.2 mg

    GM-4051

    FITC-labeled

    100 tests

    GM-4052

    PE-labeled

    100 tests

    GM-4053

    Lactoferrin

    4C5

    IgG1

    Purified

    0.2 mg

    GM-4111

    PE-labeled

    100 tests

    GM-4113

    Myeloperoxidase

    8E6

    IgG1

    Purified

    0.2 mg

    GM-4191

    (MPO-C2)

    FITC-labeled

    100 tests

    GM-4192

    PE-labeled

    100 tests

    GM-4193

    Lysozyme

    LZ-2

    IgG1

    Purified

    0.2 mg

    GM-4131

    FITC-labeled

    100 tests

    GM-4132

    CD68

    Ki-M7

    IgG1

    FITC-labeled

    100 tests

    GM-4152

    IL-1 beta

    FIB3

    IgG1

    FITC-labeled

    100 tests

    GM-4162

    IFN-gamma

    GZ4

    IgG1

    FITC-labeled

    100 tests

    GM-4172

    Negative control

    Vl-AP

    IgG1

    FITC-labeled

    50 tests

    GIC-201

    PE-labeled

    50 tests

    Lysozyme

    LZ-2

    IgG1

    FITC-labeled

    50 tests

    GIC-206

    Lactoferrin

    4C5

    IgG1

    PE-labeled

    50 tests

    Myeloperoxidase

    8E6

    IgG1

    FITC-labeled

    50 tests

    GIC-212

    Lactoferrin

    4C5

    IgG1

    PE-labeled

    50 tests

    Myeloperoxidase

    8E6

    IgG1

    FITC-labeled

    50 tests

    GIC-213

    CD3

    UCHT1

    IgG1

    PE-labeled

    50 tests

    Myeloperoxidase

    8E6

    IgG1

    FITC-labeled

    50 tests

    GIC-214

    CD22

    RFB4

    IgG1

    PE-labeled

    50 tests

    高效实现细胞表面与胞内蛋白共染的流式细胞处理方法

    图1  Flow cytrometric analysis of normal bone marrow (BM) after fixation and pemeabilization using GAS-002, followed by immunostaining for lactoferrin and MPO-C2.

    图2  Immunostaining with Nordic-MUbio CD22-PE conjugate of undifferentiated leukemia cells of B-ALL type.

    图3  Immunostaining with Nordic-MUbio CD3-PE conjugate of surface CD3-negative undifferentiated leukemia cells of T-ALL type.

    上海金畔生物科技有限公司作为一站式生物试剂采购供应商,致力于整合全球优质资源,为生物研究领域客户提供丰富的产品与专业的服务。上海金畔是Nordic-MUbio品牌中国区一级代理,为客户提供完善的技术支持与售后服务。如对上述产品感兴趣,欢迎随时拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录上海金畔生物科技有限公司官网www.jinpanbio.cn查询订购。

    参考文献:

    Nies KPH, Kraaijvanger R, Lindelauf KHK, Drent RJMR, Rutten RMJ, Ramaekers FCS, Leers MPG. Determination of the proliferative fractions in differentiating hematopoietic cell lineages of normal bone marrow. Cytometry A. (2018) 93, 1097-1105 . doi: 10.1002/cyto.a.23564.

    诚邀美国Mirus成功举办细胞转染技术讲座

    上海金畔生物科技有限公司诚邀全球最专业的转染试剂研发与生产商美国Mirus 公司副总裁Scott博士,于2012年5月15日先后在首都医科大学和中国科学院举办了细胞转染技术讲座。讲座围绕细胞转染原理与机理、转染效率的影响因素,并重点带来DNA/siRNA/microRNA/mRNA 转染解决方案以及3D培养细胞和干细胞转染解决方案。

    本次活动受到了众多科研工作者的关注和认可,活动现场大家对Scott博士提出的转染试剂本身对细胞的毒性研究表现了极大的兴趣,会后仍有很多老师就转染中遇到的问题与Scott博士进行了沟通。

    上海金畔生物科技有限公司是美国Mirus中国区代理商,负责Mirus旗下全部细胞转染(包括化学转染及电转染)试剂以及核酸标记产品在中国地区的销售。受Mirus,上海金畔生物科技有限公司在活动现场发放了Mirus转染试剂试用装申请表,上海金畔生物科技有限公司将根据客户的需求在1个月内发放试用装。

    诚邀美国Mirus成功举办细胞转染技术讲座

    活动现场一

    诚邀美国Mirus成功举办细胞转染技术讲座

    活动现场二

    附:美国Mirus系列转染试剂

    DNA

    RNA

    OLIGO

    电转染试剂盒

    广谱型转染试剂

    Viral RNA, mRNA转染试剂

    DNA and RNA

    电转染试剂盒

    TransIT®-2020 Reagent

    TransIT®-mRNA Kit

    TransIT®-Oligo Reagent

    Ingenio® Electroporation Kits

    TransIT®-LT1 Reagent

         

    TransIT®-Express Reagent

         

    高表达转染试剂

         

    NEW! TransIT-PRO® Kit

         

    3D细胞转染试剂

         

    NEW! 3D Transfection System

         

    NEW! TransIT®-3D Reagent

         

    细胞特异性转染试剂

    siRNA/miRNA转染试剂

       

    TransIT®-293 Reagent

    TransIT-TKO® Reagent

       

    TransIT®-3T3 Kit

    TransIT-siQUEST® Reagent

       

    TransIT®-CHO Kit

    TransIT®-siPAK Kit

       

    TransIT®-COS Kit

    TransIT®-siPAK Plus Kit

       

    TransIT-HeLaMONSTER® Kit

         

    TransIT®-Jurkat Reagent

         

    TransIT®-Keratinocyte Reagent

         

    TransIT-Neural® Reagent

         

    TransIT®-Prostate Kit

         

    重组胰酶:安全、高效、稳定

    胰蛋白酶以下简称胰酶)属于丝氨酸蛋白酶家族成员,是一种肽链内切酶,可以在赖氨酸和精氨酸C端切断肽链是生物制品生产过程中应用非常广泛的一种生物原材料。在细胞培养过程中,胰酶主要功能是分解细胞间的粘蛋白和糖蛋白,使细胞彼此分开,然后进行细胞传代培养。胰酶除了具有消化细胞的功能外,在某些病毒疫苗生产过程中,如细胞培养制备的流感疫苗轮状病毒疫苗,往往需要在病毒培养阶段加入适量胰酶,使病毒抗原暴露并与细胞受体结合,从而提高病毒感染效率对于某些重组蛋白制品,如重组胰岛素,通常使用胰酶作为剪切酶,将胰岛素原转化为具有生物活性的胰岛素。


    当前使用最广泛的胰酶主要是由动物胰脏浸出液提纯冻干后制备而成,其原料主要来自牛或胰脏。尽管胰酶制备要经过适当的纯化工艺,但由于动物本身可能携带多种病毒(如疯牛病病毒朊病毒猪瘟病毒受到制备工艺、生物原材料特点以及当前检测手段所限,动物源胰酶存在较高的外源病毒污染风险影响了生物制品的安全性2010葛兰素史克(GSK生产的口服轮状病毒疫苗就曾检测出PCV1病毒序列,经溯源发现有可能是制备轮状病毒疫苗所用Vero细胞被胰酶引入了PCV1病毒污染所致加之近年来非洲猪瘟、COVID-19人兽共患病毒传染病引发的公共安全危机,在生物制品生产过程中使用安全性更高、风险更可控的重组生物原材料替代动物已经主要趋势

    重组胰酶:安全、高效、稳定

     

    上海金畔科技有限公司代理的KERRY重磅推出了一款重组胰蛋白酶Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶采用基因工程技术生产,生产过程中不添加任何动物源成分,无外源病毒污染风险,安全性高,纯度高,活性强非常适用于细胞培养疫苗/重组病毒生产、干细胞培养以及治疗性原代细胞培养等应用是一款应用效果和风险控制方面动物源胰酶更好的替代产品。


    传统动物源胰酶相比,KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF优势特点主要以下几个方面


    • 质量控制方面Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶无动物源成分(ACF),避免了引入外源病毒污染风险,生物安全性更高,符合CDE生物制品生产用原材料的质量控制要求
    • 从产品性能方面,其适用细胞类型广泛(Vero、HEK、MRC-5消化效率更加温和,不伤细胞,主要表现为消化传代后的细胞倍增时间更短,细胞活率更高。
    • Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶的基因序列是微生物胰酶,蛋白稳定性更配成液体室温放置一个月,胰酶活性不降低。
    • Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶消化细胞无需洗细胞面也无需添加胰酶抑制剂直接加入新鲜培养基继续培养细胞即可


    与其他商品化重组胰酶相比KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF表现出同等甚至更优的性能(如下图所示)主要表现为KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF消化细胞所需要的时间更短,消化传代后细胞的生长表现更好并且批间稳定性也非常可靠。

    重组胰酶:安全、高效、稳定

     

    KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF产品信息/参数指标

    货号

    30624799

    规格

    1g/ 5g/ 如需更大包装可联系上海金畔生物科技有限公司

    性状

    浅棕色颗粒状粉末

    酶活性

    ≥800 U/mg

    菌落数

    <10000 cfu/g

    稳定性

    0-25℃条件可稳定保存至少2

     

     

    重组胰酶:安全、高效、稳定

     

    美国KERRY集团旗下Sheffield Bio-Science服务全球超过70年,作为全球生物制药疫苗行业规模大专业性强的细胞营养原料供应商,已成为全球单个药物年销售额超过10亿美金的10个“生物炸弹药”中7个生物药的培养基原料供应商,是全球少有的同时生产酵母粉和蛋白胨并针对不同细胞株/菌种开发提供非动物源性复合添加物系统的生产商,引领全球制药、疫苗、无血清培养基、传统发酵和诊断培养基工业的发展。

    北京金畔生物科技有限公司是KERRY品牌细胞培养产品线中国一级代理商,为用户提供完善的技术支持与售后服务。如对以上产品感兴趣欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。

    参考文献

    1.洪小栩. 关于加强生物制品生产用胰酶质量控制的思考. 中国生物制品学杂志,2014, 27(7):981-984.

    2.Heuer AH. Engineering and vaccine production for an influenza pandemic [J]. The Bridge, 2006, 36(3):3-5.

    3. Angel J, Franco MA, Greenberg HB. Rotavirus vaccines: recent developments and future considerations [J]. Nat Rev Microbio, 2007, 5(7):529-539.


    胰蛋白酶以下简称胰酶)属于丝氨酸蛋白酶家族成员,是一种肽链内切酶,可以在赖氨酸和精氨酸C端切断肽链是生物制品生产过程中应用非常广泛的一种生物原材料。在细胞培养过程中,胰酶主要功能是分解细胞间的粘蛋白和糖蛋白,使细胞彼此分开,然后进行细胞传代培养。胰酶除了具有消化细胞的功能外,在某些病毒疫苗生产过程中,如细胞培养制备的流感疫苗轮状病毒疫苗,往往需要在病毒培养阶段加入适量胰酶,使病毒抗原暴露并与细胞受体结合,从而提高病毒感染效率对于某些重组蛋白制品,如重组胰岛素,通常使用胰酶作为剪切酶,将胰岛素原转化为具有生物活性的胰岛素。

    当前使用最广泛的胰酶主要是由动物胰脏浸出液提纯冻干后制备而成,其原料主要来自牛或胰脏。尽管胰酶制备要经过适当的纯化工艺,但由于动物本身可能携带多种病毒(如疯牛病病毒朊病毒猪瘟病毒受到制备工艺、生物原材料特点以及当前检测手段所限,动物源胰酶存在较高的外源病毒污染风险影响了生物制品的安全性2010葛兰素史克(GSK生产的口服轮状病毒疫苗就曾检测出PCV1病毒序列,经溯源发现有可能是制备轮状病毒疫苗所用Vero细胞被胰酶引入了PCV1病毒污染所致加之近年来非洲猪瘟、COVID-19人兽共患病毒传染病引发的公共安全危机,在生物制品生产过程中使用安全性更高、风险更可控的重组生物原材料替代动物已经主要趋势

    重组胰酶:安全、高效、稳定

    上海金畔科技有限公司代理的KERRY重磅推出了一款重组胰蛋白酶Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶采用基因工程技术生产,生产过程中不添加任何动物源成分,无外源病毒污染风险,安全性高,纯度高,活性强非常适用于细胞培养疫苗/重组病毒生产、干细胞培养以及治疗性原代细胞培养等应用是一款应用效果和风险控制方面动物源胰酶更好的替代产品。


    传统动物源胰酶相比,KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF优势特点主要以下几个方面


    • 质量控制方面Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶无动物源成分(ACF),避免了引入外源病毒污染风险,生物安全性更高,符合CDE生物制品生产用原材料的质量控制要求
    • 从产品性能方面,其适用细胞类型广泛(Vero、HEK、MRC-5消化效率更加温和,不伤细胞,主要表现为消化传代后的细胞倍增时间更短,细胞活率更高。
    • Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶的基因序列是微生物胰酶,蛋白稳定性更配成液体室温放置一个月,胰酶活性不降低。
    • Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶消化细胞无需洗细胞面也无需添加胰酶抑制剂直接加入新鲜培养基继续培养细胞即可


    与其他商品化重组胰酶相比KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF表现出同等甚至更优的性能(如下图所示)主要表现为KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF消化细胞所需要的时间更短,消化传代后细胞的生长表现更好并且批间稳定性也非常可靠。

    重组胰酶:安全、高效、稳定

    KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF产品信息/参数指标

    货号

    30624799

    规格

    1g/ 5g/ 如需更大包装可联系上海金畔生物科技有限公司

    性状

    浅棕色颗粒状粉末

    酶活性

    ≥800 U/mg

    菌落数

    <10000 cfu/g

    稳定性

    0-25℃条件可稳定保存至少2

    重组胰酶:安全、高效、稳定

    美国KERRY集团旗下Sheffield Bio-Science服务全球超过70年,作为全球生物制药疫苗行业规模大专业性强的细胞营养原料供应商,已成为全球单个药物年销售额超过10亿美金的10个“生物炸弹药”中7个生物药的培养基原料供应商,是全球少有的同时生产酵母粉和蛋白胨并针对不同细胞株/菌种开发提供非动物源性复合添加物系统的生产商,引领全球制药、疫苗、无血清培养基、传统发酵和诊断培养基工业的发展。

    北京金畔生物科技有限公司是KERRY品牌细胞培养产品线中国一级代理商,为用户提供完善的技术支持与售后服务。如对以上产品感兴趣欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。

    参考文献

    1.洪小栩. 关于加强生物制品生产用胰酶质量控制的思考. 中国生物制品学杂志,2014, 27(7):981-984.

    2.Heuer AH. Engineering and vaccine production for an influenza pandemic [J]. The Bridge, 2006, 36(3):3-5.

    3. Angel J, Franco MA, Greenberg HB. Rotavirus vaccines: recent developments and future considerations [J]. Nat Rev Microbio, 2007, 5(7):529-539.

    细胞培养基重要的原料——维生素

    细胞培养基是为了提供一个能支持细胞体外生长和维持,以及生产蛋白类大分子药物,如单克隆抗体的环境,其主要成分包括氨基酸、维生素、碳水化合物、无机离子以及血清、细胞因子等。其中,维生素是生物体内一类量微、化学结构各异、具有特殊功能的小分子化合物,是维持细胞生长的重要生物活性物质。这类物质既不是构成细胞的原料,也不是能量的来源,通常以辅酶或辅基的形式参与体内酶促反应体系,在代谢过程中起重要调节作用。大部分维生素在细胞内不能合成或合成量不足,因而是细胞培养基中不可缺少的重要成分。

    常用于细胞培养基添加的维生素包括B族维生素(如核黄素、维生素B12、叶酸、生物素等)和维生素C等。上海金畔生物科技有限公司代理的Applichem品牌可提供多种高品质维生素(详见下表),是生物制品细胞培养工艺添加原料的不二之选。

    名称

    作用机制

    货号

    规格

    CAS No.

    级别

    核黄素(维生素B2)

    Riboflavin

    与特定的蛋白质结合生成黄酶。黄酶在物质代谢中起传递氢的作用,参与组织的呼吸过程。

    A6279

    100g, 250g

    83-88-5

    药典级

    叶酸(维生素B9)

    Folic acid

    是合成四氢叶酸的重要原料,四氢叶酸在核酸的生物合成和蛋白质的生物合成过程中起重要作用。

    A7092

    25g, 100g

    59-30-3

    药典级

    钴胺素(维生素B12)

    Vitamin B12

    作为甲基转移酶的辅因子,参与蛋氨酸、胸腺嘧啶等的合成,从而促进蛋白质的生物合成;保护叶酸在细胞内的转移和贮存。

    A8454

    1g, 25g, 500g

    68-19-9

    药典级

    泛酸钙(维生素B5)

    D-Pantothenic Acid Calcium Salt

    是辅酶A的组成部分,只有右旋体(D-)具有维生素活性,参与蛋白质、脂肪、糖等多种物质代谢;参与类固醇、卟啉、乙酰胆碱等物质的合成。

    A2088

    100g

    137-08-6

    生化级

    盐酸吡哆醇(维生素B6)

    Pyridoxine Hydrochloride

    是多种酶如转氨基酶、脱羧酶、消旋酶、脱氢酶、合成酶和羟化酶等的辅酶,且可帮助糖类和蛋白质的分解利用;维生素B6还能增加氨基酸及钾离子逆浓度进入细胞的运转速度。

    A8093

    100g

    58-56-0

    药典级

    生物素(维生素B7)

    D(+)-Biotin

    是一些特异羧化酶的组成部分,参与糖代谢和脂肪酸的合成过程。

    143977

    1g, 50g

    58-85-5

    药典级

    肌醇(维生素B8)

    myo-Inositol

    用于合成肌酸磷脂膜磷脂、鞘脂等前体物质,为多种细胞生长所必需。

    A1716

    100g, 250g, 10kg

    87-89-8

    生化级

    烟酰胺

    Nicotinamide

    是辅酶I和辅酶II的组成部分,也是许多脱氢酶的辅酶。

    A0959

    250g

    98-92-0

    药典级

    烟酸

    Nicotinic Acid

    可转化为烟酰胺,再与核糖腺嘌呤等组成辅酶I和辅酶II,为脂质氨基酸、蛋白、嘌呤代谢,组织呼吸的氧化作用和糖原分解所必需。

    A0963

    100g, 250g

    59-67-6

    药典级

    抗坏血酸(维生素C)

    L(+)-Ascorbic Acid

    是一种高效抗氧化剂,用来减轻细胞的氧化应激反应;还参与细胞内重要的生物合成过程。

    141013

    1000g, 5kg

    50-81-7

    药典级

    氯化胆碱

    Choline Chloride

    是乙酰胆碱、卵磷酯和神经磷酯的组成部分,主要参与调节脂肪的代谢与转化,促进氨基酸的再形成,提高氨基酸的利用率。

    A0785

    1kg

    67-48-1

    生化级

    硫辛酸

    DL-α-Lipoic Acid

    是丙酮酸脱氢酶复合物、酮戊二酸和氨基酸氢化酶复合物的辅助因子,具有抑制脂质氧化,阻止蛋白质的糖基化,抑制醛糖还原酶,阻止葡萄糖或半乳糖转化成为山梨醇等作用。

    A4065

    5g

    1077-28-7

    生化级

    盐酸吡哆醛

    Pyridoxal Hydrochloride

    是氨基酸代谢中转氨酶及脱羧酶的辅酶,能促进谷氨酸脱羧,促进γ-氨基丁酸的生成;它还可以催化包括α-氨基酸与α-酮酸的转氨基和α-氨基酸的脱羧基等作用。

    A0960

    25g, 1kg

    65-22-5

    生化级

    细胞培养基重要的原料——维生素

    PanReac AppliChem是来自欧洲品质优良的生物化学试剂与制药原料生产商之一,已通过多项ISO 9001质量体系认证,是全球科研、知名CRO企业、大型制药、诊断、食品、化妆品等工业企业的重要供应商。作为全球多家知名培养基生产企业和制药企业长期固定供应商,Applichem全面提供细胞培养级、符合药典级、生化级、超纯级等培养基化学品组分,包括氨基酸、蛋白质、维生素、抗生素、脂类、无机盐、缓冲液、泡沫稳定剂、指示剂等和制药工艺中常用化学品如尿素、Tris、葡聚糖等。上海金畔生物科技有限公司是PanReac AppliChem的中国区一级代理商,为用户提供完善的技术支持与售后服务。如对以上产品感兴趣欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。

    Bambanker无血清细胞冻存液—免费使用

    Bambanker无血清即用型细胞冻存液——给细胞更多的呵护

    Serum-free for sensitive cell lines, like ES and primary cells,Gradual or programmable freezing is no longer necessary

    Bambanker欧洲专利产品(专利号1347040)

    Bambanker产品特点

    ü  即用型细胞冻存液,无需程序性降温

    ü  尤其适用于各类敏感细胞,如ES细胞、原代细胞

    ü  高复苏率(请见对比图效果)

    ü  可-80℃或液氮中长期冻存,稳定保存1年以上

    ü  无血清,成份确定,避免由支原体、病毒、朊病毒及其他病毒颗粒引发的污染

    ü  产品经无菌检测,符合日本药典

    ü  产品可2~8 ℃稳定保存2年

    Bambanker操作流程使用说明:

    收集对数生长期的细胞(5 x 105 ~ 1 x 107

    用1ml Bambanker重悬细胞,置于冻存管中,无需预冷。

    产品订购信息:

    品名

    货号

    规格

    BambankerTM

    BB01

    120ml

    系列冻存液:

    品名

    描述

    货号

    规格

    BambankerTM Direct

    细胞冻存时无需离心,非常适用于杂交瘤细胞

    BBD01

    20ml

    BambankerTM HRM

    使用人血清白蛋白,无动物源性

    BBH01

    20ml

    Bambanker使用发表文献(部分)

    ü  T. Hikichi et al., Differentiation potential of parthenogenetic embryonic stem cells is improved by nuclear transfer. Stem cells25, 46 (Jan, 2007).

    ü  S. Mieno et al., Characteristics and function of cryopreserved bone marrow-derived endothelial progenitor cells. The Annals of thoracic surgery85, 1361 (Apr, 2008).

    ü  S. Hatoya et al., Effect of co-culturing with embryonic fibroblasts on IVM, IVF and IVC of canine oocytes. Theriogenology66, 1083 (Sep 15, 2006).

    ü  D. Liu et al., Relation between human decay-accelerating factor (hDAF) expression in pig cells andinhibition of human serum anti-pig cytotoxicity: value of highly expressed hDAF for xenotransplantation. Xenotransplantation14, 67 (Jan, 2007).

    ü  S. K. Zaidi et al., Runx2 deficiency and defective subnuclear targeting bypass senescence to promote immortalization and tumorigenic potential. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America104, 19861 (Dec 11, 2007).

    ü  S. Mieno et al., Effects of diabetes mellitus on VEGF-induced proliferation response in bone marrow derived endothelial progenitor cells. Journal of cardiac surgery25, 618 (Sep, 2010).

    ü  Y. Shimizu et al., Impaired Tax-specific T-cell responses with insufficient control of HTLV-1 in a subgroup of individuals at asymptomatic and smoldering stages. Cancer science100, 481 (Mar, 2009).

    Bambanker相关产品

    王牌常规冻存试剂DMSO,细胞培养级,质优价廉,来自德国Applichem(货号A3762)

    给细胞更多的安全保护——支原体污染检测/清除/预防系列

    Nature推荐PCR假阳性污染完美解决方案——DNA-ExitusPlusTM

    上海金畔生物科技有限公司更多产品可咨询全国客服电话021-50837765

    细胞支原体污染检测PCR试剂盒/清除/预防系列产品—现货供应

    德国Applichem提供支原体检测/清除/预防全系列产品,给您的细胞更多的安全与保护

    为什么要重视细胞培养中的支原体污染?

    您的实验结果是否能保证没有受到支原体污染的影响?

    世界性难题!!!!Nature最新发布细胞研究领域中支原体污染问题严重性

    Ewen Callaway. Contamination hits cell work. Nature, 29 July 2014; doi:10.1038/511518a

    1. 污染率高:在细胞研究领域,支原体是臭名昭著的污染源,二十世纪九十年代的支原体污染率是四分之一,而目前有仍然有超过十分之一的基因表达研究(许多曾发表在顶尖杂志上),表现出支原体污染的迹象。
    2. 影响日趋严重:虽然支原体污染并不一定意味着研究结果无效,但它会影响数百个基因的表达,并与细胞竞争营养阻碍细胞的生长。在目前测试的一组受污染的数据中(淋巴瘤细胞),已经鉴定出61个被支原体改变的基因,干扰了实验结果。这无疑是对时间,资源,经费极大的浪费;
    3. 难察觉:支原体污染完全是不留痕迹的,污染后的细胞生长速率一般并未发生显著的影响,无法用肉眼识别,除非采用专门的支原体检测方法检测;
    4. 污染源多:“草率操作”、细胞系流通的交叉污染、操作人员自身都是很重要的污染源;
    5. 难去除:支原体体积小,无细胞壁,约有1%的支原体可通过过滤器,且一般抗生素根本无法有效抑制或者去除支原体,另外,部分抗生素使用后会对细胞产生敏感效果,从而影响细胞的状态;
    6. 重视程度日益增加:顶尖杂志发表实验结果需验证支原体污染影响,在国际上,支原体污染检测已经日益成为细胞培养污染常规检测之一,有效规避细胞支原体污染。

    支原体检测系列

    传统的支原体检测方法包括支原体分离培养、支原体特异酶检测、DNA荧光染色检测以及PCR检测,除PCR检测方法以外,其他检测方法大多耗时长,要求检测人员具有丰富的经验,并且无法获得足够的灵敏度和特异性,对于一些稀有的支原体亚种无法有效检测。

    Applichem设计的支原体检测试剂盒系列产品均是基于PCR方法,根据支原体16S rRNA保守序列设计引物,经过PCR反应扩增其16S rRNA片段,后采用琼脂糖电泳方法检测270bp条带。相对传统方法而言,具有强大优势:

    a)    高灵敏度:敏感度高达100~1000CFU/ml,仅需要0.5 – 1.0 ml细胞上清样本即可检测;

    b) 检测品种广泛:可检测常规品种,同时对于稀有亚种也能同效检测,如M. pneumoniae, Acholeplasma laidlawii, M. synoviae, M. pulmonis, M. bovis,几乎覆盖自然界80余个品种;

    c)     快速:操作时间只需30分钟,全程5个小时内即可得到检测结果;

    d)可靠:试剂盒中包括有阳性对照DNA,可保证实验结果的可重复性,减小因操作而带来的误差;

    e)    安全性:无支原体培养过程,有效避免污染扩大;

    产品型号

    检测方法

    适用仪器

    试剂盒组分

    PCR Mycoplasma Test Kit

    (货号A3744)

    普通PCR-电泳检测

    普通PCR仪器

    Reaction Mix
    Buffer Solution
    Positive Template Control

    qPCR Mycoplasma Test Kit

    (货号A9019)

    荧光定量PCR

    LightCycler®1.2, 1.5, 2.0, 480, Rotor-Gene™ 3000, 6000, ABI Prism® 7000, iCycler iQ®, iQ™5, Opticon 2, Chromo 4, MX300P®, MX4000®.

    Primer/Probe/Nucleotide Mix(RED)
    Rehydration Buffer(BLUE)
    Positive Control DNA(GREEN)
    Internal Control DNA(YELLOW)
    PCR Grade Water(WHITE)

    支原体清除系列

    对于普通细胞系,遭受污染以后可以通过重新复苏,购买等途径更换样本,但是对于一些较难获得的样本,如干细胞,原代细胞,经过特殊处理的,或订购困难的细胞,一旦遭受支原体污染后,一定要马上进行处理。Applichem研发的支原体清除的Myco系列产品,可以直接整合到质膜上破坏支原体的完整性,从而有效的清除支原体污染,并可以针对不同程度,不同细胞样本进行针对性处理,处理过程简单,对细胞不会造成任何副作用。

    名称

    主要成分

    适用样本

    使用方法

    Myco-3

    (货号A5240)

    环丙沙星

    贴壁细胞,可清除大多数支原体污染

    100倍稀释加入培养基,每2-3天换液,连续处理14天

    Myco-1

    (货号A5222)

    泰妙菌素

    贴壁细胞,配合能解决顽固型支原体或者使用Myco-3处理停用后又出现支原体污染的情况

    100倍稀释加入培养基,与Myco-2配合使用,使用Myco-1处理4天后换Myco-2处理3天,如此重复2-3次即可

    Myco-2

    (货号A5233)

    二甲胺四环素

    Myco-4

    (货号A8366)

    专利配方

    贴壁细胞,悬浮细胞,病毒培养物

    1瓶起始液和3瓶维持液配合使用

    细胞污染预防系列

    有效保护细胞的最好方式是对于细胞培养环境的预防,如工作环境定期消毒处理,严格实验操作,保证器皿无菌等各方面。在实验室中,CO2培养箱,C02培养箱水盘,水浴锅是非常重要的污染源。Applichem研发有系列污染预防系列产品专门针对这3大污染源,可有效预防真菌(及芽孢)、细菌、病毒等污染。使用方便,无腐蚀性,安全高效。

    名称

    适用环境

    预防微生物

    使用方法

    Incubator-Clean
    (货号A5230)

    CO2培养箱

    工作台

    支原体,真菌及芽孢、细菌、病毒(包括HIV,HBV等)

    即用型,喷雾处理完全湿润即可,无需转移出细胞,建议每2周处理一次

    Incuwater-Clean
    (货号A5219)

    C02培养箱水盘

    支原体,真菌及芽孢、细菌、病毒(包括HIV,HBV等)

    100倍稀释加入水盘灭菌水中,建议每2-4周更换灭菌水

    Aquabator-Clean
    (货号A9390)

    水浴锅

    细菌,真菌

    100倍稀释加入水浴锅,建议每1-2周向水浴锅加入一次,每4-6周给水浴锅更换一次水

    作为著名的生化试剂供货商,AppliChem为多家制药、化工等知名企业以及生物技术、生化试剂等著名品牌,如美国Sigma、德国Merck等提供产品。除了作为全球知名生化产品的OEM供货商,全世界还有成千上万的公共科研机构、大学以及生物技术公司通过直接订购,正在使用AppliChem的优质产品和服务。

    作为Applichem的中国一级代理商,上海金畔生物科技有限公司为您选择最优的实验室生化试剂解决方案。在Applichem的众多化工、生化及分子生物学等试剂中,除了质量优质、价格低廉外,还有很多特色生化试剂和细胞实验室解决方案。上海金畔生物科技有限公司根据国内科研的现实需求,为客户选择最具性价比的生化试剂和产品解决方案。伴随着与AppliChem合作的加深,不管是在价格、供货质量保障、供货时间以及售后服务方面,上海金畔生物科技有限公司都能为您提供最值得信赖的产品服务。如需了解更多信息请致电021-50837765。