Alkaline Phosphatase Stain Solution (Modified Gomori’s Method) 碱性磷酸酶染色液(改良钙钴法)

Alkaline Phosphatase Stain Solution (Modified Gomori’s Method) 碱性磷酸酶染色液(改良钙钴法)

货号: MP7504-200ML 品牌: Jinpan 标签: 蛋白研究

描述

Alkaline Phosphatase Stain Solution (Modified Gomori’s Method)

碱性磷酸酶染色液(改良钙钴法)

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格(元)     

Alkaline Phosphatase Stain Solution (Modified Gomori’s Method)     

碱性磷酸酶染色液(改良钙钴法)

MP7504-100ML       2×50ml     752
MP7504-200ML 2×100ml 1492

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产品描述

碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP,AKP或AP)是一类磷酸酯酶,碱性条件下能够将核苷酸、蛋白、甾醇等分子去磷酸化,广泛分布于哺乳动物组织内。ALP主要存在于物质交换活跃处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮。还发现于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。

本碱性磷酸酶染色液(改良钙钴法)(Alkaline Phosphatase Stain Solution (Modified Gomori’s Method))利用的是金属沉淀法来定性检测磷酸酶活性。检测原理是以天然存在的β-甘油磷酸钠为底物,经碱性磷酸酶水解释放出磷酸,磷酸根与钙离子结合为磷酸钙沉淀,再依次被置换为磷酸钴和硫化钴,最终产物为黑色硫化钴沉淀。

产品组成

组分编号             组分名称            产品货号(规格) 保存方式            
MP7504-100ML       MP7504-200ML     
MP7504-A ALP染色液 50ml×1 100ml×1 2-8℃避光保存
MP7504-B 硝酸钴染液 50ml×1 100ml×1 RT避光保存
MP7504-C ALP硫化液 1ml×2 1ml×3 RT避光保存
MP7504-D ALP对照液 10ml×1 20ml×1 2-8℃避光保存

保存与运输方法

保存:2-8℃保存,6个月稳定。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   ALP染色液、ALP硫化液容易失效,建议开封后根据小份保存,避免重复性开盖使用,影响性能。

2)   ALP硫化液具有腐蚀性和刺激性气味,操作需小心。

3)   样本需新鲜,取材后请立即处理,否则会影响酶活性。

4)   组织固定需在4℃进行,时间不要超过24h,否则酶活性会减弱或消失。

5)   组织在石蜡包埋时,温度不要超过56℃。应使用熔点为52-54℃的石蜡进行浸染,浸蜡时间要短,否则酶活性会减弱或消失。

6)   石蜡切片脱蜡所用的二甲苯需用AR级以上的,不纯的二甲苯会分解黑色沉淀。

7)   冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。

8)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

实验前准备材料:蒸馏水,温箱或水浴锅

一、 石蜡切片染色

1.1    石蜡切片脱蜡至蒸馏水;

1.2   切片入ALP染色液,37℃孵育2~12h;

【注意:若需要做阴性对照,可选一切片入ALP对照液,该对照液不含酶的反应底物。】

1.3    流动水清洗2min,入蒸馏水;

1.4    入硝酸钴染液,37℃孵育5min;

1.5    流水洗5min,入蒸馏水;

1.6    准备ALP硫化工作液:取ALP硫化液用蒸馏水或去离子水稀释50倍,混匀即得到硫化工作液,现配现用。切片放入硫化工作液,孵育1-2min;

1.7    流水洗10min,入蒸馏水;

1.8    (可选)核固红复染细胞核,用蒸馏水洗;

1.9    石蜡切片常规脱水、透明、中性树胶封片。

二、 冰冻切片染色

2.1 冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内,4℃固定2-5min;

2.2  切片入ALP染色液,37℃孵育5-15min;

【注意:若需要做阴性对照,可选一切片入ALP对照液,该对照液不含酶的反应底物。】

2.3 流水洗2min,入蒸馏水;

2.4 入硝酸钴染液,37℃孵育5min;

2.5 流水洗5min,入蒸馏水;

2.6 准备ALP硫化工作液:取ALP硫化液用蒸馏水或去离子水稀释50倍,混匀即得到硫化工作液,现配现用。切片放入硫化工作液,孵育1-2min;

2.7    流水洗10min,入蒸馏水;

2.8    (可选)核固红复染细胞核,用蒸馏水洗;

2.9    冰冻切片用甘油明胶封片剂封片。

三、 染色结果

阳性部位                黑色硫化钴沉淀          
细胞核 红色(核固红)

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规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

2×100ml

货期:

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