免疫组织化学工作流程
VECTASTAIN ® ABC 系统使我们成为免疫组织化学 (IHC) 和免疫细胞化学 (ICC) 领域的先驱,并且我们在这些领域仍然是值得信赖的品牌。我们的产品因其高灵敏度、低背景、可靠性、再现性和价值定价而受到好评。我们提供许多不同的检测系统来适应广泛的实验优先事项。
为您的 IHC 检测选择合适的试剂是优化实验方案的重要组成部分。 Vector Laboratories 是您 IHC 工作流程每个步骤中优质标记和检测产品的资源。
载玻片准备
· 大化组织切片在载玻片上的保留和粘附。
· 划分和隔离各个部分以减少试剂使用或进行离散处理。
抗原修复
使用规定的 pH 值和盐溶液提高醛固定制剂的组织抗原性(“免疫反应性”)。醛固定(例如福尔马林)和石蜡包埋过程中的热暴露相结合会使表位难以检测。在抗原修复过程中,组织会受到缓冲溶液和高温的组合处理,这会导致蛋白质发生构象变化,从而暴露抗原以供检测。
淬火/阻断
使用封闭溶液减少或消除组织切片和细胞制剂上不需要的背景(非特异性)染色。非特异性染色可能是由内源酶或组织成分引起的,包括内源酶活性、Fc 受体的存在或检测试剂与组织或细胞蛋白和其他大分子的相互作用。根据阴性对照切片的结果选择封闭溶液。
一抗/凝集素
使用经过验证的特定标记物来识别和定位细胞或组织制剂中的靶蛋白抗原或糖蛋白部分。选择一抗或凝集素时,请考虑组织种类和组织制备方法(例如固定),以确保与靶标特异性结合。
二抗
选择高度纯化和最佳偶联的检测试剂以满足检测条件,例如一抗种类、组织种类、靶标丰度和易用性(浓缩或即用型)。
三级试剂
如果需要,提高检测的灵敏度,以可视化弱或短暂表达、上调或未知(例如,基因敲入研究)抗原。
底物/显色剂
使用酶特异性显色显色来可视化您的目标蛋白抗原及其细胞和/或细胞外定位和相对表达水平。选择符合您颜色偏好且与其他系统试剂兼容的酶底物(例如复染剂、封固剂和其他底物(如果多重检测))。
复染
使用对比核染色来澄清异质形态结构内的靶抗原信号。这有助于阐明组织中的细胞结构和特定染色模式。选择与酶底物形成对比且与底物和封固剂化学相容的复染剂(蓝色、绿色或红色)。
盖玻片/封片
保留目标抗原染色剂以供短期或无限期存储和存档。选择与您的底物和复染剂兼容的封固剂。使用非水封固剂封固要存档的载玻片,或使用水性封固剂保存长达数年。