透明室 用于组织透明化样品的成像室

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用于组织透明化样品的成像室透明室                              用于组织透明化样品的成像室

透明室

透明室                              用于组织透明化样品的成像室

透明室是在使用显微镜观察组织透明化样品时使用的观察容器。透明室由10套硅橡胶板、盖玻片和载玻片组成,它能让您轻松地观察组织透明化后的样品。其中有五种厚度的硅橡胶可供作垫片,分别为0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm,可根据您的样品选择所需尺寸。

硅橡胶板的两侧贴有保护膜,可在使用时剥离,从而使载玻片与盖玻片紧密接触。

透明室                              用于组织透明化样品的成像室

◆透明化工序(使用SeeDB时)


1. 在4°C下用4%多聚甲醛/ PBS固定小鼠大脑,过夜。

2. 用PBS清洗3次样品(各10 min)。

3. 将样品放入装有20 mL SeeDB:20 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中。在室温下,用旋转器旋转试管

3. 4~8 h(月4 rpm)。易损的样品和切片可使用跷跷板振荡摇床。(约17 rpm)。

4. 将样品转移至装有SeeDB:40 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转4~8 h。

5. 将样品转移至装有SeeDB:60 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转4~8 h。

6. 将样品转移至装有SeeDB:80 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转12 h。

7. 将样品转移至装有SeeDB:100 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转12 h。

8. 将样品转移至装有SeeDB的50 mL锥形管中,室温下旋转24 h。


透明室                              用于组织透明化样品的成像室

图1. 使用SeeDB的生物体样品的透明化


从左至右分别为使用SeeDB透明化处理的小鼠胎儿(胎儿12天),新生小鼠(生后3天)的全脑,成年小鼠大脑切片(8周龄,厚度2 mm)的案例。

◆安装方法


1. 使用与样品尺寸相匹配的透明室

2. 使用SeeDB时,请使用SeeDB液安装样品。

*若样品较小,观察时会移动的话可使用琼脂糖凝胶等固定样品。

透明室                              用于组织透明化样品的成像室

◆观察


1. 使用激光共聚焦显微镜或双光子激发显微镜观察SeeDB处理的大脑样品。

透明室                              用于组织透明化样品的成像室

*使用SeeDB透明化处理的样品的折射率较高,为1.49。因此虽然适用于甘油浸没透镜,油浸透镜以及透明化用透镜,但是水浸透镜的

*使用深度只达约2 mm。浸泡液请使用各厂商推荐的浸泡液。请不要使用SeeDB液作为浸泡液。使用空气物镜(折射率1.0)或水浸物

*镜(折射率1.33)获得图像时,深度的数值需进行校正。(校正公式请参阅参考文献)。

◆观察实例


透明室                              用于组织透明化样品的成像室

图2. 使用双光子激发显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠(10周龄)大脑荧光图像

透明室                              用于组织透明化样品的成像室

图3. 使用共焦距显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠(10周龄)大脑荧光图像

◆产品列表

产品编号

产品名称

产品规格

产品等级

294-35631

See Through Chamber, 0.3 mm thick
透明室,0.3 mm厚

10 set

Tissue Optical Clearing Reagent

291-35641

See Through Chamber, 0.5 mm thick
透明室,0.5 mm厚

10 set

Tissue Optical Clearing Reagent

295-35661

See Through Chamber, 1.0 mm thick
透明室,1.0 mm厚

10 set

Tissue Optical Clearing Reagent

292-35671

See Through Chamber, 2.0 mm thick
透明室,2.0 mm厚

10 set

Tissue Optical Clearing Reagent

299-35681

See Through Chamber, 3.0 mm thick
透明室,3.0 mm厚

10 set

Tissue Optical Clearing Reagent



◆相关产品


产品编号

产品名称

包装

规格

291-79601

SeeDB Trial Kit
SeeDB实验试剂盒

1 kit

组织透明化

193-18391

SeeDB:20w/v% Fructose Solution
SeeDB:20w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

196-18401

SeeDB:40w/v% Fructose Solution
SeeDB:40w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

193-18411

SeeDB:60w/v% Fructose Solution
SeeDB:60w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

190-18421

SeeDB:80w/v% Fructose Solution
SeeDB:80w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

197-18431

SeeDB:100w/v% Fructose Solution
SeeDB:100w/v% 果糖溶液

250 mL

组织透明化

194-18441

SeeDB
深层透明化试剂

250 mL

组织透明化

160-16061

Paraformaldehyde
多聚甲醛

100 g

组织固定用

162-16065

500 g

164-25511

1×PBS(-)
1×PBS(-)平衡缓冲液

5 L

生化学用

045-33421

DiIC18(3)
细胞膜橙红色荧光探针

10 mg

细胞生物学用

041-33423

50 mg

参考文献



1)Ke, M. T., Fujimoto, S. and Imai, T. : Nat Neurosci ,6 (8),1154 (2013).

2)Ke, M. T., Fujimoto, S. and Imai, T.: Bio-protocol 4(3), e1042 (2014).

3)Ke, M. T., and Imai, T. : Curr Protoc Neurosci ,66,2.22.1-2.22.19 (2014).

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
294-35631  See Through Chamber, 0.3mm thick
透明室,0.3mm厚 
10 set Tissue Optical Clearing Reagent
291-35641  See Through Chamber, 0.5mm thick
透明室,0.5mm厚 
10 set Tissue Optical Clearing Reagent
295-35661  See Through Chamber, 1.0mm thick
透明室,1.0mm厚 
10 set Tissue Optical Clearing Reagent
292-35671  See Through Chamber, 2.0mm thick
透明室,2.0mm厚 
10 set Tissue Optical Clearing Reagent
299-35681  See Through Chamber, 3.0mm thick
透明室,3.0mm厚 
10 set Tissue Optical Clearing Reagent