亲和标签抗体系列 重组蛋白纯化检测用

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

亲和标签抗体系列                              重组蛋白纯化检测用

重组蛋白纯化检测用

亲和标签抗体系列

亲和标签抗体系列                              重组蛋白纯化检测用

亲和标签抗体系列                              重组蛋白纯化检测用

  和光为您准备了DYKDDDDK, 6×His, GFP, HA, MBP, c-Myc, GST,V5融合蛋白提纯、检测用抗体及珠。
  另外,和光还准备了上述各样品的试用装,您可向当地代理商索取。

  

◆DYK标签:DYKDDDDK


  DYK标签是识别DYKDDDDK肽的单抗。可用于检测大肠杆菌、酵母、哺乳动物中的DYKDDDDK标签融合蛋白。

  

亲和标签抗体系列                              重组蛋白纯化检测用


数据提供: 
鹿儿岛大学研究生院医疗牙科综合研究科 附属顽固病毒病理控制研究中心 分子病毒感染研究领域 草野秀一老师

将表达3×DYKDDDDK标签融合蛋白A的质粒转染至HEK293细胞株中,经过24小时培养后,随机选取其中的克隆细胞。将选取的克隆细胞用RIPA缓冲液进行溶解,对所得的细胞溶解液用Western Blot法检测,可检测出3×FLAG标签融合蛋白。

分别用Wako(克隆号 1E6)(产品编号:018-22381)抗体和A公司抗体进行Western Blot检测。

与A公司抗体相比,Wako(克隆号 1E6)抗体识别DYKDDDDK的特异性更高。

 


A公司产品和Wako产品在Western Blot检测中的灵敏度比较


亲和标签抗体系列                              重组蛋白纯化检测用

Lane 1: 293T细胞溶解液
Lane 2: 瞬时表达蛋白A-DYKDDDDK的293T细胞溶解液
Lane 3: 瞬时表达蛋白B-DYKDDDDK的293T細胞溶解液
封闭:含5%脱脂奶的TBS-T、4℃,一晚

抗体反应:2小时、室温
发光剂:ImmunoStar® LD
检测:LAS-3000、曝光时间15分

Wako 1E6-HRP比A公司产品有更高的灵敏度!!

 


产品名称

子类克隆号

适用实验

规格

产品编号

包装

单抗

抗DYKDDDDK标签,单抗

Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal Antibody

小鼠IgG2b   1E6

WB,IP,FCM,ChIP

免疫化学用

018-22381

200 μg

014-22383

1 mg

012-22384

5 mg

抗DYKDDDDK标签,单抗

Anti DYKDDDDK tag,Monoclonal Antibody,Rat

大鼠IgG1   6F7

WB,IP,ELISA,IHC,FCM

免疫化学用

018-23621

200 μg

012-23624

1 mg

HRP标签单抗

抗DYKDDDDK标签,单抗,过氧化酶结合

Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated

小鼠IgG2b   1E6

WB

免疫化学用

015-22391

200 μL

019-22394

1 mL

◆6×His标签:HHHHHH (6×组氨酸)


  可用于检测His(6×组氨酸)标签融合蛋白。克隆不同,识别端的特异性、应用也有所不同。


亲和标签抗体系列                              重组蛋白纯化检测用

克隆号

识别端

Western blot

Immunoprecipitation

ELISA

产品编号

N端

C端

N端

C端

9F2

C端

ND

+++++

ND

++

010-21861

9C11

N・C端

+++++

++++

+++++

++

011-23091

21-48

N・C端

+++

++++

+++

+++

017-23211

28-75

N・C端

++

++

+++++

+++++

014-23221

9F2

C端

ND

+++++

013-23171

9C11

N・C端

+++++

++++

010-23181

B公司产品和Wako产品各克隆号的Western blot检测功能比较


亲和标签抗体系列                              重组蛋白纯化检测用

N端His:HEK293T表达的6×His-

ProteinZ, 1×105 cells
C
端His:Protein P-6×His+CHO细胞溶解液, 1×105 cells

一抗:1 μg/mL
二抗:抗小鼠IgG抗体, 5000倍稀释液
可确认其具有比B公司产品同等甚至更高的
灵敏度。

 


6×His tag抗体 选购指南


  • N端的检测中,最强的克隆号是什么?
    WB:9C11 IP: 9C11, 28-75

  • C端的检测中,最强的克隆号是什么
    WB:9F2 IP:28-75

  • 适用于WB检测中,识别N/C端的克隆号是什么?
    9C11

  • 适用于IP检测中,识别N/C端的克隆号是什么?
    28-75

  • 可灵活应用于WB/IP的万能型克隆号是哪个?
    21-48

  • 适用于WB检测的克隆号是哪个?
    9C11

  • 适用于IP检测的克隆号是哪个?
    28-75

  • 只识别C端的性价比较高的克隆号是哪个?
    9F2

 


产品名称

子类

克隆号

适用实验

规格

产品编号

包装

单抗

抗6×组氨酸,单抗

Anti 6×His,Monoclonal Antibody(9F2)

小鼠IgG1
  9F2

WB,IP

免疫化学用

010-21861

200 μg

014-21864

1 mg

010-21866

5 mg

抗6×组氨酸,单抗

Anti 6×His,Monoclonal Antibody(9C11)

小鼠IgG1   9C11

WB,IP,ELISA

免疫化学用

011-23091

200 μg

015-23094

1 mg

011-23096

5 mg

抗6×组氨酸,单抗

Anti 6×His,Monoclonal Antibody(21-28)

小鼠IgG1・κ
  21-48

WB,IP,ELISA

免疫化学用

017-23211

200 μg

011-23214

1 mg

抗6×组氨酸,单抗

Anti 6×His,Monoclonal Antibody(28-75)

小鼠IgG3・κ
  28-75

WB,IP,ELISA

免疫化学用

014-23221

200 μg

018-23224

1 mg

HRP标签单抗

抗6×组氨酸,单抗,过氧化酶结合

Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9F2), Peroxidase Conjugated

小鼠IgG1   9F2

WB

免疫化学用

013-23171

100 μL

017-23174

500 μL

抗6×组氨酸,单抗,过氧化酶结合

Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9C11), Peroxidase   Conjugated

小鼠IgG1   9C11

WB

免疫化学用

010-23181

100 μL

014-23184

500 μL

◆GFP tag: Green Fluorescent Protein (GFP)


  可识别Green Fluorescent Protein (GFP)抗体。GFP是可实时检测目标蛋白局部或细胞、细胞器中的标签蛋白,可应用于各个领域。


产品名称

子类
  克隆号

适用实验

规格

产品编号

包装

单抗及多抗

抗绿色荧光蛋白,单抗

Anti Green Fluorescent Protein, Monoclonal Antibody (Anti GFP, MoAb)

小鼠IgG2a・κ
  mFX73

IP, IHC

免疫化学用

012-20461

100 μL

018-20463

100 μL×5

抗绿色荧光蛋白,单抗

Anti GFP,MoAb(mF×75)

小鼠IgG2a・κ
  mFX75

WB

免疫化学用

012-22541

100 μL

抗绿色荧光蛋白,多抗 IS,兔

Anti Green Fluorescent Protein,Rabbit Polyclonal IS

WB, IHC

免疫化学用

013-23811

20 μg

◆HA tag:YPYDVPDYA


  血凝素(HA)来源(98-106 aa)的多肽:抗YPYDVPDYA单抗。

 

产品名称

子类
  克隆号

适用

实验

规格

产品编号

容量

单抗

抗血凝素, 单抗

Anti HA,MoAb

小鼠IgG2b   4B2

WB, IP

免疫化学用

014-21881

200 μg

018-21884

1 mg

014-21886

5 mg

HRP标签单抗

抗血凝素, 单抗,过氧化酶结合

Anti Hemagglutinin,Monoclonal Antibody, Peroxidase   Conjugated

小鼠IgG2b   4B2

WB

免疫化学用

011-21911

100 μL

015-21914

500 μL

 


参考数据


 抗绿色荧光蛋白, 单抗(012-22541
 抗体浓度:1 μg/mL
 抗原量:将100 μL表达GFP重组蛋白的大肠杆菌溶解液进行10倍稀释,并取

    10 μL进行电泳操作
 用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。
 
 抗血凝素,单抗(
014-21881

 抗体浓度:0.5 μg/mL
 抗原量:对5 ng HA标签重组蛋白进行电泳操作
 用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。  

亲和标签抗体系列                              重组蛋白纯化检测用

◆MBP tag:Maltose Binding Protein


  可识别Maltose-binding Protein (MBP)单抗。MBP是对麦芽糖、麦芽糊精具有结合性的蛋白,具有通过与目的蛋白融合,提高表达蛋白可溶性的特点,可简便纯化、检测重组蛋白。


产品名称

子类
  克隆号

适用实验

规格

产品编号

包装

单抗

抗麦芽糖结合蛋白,单抗

Anti MBP, Monoclonal Antibody,   Rat

大鼠IgG2b

TMab-2

ELISA, WB

免疫化学用

016-24141

200 μg

◆c-Myc标签:EQKLISEEDL


  可识别人c-Myc 来源(410-419aa)多肽EQKLISEEDL单抗。

 

产品名称

子类
  克隆号

适用实验

规格

产品编号

包装

单抗

抗c-Myc,单抗

ANTI c-Myc, Monoclonal Antibody

小鼠IgG1

9E10

WB, IP

免疫化学用

017-21871

200 μg

011-21874

1 mg

017-21876

5 mg

抗c-Myc,单抗

Anti c-Myc, Monoclonal Antibody (10D11)

小鼠IgG1

10D11

WB, IP

免疫化学用

017-26511

20 μg

013-26513

200 μg

011-26514

1 mg

HRP标签单抗

抗c-Myc, 单抗,过氧化酶结合

Anti c-Myc,MoAb, Peroxidase Conjugated

小鼠IgG1

9E10

WB

免疫化学用

014-21901

100 μL

018-21904

500 μL

抗c-Myc, 单抗,过氧化酶结合

Anti c-Myc, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated (10D11)

小鼠IgG1

10D11

WB

免疫化学用

014-26521

10 μL

010-26523

100μL

018-26524

500 μL



◆GST标签:Glutathione-S-transferase


  可识别Glutathione S-transferase(GST)单抗。

 

产品名称

子类
  克隆号

适用实验

规格

产品编号

包装

单抗

抗谷胱甘肽 S-转移酶,单抗

Anti Glutathione S-transferase, Monoclonal Antibody

小鼠IgG2b
  5A7

WB, IP

免疫化学用

013-21851

200 μg

017-21854

1 mg

013-21856

5 mg

HRP标签单抗

抗谷胱甘肽 S-转移酶,单抗,过氧化酶结合

Anti Glutathione S-transferse,Monoclonal Antibody, HRP Conjugated

小鼠IgG2b   5A7

WB

免疫化学用

011-21891

100 μL

015-21894

500 μL

 


参考数据


抗c-Myc, 单抗(017-21871
抗体浓度:0.25 μg/mL
抗原量:对10 ng c-Myc标签重组蛋白进行电泳操作。
用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。
 
 抗谷胱甘肽 S-转移酶, 单抗(
013-21851
 抗体浓度:1.0 μg/mL
 抗原量:将100 μL表达GTS标签重组蛋白的大肠杆菌溶解液进行10倍稀释,

     并取10 μL进行电泳操作。
  用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。

亲和标签抗体系列                              重组蛋白纯化检测用

◆V5 tag:GKPIPNPLLGLDST


  可识别多肽GKPIPNPLLGLDST单抗。

 

产品名称

子类
  克隆号

适用实验

规格

产品编号

包装

单抗

抗V5 tag, 单抗

Anti V5 tag, Monoclonal Antibody(6F5)

小鼠IgG2a
  6F5

WB, IP

免疫化学用

011-23591

200 μg

015-23594

1 mg

011-23596

5 mg

HRP标签单抗

抗V5tag,单抗,过氧化酶结合

Anti V5 tag, Monoclonal Antibody(6F5), Peroxidase Conjugated

小鼠IgG2a

6F5

WB

免疫化学用

019-24371

100 μL

 

◆相关产品


内参照

下表为Western Blot实验中参照用单抗一览表。


产品名称

规格

产品编号

包装

抗β肌动蛋白单抗
  Anti β-Actin, Monoclonal Antibody

免疫化学用

013-24553

200 μg

011-24554

1 mg

017-24556

5 mg

抗β肌动蛋白单抗,过氧化物酶标记

Anti β-Actin, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated

免疫化学用

017-24573

200 μL

抗α-微管蛋白,单抗

Anti α-Tubulin, Monoclonal Antibody

免疫化学用

011-25034

10 μg

017-25031

200 μg

013-25033

1 mg

抗β-微管蛋白,单抗

Anti β-Tubulin, Monoclonal Antibody

免疫化学用

018-25044

10 μg

014-25041

200 μg

010-25043

1 mg

抗GAPDH,单抗

Anti GAPDH, Monoclonal Antibody

免疫化学用

016-25523

200 μg

014-25524

1 mg

010-25526

5 mg

  抗GAPDH,单抗,过氧化酶结合

Anti GAPDH, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated

免疫化学用

015-25473

200 μL

 


蛋白酶抑制剂系列


产品名称

规格

产品编号

包装

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 I,无动物源成分(通用型)

Protease Inhibitor Cocktail Set I, Animal-derived-free (for general use) (×100), Lyophilized

通用型

165-26021

1 mL用

161-26023

1 mL用×5

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒III,DMSO溶液(不含EDTA)(×100)
  Protease Inhibitor Cocktail Set III, DMSO Solution (EDTA free) (×100)

动物细胞

163-26061

1 mL

169-26063

1 mL×5

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒V(无EDTA)(×100)
  Protease Inhibitor Cocktail Set V (EDTA free) (×100), Lyophilized

2D电泳

162-26031

1 mL

168-26033

1 mL×5

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 VI,DMSO溶液,用于植物(×100)
  Protease Inhibitor Cocktail Set VI, DMSO Solution (for Plant) (×100)

植物细胞

164-26091

1 mL

160-26093

1 mL×5

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒VII,DMSO溶液,组氨酸标签蛋白(×100)
  Protease Inhibitor Cocktail Set VII, DMSO Solution (for Histidine-tagged Protein) (×100)

His Tag 纯化

167-26101

1 mL

163-26103

1 mL×5

亲和标签比较表

亲和标签

TARGET

PA

6xHis

氨基酸序列

(YPGQ)5V

GVAMPGAEDDVV

HHHHHH

残基数

21

12

6

分子量 (kDa)

2.34

1.16

0.84

等电点(pI)

5.52

3.49

7.21

配体

TARGET tag

PA tag

Ni, Co, Zn, Cu

亲和珠回收

40% Propyleneglycol,
  1×TBS(pH7.5)

3M MgCl2, MES(pH6.0)

0.5M Imididazole(pH7.4)

单抗边界强度

(KD(M))

1.0×10-8

4.9×10-10

Ni-NTA:
  1.0×10-5~-6

单抗

Clone No.

P20.1(Mouse)

NZ-1(Rat)

Merck:HIS. H8(Mouse)

亲和力

++++

+++++

+++

提纯成本

+

+

+

多肽洗脱

+++

+++

Imidazole

背景

(培养上清)

+

+

+++++

背景

(细胞裂解物)

+

+

++++

亲和标签

DYKDDDDK

c-Myc

HA

GST

氨基酸序列

DYKDDDDK

EQKLISEEDL

YPYDVPDYA

残基数

8

10

9

218

分子量 (kDa)

1.01

1.20

1.10

26

等电点(pI)

3.97

4.00

3.56

配体

DYKDDDDK tag

c-Myc tag

HA tag

GST

亲和珠回收

Tris-HCl,
  Glycine Buffer(pH2~3.5)

Tris-HCl,
  Glycine Buffer(pH2~3.5)

Tris-HCl,
  Glycine Buffer(pH2~3.5)

Glutathione,
  Tris-HCl,
  Glycine Buffer(pH2~3.5)

单抗边界强度

(KD(M))

2.8×10-8

2.2×10-9

2.8×10-9

Glutathione:
  1.0×10-5~-6

单抗

Clone No.

M2(Mouse)

9E10(Mouse)

3F10(Mouse)
  HA-7(Rat)

Wako:5A7(Mouse)

亲和力

++++

++++

++++

++++

提纯成本

++

++

++

+

多肽洗脱

+++

++

++

Glutathione

背景

(培养上清)

++++

+++

+++

++++

背景

(细胞裂解物)

++++

++++

+++

++++

  本比较表为Wako独家调查的数据。样品、检测方法和手法的不同,特异性也会有所变化,因此无法保证各个亲和标签的功能。

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

发表回复