Phos-tag™ 凝胶荧光染料

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

Phos-tag™ 凝胶荧光染料Phos-tag™ 凝胶荧光染料

 


Phos-tag™ 凝胶荧光染料,是一种可在生理pH范围内,对凝胶中的磷酸化蛋白进行染色的荧光染料。进行了SDS-PAGE,用本产品处理聚丙烯酰胺凝胶,可以对磷酸化蛋白进行特异性染色。

本系列有波长不同的Yellow(黄)、Magenta(品红)、Cyan(蓝绿)、Aqua(浅绿)四种颜色。每管规格为0.2 mg,可对约20个迷你凝胶进行染色。

 

购买前请注意:

使用Phos-tag 凝胶荧光染料,需要用到Mixed reagents for Phos-tag™ Common Solution 5×(产品编号:383-15231)。请一同购买。


Phos-tag™ 凝胶荧光染料



◆特点


● 高灵敏度

● 在生理pH下即可染色

● 选择性与pSer、 pTyr、 pHis以及pAsp残基结合

● 无需放射性物质、化学物质标签、抗体

● 2小时内完成染色

◆产品对比


                  其他公司产品A


● 凝胶pH:2~4

● 5个步骤(固定、清洗、染色、脱色、清洗)

● 所需时间:≧5小时

● 溶液更换次数:11次

● 卵清蛋白检测上限:~5 ng/lane

  Phos-tag™ Magenda(品红)


● 凝胶pH:7~8(不进行脱磷酸化)

● 3个步骤(固定、染色、清洗)

● 所需时间:≦2小时

● 溶液更换次数:4次

● 卵清蛋白检测上限:~1 ng/lane

◆应用实例①


磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白的染色Phos-tag™ Aqua(浅绿)

Phos-tag™ 凝胶荧光染料

Lane.No.()内为磷酸基团数目


1. Marker

2.α-酪蛋白(9P)

3.经ALP处理的α-酪蛋白

4.β-酪蛋白(5P)

5.经ALP处理的β-酪蛋白

6.卵清蛋白(2P)

7.经ALP处理的卵清蛋白

8.胃蛋白酶(1P)

9.经ALP处理的胃蛋白酶

10.β-半乳糖苷酶

11.牛血清白蛋白

12.碳酸酐酶

Phos-tag™ Aqua(浅绿)染料选择性:用Phos-tag™ Aqua(浅绿)对10%(w/v)的PAGE胶进行染色,其中分别含有四组完整的以及经ALP(碱性磷酸酶)处理的磷酸蛋白(α-酪蛋白,β-酪蛋白,卵清蛋白和胃蛋白酶各1 μg)(左),然后使用考马斯亮蓝CBB G-250染色(右)。

成功特异性地检测出SDS-PAGE后的磷酸化蛋白。


数据提供:广岛大学研究生院 医学系科学研究科 医药分子机能科学研究室 木下惠美子老师、木下英司老师、小池透老师

 


◆应用实例②


使用Phos-tag™ 荧光凝胶染料的组氨酸、天门冬氨酸的磷酸化分析

细菌通过将信息从组氨酸激酶EnvZ传递到应答调控子OmpR来调节基因的表达。分别分析有自磷酸化能力的EnvZ激酶和被EnvZ催化的OmpR中组氨酸和天门冬氨酸的磷酸化。


Phos-tag™ 凝胶荧光染料

Phos-tag™ 凝胶荧光染料

可以确认Phos-tag™ Magenta(品红)和Phos-tag™ SDS-PAGE 这两种试剂中的His和Asp的磷酸化随激酶的处理时间经过不断增强。尤其是使用Phos-tag™ Magenta(品红)时,可以仅检测出His磷酸化或Asp磷酸化。


数据提供:广岛大学研究生院 医学系科学研究科 医药分子机能科学研究室 木下惠美子老师、木下英司老师、小池透老师

 


◆应用实例③


用于筛选组氨酸激酶抑制剂(新型抗生素)

使用Phos-tag™荧光凝胶染料,筛选组氨酸激酶抑制剂。


Phos-tag™ 凝胶荧光染料


证实磷酸化依赖组氨酸激酶抑制剂浓度被抑制。


数据提供:广岛大学研究生院 医学系科学研究科 医药分子机能科学研究室 木下惠美子老师、木下英司老师、小池透老师



参考文献


“Quantitativemonitoring of His and Asp phosphorylation in a bacterial signaling system byusing Phos-tag Magenta/Cyan fluorescent dyes”, Emiko Kinoshita-Kikuta, HiroshiKusamoto, Syogo Ono, Keisuke Akayama, Yoko Eguchi, Masayuki Igarashi, ToshihideOkajima, Ryutaro Utsumi, Eiji Kinoshita, Tohru Koike, Electrophoresis, 2019

◆使用方法

Phos-tag™ 凝胶荧光染料

※调整平衡及清洗溶液以及染色溶液必须使用Mixed reagents for Phos-tag™ Common Solution 5× (产品编号:383-15231)。

◆激发波长/荧光波长

Phos-tag™ Yellow(黄) Phos-tag™ Magenta(品红)
Phos-tag™ 凝胶荧光染料 Phos-tag™ 凝胶荧光染料

Ex/Em=505 nm/514 nm



Ex/Em=547 nm/561 nm



Phos-tag™ Cyan(蓝绿) Phos-tag™ Aqua(浅绿)
Phos-tag™ 凝胶荧光染料 Phos-tag™ 凝胶荧光染料
 Ex/Em=643 nm/661nm Ex/Em=551 nm/564 nm



◆产品列表


产品编号 产品名称 规格
380-15241 Phos-tag™ Yellow
Phos-tag™ 黄色荧光染料
0.2 mg
386-15221 Phos-tag™ Magenta
Phos-tag™ 品红荧光染料
0.2 mg
382-15201 Phos-tag™ Aqua
Phos-tag™ 浅绿荧光染料
0.2 mg
389-15211 Phos-tag™ Cyan
Phos-tag™ 蓝绿荧光染料
0.2 mg
383-15231

Mixed reagents for Phos-tag™ Common Solution

Phos-tag™ 5×染色通用混合溶液

1 EA


◆相关产品


Phos-tag™ Acrylamide

产品编号 产品名称 规格
304-93521 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107
Phos-tag™ 丙烯酰胺
10 mg
300-93523 2 mg
304-93526 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5 mM Aqueous Solution
Phos-tag™ 丙烯酰胺5 mM水溶液
0.3 mL



SuperSep™ Phos-tag


用于Bio-Rad伯乐电泳仪

货号

品名

电泳仪

规格

198-17981

SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 7.5%, 17 well,

83×100×3.9mm

Mini-PROTEAN® 

Tetra Cell

(Bio-Rad Laboratories, Inc.)

5 块

195-17991

SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well,

83×100×3.9 mm

5 块

用于Life Technologies伯乐电泳仪

货号

品名

电泳仪

规格

192-18001

SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 7.5%, 17 well,

100×100×6.6 mm

XCell SureLock® 

Mini-Cell

(Life Technologies, Inc.)

5 块

199-18011

SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well,

100×100×6.6 mm

5 块


Phos-tag Biotin


产品编号 产品名称 规格
301-93531 Phos-tag™ Biotin BTL-104
Phos-tag™ 生物素
10 mg
308-97201 Phos-tag™ Biotin BTL-111 1 mM Aqueous Solution
Phos-tag™ 生物素1 mM水溶液
0.1 mL


Phos-tag Agarose


产品编号 产品名称 规格
302-93561 Phos-tag™ Agarose
Phos-tag™ 琼脂糖
0.5 mL
308-93563 3 mL

Phos-tag Tip

产品编号 产品名称 规格
387-07321-8P Phos-tag™ Tip
Phos-tag™ 琼脂糖枪头
8 pcs
387-07321 8 pcs×10


Phos-tag Mass Analytical Kit


产品编号 产品名称 规格
305-93551 Phos-tag™ Mass Analytical Kit
    Phos-tag™ 质谱分析试剂盒
1 set

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

发表回复