2-脱氧葡萄糖(2DG)摄入检测试剂盒 2-Deoxyglucose (2DG) Uptake Measurement Kit

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2-脱氧葡萄糖(2DG)摄入检测试剂盒2-脱氧葡萄糖(2DG)摄入检测试剂盒                              2-Deoxyglucose (2DG) Uptake Measurement Kit

 

 

2-脱氧葡萄糖(2DG)摄入检测试剂盒                              2-Deoxyglucose (2DG) Uptake Measurement Kit

 


◆原理

 

检测原理:

细胞摄入2DG后,经过细胞内生化酶的催化,通过检测产生的NADPH进行研究。

 

2-脱氧葡萄糖(2DG)摄入检测试剂盒                              2-Deoxyglucose (2DG) Uptake Measurement Kit

      所有反应步骤都只需在同一个孔内添加预混试剂,即可实现自动化操作。

 为减少葡萄糖代谢的影响,只需少量2DG加入活细胞中。通过细胞代谢将2DG转化转化为2DG6P。

 2DG6P在被氧化的过程中会产生NADPH,通过检测NADPH的量来测定2DG6P的含量。


 

本试剂盒与RI法的比较:


2-脱氧葡萄糖(2DG)摄入检测试剂盒                              2-Deoxyglucose (2DG) Uptake Measurement Kit

 

 

◆优点・特色

 

 检测培养细胞的2DG摄入量
 无需RI,只需使用酶标仪即可进行检测
 不受细胞外2DG的影响。
● 使用酶循环法,灵敏度高,可检测至pmol级水平
 适用于96孔细胞培养板
 无需漂洗步骤,可实现自动化

 

 

◆案例・应用

 

【案例1】用已知2DG6P浓度的溶液进行检测。


2-脱氧葡萄糖(2DG)摄入检测试剂盒                              2-Deoxyglucose (2DG) Uptake Measurement Kit

【案例2】3T3-L1细胞摄入2DG后实验结果。


2-脱氧葡萄糖(2DG)摄入检测试剂盒                              2-Deoxyglucose (2DG) Uptake Measurement Kit

 


【案例3】人脂肪细胞摄入2DG后实验结果。

2-脱氧葡萄糖(2DG)摄入检测试剂盒                              2-Deoxyglucose (2DG) Uptake Measurement Kit

Q:    试剂盒能否用于微生物葡萄糖2-DG摄取检测?是否有微生物实验的例子?
A:    很抱歉,我们没有做过微生物2-Deoxyglucose摄入检测,所以我们没有相关案例。
    
Q:    是否有大肠杆菌葡萄糖摄取的数据?
A:    "很抱歉,我们没有做过大肠杆菌2-Deoxyglucose摄入检测;
          请注意,细菌摄入2-Deoxyglucose以deoxyglucose-6-phosphate前体的形式保留在体内。如果您有相关

          实验的经验或者信息,可以使用该试剂盒检测。"
    
Q:    该试剂盒需要使用何种类型的96孔板?白色板或透明板?
A:    请用透明板。其他没有特殊要求。
    
Q:    如何分析2DG检测数据?标准曲线的单位是mM,但是操作手册中的案例是pM/孔?
A:    2DG6P的总量在试剂盒中使用摩尔浓度表示。如果您需要了解案例的计算及检测,请联系我们。
    
Q:    关于超声波处理这一步,能告诉我相关参数设置吗?
A:    "该试剂盒以细胞内2DG6P的含量来检测细胞葡萄糖摄取量。
          操作说明中P6(9),提到通过超声波破破碎得到细胞裂解液,其具体的参数设置,是根据仪器型号而定

          的。请根据说明书中的建议设置参数。如果您无法确认,请在显微镜下观察细胞的破坏程度。"
    
Q:    是否有进行过肿瘤细胞和肿瘤的检测?
A:    我们没有进行相关测试。
    
Q:    是否进行过动物体内肿瘤2DG摄取检测?我想要移植肿瘤,并观察他们葡萄糖摄取情况。
A:    "很抱歉,我们没有进行过体内肿瘤的葡萄糖摄取实验。我们目前正在积极开发此类体内实验用的试剂盒。
          据报道,有些客户调整了实验方法,如添加己糖激酶用于体内实验。但我们并未建立标准的体内操作手册,

          需要您根据情况优化条件。"
    
Q:    "关于2DG摄入检测试剂盒,使用时能够将试剂量减半吗?(如说明书中每样200 uL改为100 uL)
          这样会对实验结果产生什么影响?"

A:    "我们不能保证试剂量减半后,实验结果的准确性,因为反应程度和仪器都会对此产生影响。
          为了保证检查结果的稳定性,我们建议您按照说明书操作。"
    
Q:    能否提供2DG摄入试剂盒内的 1 mM 2DG6的溶剂?
A:    我们无法告知您这些特殊组分,但是1 mM 2DG是溶于蒸馏水中的。
    
Q:    A溶液的组分是什么?
A:    很抱歉,我们无法告知您试剂的组成。
    
Q:    操作要求用使用超声波裂解细胞,但是我们实验室没有这台仪器。请问可以使用其他替代法吗?
A:    "如果没有超声仪,可用跟其他方法裂解细胞。
          用少量TritonX-100 (1%),进行10-20稀释。使用该稀释液处理样品。可能您觉得稀释比例过高,这是

          因为溶解后由于表面活性剂的关系体积会减少1~2 mL,标准的超声波处理是3 mL。因此样品的终浓度和超

          声处理是相同的。
          请不要使用SDS作为表面活性剂,会抑制系统反应。"
    
Q:    关于细胞裂解缓冲液的问题:缓冲液成分除了的Tris-HCl和Triton100-X外,能够含有氯化钠和螯合剂吗?

          还是需要将这些成分去除?
A:    我们不建议您添加氯化钠和螯合剂,因为当这些试剂的浓度增加时,会对体系反应产生负面影响。
    
Q:    2-DG试剂盒检测能够用于成熟脂肪细胞吗?悬浮细胞有影响吗?
A:    "该试剂盒可用于检测成熟脂肪细胞检测;由于该细胞非常容易从培养板上剥离,所以保持细胞的自然状态

          即可。用该试剂盒检测成熟脂肪细胞时,细胞是否悬浮对检测没有影响。
          但是,成熟脂肪细胞不容易离心,如果强力离心会对细胞造成损失。所以小心处理。如果您担心离心会对

          细胞造成损伤,可选择如下方法:将培养板包被I型胶原或者纤连蛋白,增强成熟脂肪细胞的粘附性。"

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
CSR-OKP-PMG-K01TE 2-Deoxyglucose (2DG) Uptake Measurement Kit
2-脱氧葡萄糖(2DG)摄入检测试剂盒
1 KIT (25次)
CSR-OKP-PMG-K01E 2-Deoxyglucose (2DG) Uptake Measurement Kit
2-脱氧葡萄糖(2DG)摄入检测试剂盒
1 KIT (50次)

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