KPL-辣根过氧化物酶(HRP)底物

TMB/辣根过氧化物酶底物/四甲基联苯胺

DAB/辣根过氧化物酶底物/二氨基联苯胺

酶免技术常应用的酶有辣根过氧化酶和碱性磷酸酶,针对不同的酶,所作用的底物是不同的。 

常用的HRP的底物有邻苯二胺(OPD)、四甲基联苯胺(TMB)和ABTS等。其中OPD主要用于ELISA试验,灵敏度高,比色方便。其缺点是配成应用液后稳定性差,而且具有致癌性。TMB是常用HRP酶的显色底物 western blot、Elisa等实验的显色试剂,是一种优于OPD的新型HRP色原底物,经酶作用后由无色变蓝色,目测对比鲜明;加酸停止酶反应后变黄色,可在比色计中定量;因此应用日见增多。

DAB可用于检测过氧化物酶(peroxidase)活性,是辣根过氧化物酶等过氧化物酶的显色底物。经过氧化物酶催化后可产生不溶性棕色产物。可以用于基于过氧化物酶检测的免疫组化、Western等的显色检测。

ABTS是一种水溶性HRP底物,在过氧化物酶的作用下产生绿色终产物。该绿色产物在410nm及650nm具有两个主要吸收峰。在ELISA应用中,ABTS的灵敏度比OPD和TMB稍差。它会被缓慢氧化并显色。相对于OPD或TMB底物高灵敏度造成的不可接受的高背景,虽然灵敏度不如OPD和TMB,但空白值很低。

KPL-辣根过氧化物酶(HRP)底物

KPL是美国最早实现亲和素纯化二抗商业化的生物公司,同时也是世界上较大的二抗和底物显色系统生产商。KPL可为您提供HRP的底物: DAB、TMB和ABTS等。以及AP常用底物pNPP、BCIP/NBT/4CN等。

如果你对上述底物产品及相关技术信息感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的最优产品和解决方案,或索取相关手册和资料。我们会为您做的更多!

HRP标记抗体/蛋白试剂盒—SureLINK™ HRP Conjugation Kit

辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP),通常来源于辣根,是临床检验试剂中的常用酶。该产品广泛运用于酶联(ELISA)、Western Bloting以及免疫组化技术等。过氧化物酶作为多个试剂盒显色体系的关键成分,对试剂盒的质量有重要影响。辣根过氧化物酶比活性高,稳定,分子量小,纯酶容易制备,所以经常被用于抗体或其他蛋白质的标记,而不会影响偶联蛋白的活性和功能。HRP由多个同功酶组成,分子量为40kDa,是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,糖含量18%。

辣根过氧化物酶HRP上的糖羟基可以被高碘酸钠(NaPIO4)激活生成醛基,这些醛基能通过Schiff碱与蛋白中的氨基偶联,紧接着还原Schiff碱形成稳定的偶联产物。这种HRP偶联标记方法已经被广泛认可,但是也存在一定HRP标记抗体/蛋白试剂盒—SureLINK™ HRP Conjugation Kit的缺陷,特别是去除过量高碘酸钠(NaPIO4)的过程较为繁琐。需要注意的是,被高碘酸钠(NaPIO4)激活的HRP很不稳定,其酶活力会在几天内丢失。

SureLINK HRP Conjugation Kits HRP偶联标记试剂盒内提供了即用型的组分,能在90分钟制备完成标记HRP的抗体或蛋白。制备好的HRP标记的抗体或蛋白能在4℃稳定保存至少半年。试剂盒内包括SureLINK Activated HRP(干粉)、HRP偶联缓冲液、还原试剂以及HRP储存缓冲液。该HRP偶联标记试剂盒每次能标记50 μg-1 mg的抗体,特别适合于HRP单克隆抗体的制备。经SureLINK HRP Conjugation Kits HRP标记试剂盒标记的抗体,结合相应的显色或化学发光底物,可应用于ELISA、WB及免疫组化等方法的免疫学检测及定量分析。

SureLINK™ HRP标记抗体/蛋白试剂盒具有以下优点:

  • 方便快速:两步反应(见右),近两个小时(20分钟手动工作)就可以完成整个交联反应;
  • 活性强:可以标记从0.05mg到1.5mg范围的抗体(蛋白);
  • 通用性:可以用于下游各种免疫检测实验,比如ELISA, Western blotting和免疫组化
产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
SureLINK HRP Conjugation Kit 84-00-01 6 x 0.1 mg rxn.
84-00-02 6 x 1.0 mg rxn.
84-00-03 2 x 0.1 mg rxn.
产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
SureLINK Activated HRP 84-01-01 0.3mg包装
84-01-02 1.5mg包装

除了完整的HRP标记抗体/蛋白试剂盒,还有单独组分的SureLINK Activated HRP(干粉状的激活HRP)提供。

作为美国最早实现亲和素纯化二抗商业化的生物公司,同时也是世界上较大的二抗和底物显色系统的生产商。 KPL一直提供高质量的用于分子生物学、免疫学、细胞生物学和体外诊断试剂及用于蛋白和核酸检测的试剂盒。针对于蛋白标记以及蛋白偶联,KPL有HRP及AP标记及偶联试剂盒,还有专门用于两个蛋白质之间的偶联试剂盒提供。另外还有多种化学发光和显色底物及相关产品,以及全系列针对不同种属的各种标记的现货二抗。如果您对KPL的产品感兴趣,请致电021-50837765 到上海金畔生物科技有限公司免费索取相关产品资料,或者问询您所感兴趣的产品类型。