DNA纯化方法和流程概述?

DNA纯化方法和流程概述?

BiteSizeBio列出了“清理 DNA 样本的 5 种方法”。在某种程度上,这个总结是过时的并且具有误导性。让我们来看看它们是如何工作的。

  1. 苯酚-氯仿萃取以去除蛋白质。将 DNA 溶液与苯酚和氯仿混合。水溶性 DNA 分配到水相中,而蛋白质在有机溶剂存在下变性,从而留在有机相中。

  2. 乙醇沉淀脱盐。在 DNA 提取中,盐通过破坏将核酸固定在一起的蛋白质链来释放 DNA 链。由于 DNA 不溶于乙醇。在乙醇溶液中,盐使 DNA 不易溶于水,同时有助于保持蛋白质(有机小分子)溶解在水中。结果是,DNA 分子聚集并从溶液中沉淀出来。

  3. 基于硅胶柱,使用硅胶或硅胶珠和离液盐。离液盐会破坏链之间的氢键,促进 DNA 与二氧化硅的结合以及与样品其余部分的分离。

  4. 阴离子交换使用带正电荷的 DEAE 功能化树脂结合带负电荷的 DNA 磷酸主链。

  5. 磁珠使用磁珠以 pH 依赖性方式有条件地结合 DNA,让您只需控制 pH 即可将 DNA 与样品的其余部分分离。磁珠带正电,在低 pH 条件下结合 DNA,但在高 pH 条件下,它们带负电荷,从而释放 DNA。

前两个实际上是称为有机提取的DNA 提取方法的一部分,该方法包括裂解步骤、苯酚氯仿提取、乙醇沉淀和洗涤步骤。

后 3 个用于 DNA 清理。所有步骤都包括结合、洗涤和洗脱步骤。其中基于磁珠的方法,因为不需要离心和其他耗时的处理步骤。它是高通量处理自动化的理想选择。由于它是现在的主流方法,珠子的成本在过去十年中下降了一半。

如何净化DNA?

DNA纯化方法和流程概述?

图 3. DNA 纯化工作流程。

  1. 混合:将纳米颗粒与 DNA 样品混合。

  2. 结合:当与样品混合时,纳米粒子与目标 DNA 样品结合。

  3. 清洗:使用磁力(例如磁力分离架)来拉动和聚集结合的材料。通过抽吸去除未结合的材料,剩下的是纳米颗粒结合的目标。

  4. 洗脱:从纳米颗粒中释放结合的目标样品。清洁后的 DNA 样品即可用于下游应用。

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,化工,生物产业,制药

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Sorbent Technologies, Inc. 专门提供色谱和纯化解决方案,帮助化学家进行方法开发和优化——从分析方法到使用标准和复杂化学物质的全面生产。我们提供业界广泛的高质量色谱产品系列,并拥有科学专业知识来协助客户完成从实验室到中试再到工业过程应用的项目。


上海金畔生物科技有限公司

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  • 产品型号:SBS01-48
  • 简要描述:硅胶封板垫 方/圆形 96孔 384孔 10张/包上海金畔生物科技有限公司供应:移液器吸嘴,ELISA试剂盒,动物血清,全系荧光定量PCR耗材,产品包括:PCR单管、八联管、96孔板、384孔板。
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硅胶封板垫 方/圆形 96孔 384孔 10张/包 上海金畔生物供应实验室耗材全。10张/包,50张/一盒,方形孔,96孔,一字标记

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温馨提示:不可用于临床治疗。

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硅胶封板垫 方/圆形 96孔;可穿刺

  • 产品型号:SBS01-96X
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硅胶封板垫 方/圆形 96孔;可穿刺 上海金畔生物供应实验室耗材全。规格500支/盒, 10盒/箱 (5000支/箱)

10张/包,50张/一盒,方形孔,96孔,一字标记

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SBS01-48 硅胶封板垫;方形孔;48孔
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SBC01-96PCR PCR硅胶封板垫;圆形孔;96孔
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SBC01-8S 8联硅胶密封垫;圆形小孔
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硅胶封板垫 方/圆形 96孔;可穿刺适应客户:医院检验科PCR实验室,中心实验室,肝病中心;第三方检测机构,科研院所,大专院校,制药厂,试剂生产厂家,疾控中心,检验检疫。 

Tip 1-200ul国产加长吸嘴,无色, 带滤芯, 盒装灭菌

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人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白试剂盒(E-Cad)ELISA检测试剂盒

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人凋亡相关因子试剂盒(FAS/CD95)ELISA检测试剂盒

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默克密理博20x20cm改性薄层层析板,RP-2、RP-8和RP-18由脂肪族烷烃改性硅胶60制备而成的。链长与改性程度两方面因素,决定溶剂体系对水的耐受性,且深刻影响薄层板对分析物的保留能力。

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改性硅胶TLC板提供额外的选择性,并大幅拓展薄层色谱应用范围。它们满足要求严格的TLC分离,同时亦可作为HPLC的先导技术。RP-2、RP-8和RP-18板基于脂肪族烷烃改性硅胶60;氨基改性NH2硅胶板提供弱碱性离子交换作用,对带电化合物具有*的选择性; CN和二醇改性硅胶板具有中等极性,适用于正相和反相系统。

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当使用标准硅胶板无法充分解决分离难题时,可以改性硅胶板改善分离:溶剂体系可自由选择,确保满足***分离需求。

PR-改性硅胶板

RP-2、RP-8和RP-18由脂肪族烷烃改性硅胶60制备而成的。链长与改性程度两方面因素,决定溶剂体系对水的耐受性,且深刻影响薄层板对分析物的保留能力。相同溶剂体系下,分析物在RP-2/RP-8/RP-18上的保留时间依次增加。HPTL-C RP-2吸附剂对水溶液具有更高的极性和亲和性,可耐受高达80%的水;而较长的碳链RP-8和R-18可在含有高达60%水溶剂体系中使用。

改性硅胶板的优势:

结果对大气湿度的依赖性较小。

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对于不稳定物质,无催化活性(如氧化降解)的改性硅胶TLC板提供额外的选择性,大幅拓展TLC应用范围。

默克密理博20x20cm改性薄层层析板

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默克密理博20x20cm改性薄层层析板1.05747.0001