支原体抗生素——支原体污染的清除

   细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。

   支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,它不同于细胞,也不同于病毒。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如β-内酰胺类、万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些氟喹诺酮;其他类抗生素如氨基糖苷类、氯霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。

    很多实验室都曾遇到过细胞培养的支原体污染,也都曾试用过多种抗生素。考虑到支原体肺炎的首选药是红霉素和支原体抗生素——支原体污染的清除四环素,有实验人员试用了红霉素。红霉素确实具有一定的抑制支原体的效果。使用一段时间后,细胞状态明显好转。但红霉素不能完全根治支原体感染,停药后一段时间支原体又复发了。用四环素也遇到了类似的问题,不能根治。因为支原体对氨基甙类有中度敏感,因此这类抗生素也曾被考虑使用,其代表抗生素庆大霉素和卡那霉素对于抑制支原体的生长具有一定的效用,但是效果不是很明显,毕竟氨基甙类不能完全的抑制甚至杀灭支原体。

   实验室的主要工作抗生素不外乎以上几类,对于支原体污染的清除效果上也有限制,其实一些在兽医和医药上已经被广泛使用的支原体抗生素,可能比以上的广谱或较为广谱性的抗生素在支原体的处理上具有更好的效果,如泰妙菌素和米诺环素。泰妙菌素是一种双萜类动物专用抗生素,主要用于防治家畜家禽呼吸系统疾病和动物促生长。作为世界十大兽用抗生素之一,泰妙菌素对革兰氏阳性菌、支原体、猪胸膜肺炎放线杆菌有较强的抗菌作用,特别是支原体。而米诺环素(盐酸二甲胺四环素,美满霉素),其抗菌谱与四环素相似,但是对于支原体的抑制效果更好,一般来说,这两种抗生素的联合使用会起到很好的支原体清除效果。

   Applichem的Myco系列专门针对细胞实验室支原体污染。其Myco-1和Myco-2系列在泰妙菌素和米诺环素的基础上进行了修饰优化,进一步提高了其清除支原体的能力;同时对其联合使用的配比也进行了优化,使其比市场上的支原体清除系列具有更好的支原体清除效果,同时对细胞自身的生长代谢影响降到了最低。据一些使用者反映,其联合使用的效果比目前市场上新一代支原体专用抗生素(如Applichem的Myco-3系列)单独使用的效果更好,特别是针对顽固支原体,通过Myco-1和Myco-2的联合使用,可有效清除被污染细胞内的支原体,拯救珍贵细胞。

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