吖啶橙Acridine orange

(一)   定义:可与核酸亲和的荧光活体染料。荧光显微镜下核呈绿色,细胞质呈黄色。

(二)   检测激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm。

(三)   作用以及作用机理:a. 区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞

作用机理:它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光,与DNA结合发绿色荧光,与RNA结合发桔黄色或桔红色荧光。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。因此,在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染,因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞.

细胞形态

染色结果

正常细胞

绿色或黄绿色均匀荧光

凋亡细胞

致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒

坏死细胞

黄荧光减弱甚至消失(吖啶橙)或者是桔黄色荧光(EB和吖啶橙一起)

b 用作移码突变的诱变剂

吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色测定PC12细胞凋亡

(1)细胞爬片:在6孔培养板中预先置入玻璃盖玻片,接种细胞悬液,置干后,予95%乙醇固定15分钟,微干,然后准备荧光染色。将吖啶橙5ul(100mg/L)和EB 5μl (100mg/L),在照相前混匀后加入,轻轻吹打,30秒后用激光共聚焦显微镜观察照相。计取5个视野,共100个细胞中凋亡细胞百分数。

(2)如制成细胞悬液:取100μl PBS稀释的细胞悬液,加2μl的染色液,其中AO/EB,各含100μg/ml,加入染料30秒后观察摄像。

上海金畔代理的Applichem的吖啶橙为您提供以下规格,欢迎垂询!

货号

品名

规格

A1398_0010

Acridine orange (C.I. 46005)

10g

A1398_0025

Acridine orange (C.I. 46005)

25g

A1398_0100

Acridine orange (C.I. 46005)

100g