Neidhardt MOPS 最小培养基概述

Neidhardt MOPS 最小培养基概述

NEIDHARDT MOPS MINIMAL MEDIUM是一种丰富的成分确定培养基,可实现可重复的高生长速率。

Neidhardt MOPS 基本培养基支持大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌和其他类型肠杆菌的生长,其生长速度和产量与传统培养基(如复合 LB 培养基和成分确定的 M9 培养基)相当。

ForMedium Ltd 提供的 Neidhardt 培养基与 Neidhardt 等人定义的培养基略有不同。 Blattner 等人进行了修改。

Neidhardt MOPS 最小培养基是一种丰富的成分确定培养基,可实现可重复的高生长速率。

所有成分的浓度均已确定并且可以独立增加。我们还可以提供定制的 Neidhardt MOPS 基本培养基,其中某些成分的浓度发生变化。

Neidhardt MOPS 基本培养基的成分

  • 所有微量营养素(例如铜、锰等)的水平均设定为生长饱和的水平,但也足够低以确保不存在生长抑制的可能性。

  • 磷酸盐、硫酸盐、氮等常量元素的含量足够低,足以进行同位素标记。

  • 镁离子和钙离子的浓度均适合支持外膜稳定性,因为大肠杆菌需要大量 Mg2+ 和 Ca2+ 来桥接其外膜中带高负电荷的 LPS 分子。

  • 缓冲能力由吗啉代丙烷磺酸 MOPS(pKa 7.2)提供。

  • MOPS 是 GOOD 缓冲液系列的一员,具有出色的缓冲能力,且对生长没有任何明显的抑制作用。

  • 在 Neidhardt MOPS 基本培养基中,葡萄糖被用作碳源。 Neidhardt 基础盐混合物与 Neidhardt 补充剂混合物结合使用,以含 2 g/l 葡萄糖的基础盐混合物和含 20 g/l 葡萄糖的基础盐混合物形式提供。

  • Neidhardt MOPS 最小是通过将 Neidhardt 基础盐混合物和 Neidhardt 补充剂混合物混合在一起制备的。

Neidhardt 基础盐混合物包含所有微量盐和大量盐、缓冲液和葡萄糖。 Neidhardt 补充剂混合物含有所有氨基酸、维生素、嘌呤和嘧啶:
Neidhardt 基础盐混合物;含有所有微量和大量盐、缓冲液和葡萄糖。
Neidhardt 补充混合物;含有所有氨基酸、维生素、嘌呤和嘧啶。

VitroGel 水凝胶如何进行凝胶化?

VitroGel 水凝胶如何进行凝胶化?

在室温下自信地工作。 VitroGel 水凝胶聚合不依赖于温度,也不需要交联剂。

第一阶段:
 
VitroGel 溶液在室温下稳定且自由流动。通过将 VitroGel 溶液与细胞培养基混合来开始水凝胶的凝胶化/形成。水凝胶分子与细胞培养基中的离子分子(例如 Ca2+ 和 Na+)相互作用,形成基质结构(水凝胶)。
 
当使用少量离子分子时,水凝胶形成过程很慢。此阶段的水凝胶是柔软的,具有剪切稀化和快速恢复的机械性能,这使得水凝胶易于转移到培养板或用于注射。


第二阶段:

 
软水凝胶形成后,在水凝胶顶部添加额外的细胞培养基将使更多离子分子渗透到水凝胶基质中并进一步使水凝胶交联饱和。在此过程中会形成固体水凝胶。

细胞培养的最佳营养物质和生长因子是什么?

细胞培养的最佳营养物质和生长因子是什么?

哪种营养素/生长因子更适合我的细胞培养?

细胞培养是一种不断发展的实践,对再生医学产生巨大影响。细胞培养过程依赖于对影响培养结果的培养条件的精确调整。每种细胞类型都需要一组特定的信号才能有效生长。此外,所有细胞类型都需要基本营养物质和培养基成分。因此,一些培养基成分是通用的,而另一些则根据细胞类型而特定。

维持细胞增殖的通用培养基成分

这是维持细胞增殖的通用培养基成分列表。

  • 能量:来自碳水化合物或糖,是维持细胞新陈代谢所必需的。

  • 必需金属和矿物质:例如钙、镁、铁和其他微量金属是调节代谢途径和细胞过程所必需的。

  • 缓冲剂:磷酸盐、醋酸盐和柠檬酸盐维持 pH 水平,中和代谢活动产生的酸化。

  • 营养素:由维持细胞途径和信号传导所需的蛋白质(或其组成部分:肽和氨基酸)或生长因子组成。培养基的这种成分根据细胞类型而变化,并且可以根据特定需要进行定制。下面概述了一些主要细胞类型及其所需营养的详细信息。

培养基还可能含有其他成分,例如 pH 变化指示剂、选择性抗菌剂和促进细胞培养实践的胶凝剂。虽然这些培养基成分不直接影响细胞增殖,但会影响细胞培养性能。

诱导多能干细胞 (iPSC) 和成纤维细胞生长因子 2 (FGF2)

多能干细胞

多能干细胞可以自我更新,并且可以分化成几乎任何其他细胞类型,包括神经元、心血管细胞、肝细胞、上皮细胞等。iPSC是一种特定的干细胞类型,是通过将体细胞重编程为多能干细胞状态而产生的。生长因子影响 iPSC 的增殖或分化行为。 FGF2 发出 iPSC 作为未分化细胞增殖的信号。

FGF生长因子

FGF2调节丝裂原激活蛋白激酶 (MAPK)/细胞外信号调节激酶 (ERK) 通路 [ 2 ],这些通路对于细胞信号级联反应至关重要,包括调节细胞增殖和分化的信号级联反应。 FGF2 减少自发分化,从而维持可无限扩增的 iPSC 培养物。因此,FGF2 是维持 iPSC 培养的关键生长因子。

神经元细胞、脑源性神经营养因子 (BDNF) 和胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)

神经元干细胞

神经元是一种重要的细胞类型,可以发送信息来控制整个身体的基本功能。神经元通常存在于脑组织中,可以由干细胞产生。多能细胞首先分化为神经祖细胞(NPC),进一步分化为神经元。 iPSC 衍生的 NPC 随后可用于构建 3D 结构图案,例如大脑类器官。生长因子信号传导维持神经元生长并指导生成的神经元类型。 BDNF 和 GDNF 是神经元分化和增殖的两种关键生长因子。

BDNF生长因子

BDNF激活多种途径,包括 MAPK、磷脂酶 Cy 和磷脂酰肌醇 3 激酶途径,调节神经元存活和分化所需的蛋白质转录。 [ 3 ]。 BDNF 促进神经元存活、轴突伸长和分支、树突棘形成和神经元可塑性。

GDNF生长因子

GDNF激活促进细胞增殖的通路,包括 MAPK、磷酸肌醇 3-激酶、ERK 和 ATK 通路 [ 4 ]。 GDNF 促进多巴胺能神经元、运动神经元和皮质神经元的存活,并增强背根神经节的轴突伸长和分支。

BDNF、GDNF、iPSC 和 NPC

BDNF 和 GDNF 用于将 iPSC 和 NPC 分化为神经元并维持高质量的后代。这些生长因子还可用于维持 3D 神经元类器官并显着驱动类器官图案化。

视网膜色素上皮 (RPE) 细胞、FGF2 和表皮生长因子 (EGF)

视网膜色素上皮干细胞

RPE 细胞是在眼睛感光层后面发现的单层细胞。它们执行许多支持神经元视网膜上的感光细胞的功能,包括类维生素A的转换和储存、散射光的吸收、微环境的维持和营养的提供[ 5 ]。 RPE 细胞以单层形式生长,一旦生长填满其边界区域,就可以长时间保持静止状态。这使得 RPE 细胞能够承受高压力条件。

FGF2 和 EGF 生长因子

FGF2通过上述 iPSC 途径促进 RPE 细胞增殖。EGF激活多种途径,包括 ERK MAPK、AKT-PI3K 和 PLC-γ1-PKC 途径,调节增殖并防止不必要的细胞凋亡 [ 6 ]。这使得 EGF 能够确保 RPE 细胞在静止期存活。 FGF2 和 EGF 是维持 RPE 细胞并为其生长创造压力最小的环境的关键生长因子。在特定条件下生长的 RPE 细胞现在被移植以治疗黄斑变性。

细胞基本操作和细胞复苏简介

细胞基本操作和细胞复苏简介

细胞基本操作

● 细胞复苏

● 细胞密度判断及换液

● 为什么需要细胞传代

● 细胞冻存注意事项

● 常见细胞污染及处理

 

 

细胞复苏

准备工作——操作台消毒洁净,预热培养基,准备培养瓶及离心管

解冻细胞及离心——从液氮/-80冰箱取出细胞,迅速转移到37°C水浴锅中,浸没深度应超过冻存物 ,并持续摇晃直至无冻块。酒精棉球擦拭冻存管后移入操作台。向冻存管中加入1ml预热培养基,轻轻吹打,转移所有液体至离心管。常温800g离心5分钟

接种及培养——弃去上清,使用预热的培养基重悬细胞至培养瓶,立即放入培养箱。

角质形成细胞生长培养基 简介

角质形成细胞生长培养基 简介

角质形成细胞生长培养基2——用于表皮角质形成细胞的无血清细胞培养基。

PromoCell 角质形成细胞生长培养基 2 是一种无血清培养基,专为培养不含饲养细胞的表皮角质形成细胞而开发。

尽管所有 PromoCell 培养基都针对原代人类细胞进行了优化,但我们收到客户的反馈,这种特殊培养基在调整 CaCl2 浓度后也可用于马和猪角质形成细胞,以及小鼠和大鼠角质形成细胞。此外,它还适用于大鼠角膜角质形成细胞。

要查看该培养基与其他物种/细胞类型一起使用的参考文献列表,请单击此处

成分:

  • 生长培养基(即用型):包括基础培养基和 SupplementMix

  • 生长培养基套件:包括基础培养基和补充包

  • SupplementMix:包含预混合在一瓶中的所有培养基补充剂

  • 补充包:包含所有培养基补充品作为单独的小瓶