ISOGEN II RNA 抽提试剂 ISOGEN II

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ISOGEN II RNA抽提试剂ISOGEN II RNA 抽提试剂                              ISOGEN II

ISOGEN II

从动物组织和培养细胞中高效分离纯化含有小 RNA 的总 RNA

◆原理


      ISOGEN II 是从动物组织和培养细胞中总 RNA 和小 RNA 的抽提试剂。本品是含有苯酚和胍的均相液体,根据与细胞成分的相互作用,能单一地分离 RNA 。
      使用旧产品(ISOGEN 和 ISOGEN-LS)需要添加氯仿,要进行液相分离,而本产品则无需此步骤。在样品中加入 ISOGEN II 溶解或是均质化之后,再添加水,因为 DNA、蛋白质、多糖类等会形成不溶性沉淀,进行离心分离后可以去除。用乙醇沉淀并洗涤、溶解得到上清之后,能分离出高纯度的 RNA 。

 

 

◆优点特色

● 不需使用氯仿分离 RNA
● 比起旧产品( ISOGEN 等),小RNA 的抽提效率更高
● 可以把大 RNA(>200 bases)和小 RNA(<200 bases)分离(同时提供不分离的方案)
● DNA 污染少,抽提的 RNA 可以直接用于 RT-PCR 和 RT-qPCR 上
● 约 1 h 可完成 RNA 的抽提

内容和保存条件


<span style="font-family: 微软雅黑, Microsoft YaHei;"><span style="font-family: 微软雅黑, 'Microsoft YaHei'; font-size: 14px;">无标题文档</span></span>

产品名称

构成

ISOGEN II

ISOGEN II

100 mL

使用手册

1本

冷藏保存
请在购买日起6个月内使用
本品可在室温下运输。产品到达后,在2~10℃条件下保存即可正常使用

产品安全数据图表(MSDS)
ISOGEN II MSDS

使用手册
ISOGEN II 手册

◆案例应用


操作流程


ISOGEN II RNA 抽提试剂                              ISOGEN II

◆使用例子


Data 1 抽提得到的 RNA 电泳

根据 ISOGEN 和 ISOGEN II 的方案抽提 RNA,进行电泳

ISOGEN II RNA 抽提试剂                              ISOGEN II   M:RNA Ladder (Code No.311-06261)
  Lane1:ISOGEN 抽提总 RNA(2 μg)
  Lane2:ISOGEN II 抽提总 RNA(2 μg)
  Lane3:ISOGEN II 抽提高分子 RNA(2 μg)
  Lane4:ISOGEN II 抽提 小RNA(0.2 μg)
  1.2% Agarose S(甲醛变性)EtBr 染色

ISOGEN II RNA 抽提试剂                              ISOGEN II   Lane1:ISOGEN 抽提总 RNA(5 μg)
  Lane2:ISOGEN II 抽提总 RNA(5 μg)
  Lane3:ISOGEN II 抽提高分子 RNA(5 μg)
  Lane4:ISOGEN II 抽提小 RNA(0.5 μg)
  12% 聚丙烯酰胺(Urea 变性)EtBr 染色

ISOGEN II 能抽提和 ISOGEN 同等的总 RNA

ISOGEN II 能对 200 base 以上的高分子 RNA 和 10~200 base 的小 RNA 进行分离


Data 2 ISOGEN 和 ISOGEN II 抽提的总 RNA 用“3D-GeneHuman miRNA Oligo chip(东来株式会社)分析。


ISOGEN II RNA 抽提试剂                              ISOGEN II

ISOGEN II 比 ISOGEN 能更完整地抽提 miRNA

 


Data 3 RT-PCR


用 ISOGEN 和 ISOGEN II 从 HeLa 细胞中提取出 RNA 并定性,再用 PT-PCR 检测出 β-Actin 基因。同时进行没有经过 RT 反应的对照实验。

ISOGEN II RNA 抽提试剂                              ISOGEN II

ISOGEN II RNA 抽提试剂                              ISOGEN II


1:模板RNA量 500 ng
2:模板RNA量 100 ng
3:模板RNA量 20 mg
M:Gene Ladder 100

实验证明以ISOGEN II抽提的RNA与以ISOGEN抽提的RNA相比,DNA残留更少。


Data 4 RNA 提取量的参考值

分别用 “大 RNA 的提取”和“总 RNA 的提取”方案得到的 RNA 的提取量的参考值如下:

试剂

大 RNA 的提取

总 RNA 的提取

组织

肝脏

5~7 g RNA/mg tissue

6~8 μg RNA/mg tissue

肾脏、脾脏

3~4 g RNA/mg tissue

3~4 μg RNA/mg tissue

骨骼肌、脑、肺

0.5~1.5 g RNA/mg tissue

0.5~1.5 μg RNA/mg tissue

胎盘

1~3 g RNA/mg tissue

1~3 μg RNA/mg tissue

培养细胞

上皮细胞

5~8 g RNA/108 cells

5~10 μg RNA/106 cells

成纤维细胞

3~5 g RNA/108 cells

4~6 μg RNA/106 cells

注意事项


● 本品是实验研究用的试剂,不能作为医药品或其他目的使用。另外,如果您对试剂的基本的知识不了解。请不要使用。

● 因为 ISOGEN II 是医药用外有害物质(苯酚制剂),所以请小心操作。
● 使用时请穿着适当的防护设备(手套、眼镜等)。
● 请不要吸入蒸汽,进行充分的通风。
● 如果接触皮肤或眼睛,请用大量的水冲洗至少15分钟,并前往医院就诊。
● 本品的操作请按照手册记载的内容进行
● 对于和手册记载内容不同的操作带来的事故,日本基因不负任何责任。



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产品编号

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包装

备注

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311-02621

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产品编号

产品名称

包装

备注

298-68001

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    目的 mRNA 克隆试剂盒

10次用

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291-70201

microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1
    microRNA 纯化试剂盒,人/鼠Ago1

10次用

Argonaute(Ago)根据免疫沉淀的microRNA特异纯化试剂盒

292-66701

microRNA Isolation Kit, Human Ago2
microRNA 纯化试剂盒,人Ago2

10次用

292-67301

microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2
microRNA 纯化试剂盒,小鼠Ago2

10次用

297-70301

microRNA Isolation Kit, Human Ago3
microRNA 纯化试剂盒,人Ago3

10次用

015-22411

Anti Ago1, Monoclonal Antibody (2A7)
Ago1 单抗(2A7)

50 μL

抗Argonaute(Ago)抗体

014-22023

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50 μL

018-22021

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50 μL

015-22031

100 μL

290-66501

microRNA Cloning Kit Wako
microRNA 克隆试剂盒

8次用

含热稳定ligase高效小RNA克隆试剂盒

ISOGEN II RNA 抽提试剂                              ISOGEN II

ISOGENII 使用说明书.pdf

参考文献

 

1. 

Chomczynski, P. Reagents and methods for isolation of purified RNA, US and International Patents Pending.


2. 

Chomczynski, P. and Sacchi, N:Single step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol- chloroformextraction”, Anal. Biochem., 162, 156-159(1987)


3. 

Chomczynski, P.:A reagent for the single-step simultaneous isolation of RNA, DNA and proteins from cell and tissue samples”, Biotechniques, 15, 532-537(1993)


4. 

Wilfinger, W., Mackey, K. and Chomczynski, P.:Effect of pH and ionic strength on thespectrophotometric assessment of nucleic acid purity”, Biotechniques, 22, 474-481(1997)


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
311-07361 ISOGEN Ⅱ
总RNA及小RNA提取试剂 
100 mL 医药用外有害物质