Rosetta (DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

Rosetta (DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

货号: MF2333-1000UL 品牌: Jinpan 标签: 分子生物学

描述

Rosetta (DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞

 

产品标签:

BL21 (DE3);Rosetta (DE3);Rosetta (DE3);表达感受态细胞;pET表达载体;IPTG诱导;

 

产品订购:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-50837765 。

货号 产品名称 规格 价格(元)   
MF2333-1000UL     Rosetta (DE3) Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞    10×100μl         280
MF2333-5000UL Rosetta (DE3) Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 50×100μl 1280

【好消息】:见我司的感受态细胞促销活动。买感受态细胞得京东卡,发表使用评论,赢红包,双重惊喜,行动起来啦。

 

产品组分:

组分编号           组分名称

货号(规格)

MF2333-1000UL        MF2333-5000UL      
MF2333-A Rosetta (DE3) Competent Cell            10×100μl 50×100μl
MF2333-B Control Plasmid puC19, 0.1ng/μl 10μl 10μl

 

菌株描述

Rosetta宿主菌是BL21衍生菌,特别设计用于提高含大肠杆菌稀有密码子的真核蛋白的表达水平,这些菌株补充6种大肠杆菌缺乏的稀有密码子(AGG, AGA, AUA, CUA, CCC, GGA)对应的tRNA,位于兼容的氯霉素抗性质粒上,正因如此,Rosetta菌株提供“通用型”的翻译特征,而不限于大肠杆菌可利用的密码子。tRNA基因由天然启动子所启动。DE3命名表明该菌株染色体上整合λ噬菌体DE3溶原体(携带lacUV5启动子调控的T7 RNA聚合酶基因)。这种菌株适用于目的基因克隆在pET载体上的蛋白生产,由IPTG诱导表达。

Rosetta (DE3)菌株基因型:F-ompThsdSB(rB-mB-)galdcm(DE3)pRARE(CamR)

产品描述

本品是大肠杆菌Rosetta (DE3)菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达107 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,六个月有效。

运输:干冰运输。

 

注意事项

1)   感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存,不可反复冻融且放置时间过长,否则会减低感受态细胞的转化效率。

2)   最好在冰上融化感受态细胞。

3)   进行转化操作时,需在相应温度及无菌条件下进行。

4)   为防止转化实验不成功,可保留部分连接反应液以重新转化,将损失降到最低。

5)   产品包装内含质粒pUC19 DNA(0.1ng/μl),供对照实验用。

6)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1)   取感受态细胞置于冰浴中,如需分装可将刚刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管内,置于冰浴中。【注意:一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl,可以根据实际情况分装使用。需注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。】

以下实验以50 μl感受态细胞为例。

2)   待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴静置30min。

3)   42℃热击45s,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min。此过程不要摇动离心管。

4)   向每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃ 摇床,150 rpm振荡培养45min,目的使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。

5)   根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于室温(或37℃)直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16h。

【注意】:

a)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;反之,若转化的DNA总量较少,可取200-300 μl转化产物涂布平板。若预计的克隆较少,可通过离心(4,000 rpm,2min)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。

b)新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。c)涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

相关产品

货号 名称 规格             
MF2331-1000UL       BL21 (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2332-1000UL BL21 (DE3) pLysS Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2333-1000UL Rosetta (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2334-1000UL BL21 Star (DE3) Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2335-1000UL BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell大肠杆菌感受态细胞    10×100μl
JP0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
JP0018-10G Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 10g
JP0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
JP0023-25G Streptomycin Sulfate, USP Grade硫酸链霉素 25g
JP0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
JP0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g

 

 

 

规格信息

品牌:

Jinpan

CAS:

N/A

规格:

10×100μl

货期:

咨询客服