干细胞的转染

干细胞的转染

很多时候,进行细胞转染的研究人员必须进行谨慎的平衡。实现足够高的转染水平以提供可靠的结果,同时又不在此过程中杀死太多细胞,是一项持续的斗争。对于从事干细胞研究的科学家来说,这些问题更具挑战性,因为它们的转染率历来较低(通常低于5%)。 

许多科学家现在正在寻求利用干细胞进行基于CRISPR的基因编辑,以在细胞水平上对疾病产生新的理解。有一种高效可靠的方法来转染干细胞,以实现基因组编辑的新发现,这一点从未如此重要。现在非常需要针对CRISPR应用优化干细胞转染方案。允许干细胞维持其多能状态并最大限度地减少转染的细胞毒性的方案至关重要。

我们的支链两亲性肽胶囊(BAPC™)克服了脂质体载体的问题,有助于最大限度地减少转染干细胞的压力。这与诱导多能干细胞(iPSCs)尤其相关,它们对环境变化非常敏感,对压力反应不佳。

干细胞的转染

将荧光激活细胞分选 (FACS) 分选的干细胞(辐射敏感细胞)培养 6 小时,并与 BAPC 和 Atto 633 一起孵育过夜。然后用固定在 4% FFA 中的培养基洗涤细胞两次。 DMSO 处理的细胞用作阴性对照。在上图中,比例尺代表 10 微米,白色箭头代表 BAPC 阳性细胞。

Phoreus™ BAPtofect™-25 细胞转染试剂盒最大限度地减少了干细胞转染的压力。由于 BAPC 是由合成的、天然存在的肽构成的,它们是自组装的、水溶性的、对细胞无毒,并且不会触发免疫系统反应。

Phoreus目前正在与行业合作伙伴合作开发iPSC干细胞转染的新方案。 虽然这项初步工作已经成功地证明了干细胞对染色BAPC的有效吸收,但目前正在进行研究,以证明核酸的保护递送导致干细胞成功转化。这些新协议将促进CRISPR Cas-9的递送,并指导RNA用于干细胞中的基因编辑,从而在细胞水平上对疾病产生令人兴奋的新理解。