Detector™PCR探针标记试剂盒-KPL DNA生物素标记

生物素与亲和素的结合只需要生物素的脲基环部分。因此可将其戊酸侧链通过酰胺键与核酸分子相连,构成生物素标记的核酸标记探针,与固定在滤膜上或固定在组织细胞或染色体原位的核酸分子的同源序列互补杂交。KPL的PCR探针标记生物素试剂盒(Detector™ PCR DNA Biotinylation Kit)通过PCR反应,使用随机掺入生物素标记的biotin-N4-dCTP分子嵌入DNA分子探针中,制备成用于核酸杂交的DNA标记探针。Detector™PCR探针标记试剂盒-KPL DNA生物素标记

PCR探针标记生物素试剂盒(Detector™ PCR DNA Biotinylation Kit)制备的生物素标记探针具有很高的敏感性,能检测低拷贝的序列。该探针标记试剂盒由于使用了PCR方法,与随机引物探针标记试剂盒相比,能实现特异标记,并能扩增任何感兴趣的序列甚至包括DNA粗样,其适用性更大。试剂盒内的biotin-N4-dCTP与未标记的dCTP比率被优化,能够较大的掺入生物素,并能检测低拷贝或微量的mRNA、质粒、基因组DNA等。

PCR探针标记生物素试剂盒内包括预标记的标准样(用于检测在标记反应中DNA的合成量)。该探针标记方案的最优DNA模板大小为100-1100bp大小。所需模板量分别为基因组DNA(1-100 ng)、质粒(10pg-1ng)。在进行PCR探针标记之前,需要提前进行PCR的预试验。同时试剂盒内还提供对照引物和模板DNA,以检测PCR反应的完整性。采用该试剂盒进行探针的生物素标记,最快1小时内即能完成,制备好的标记探针能保存1年以上。

经PCR探针标记生物素试剂盒制备的探针可以用以下方法检测:制备后的生物素化探针电泳并被转移到膜上,然后使用无探针的酶标链霉亲和素,加入底物后显色发光。制备的标记探针可应用于Southern杂交、Northern杂交, 克隆或成斑杂交、点杂交及原位杂交等。

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Detector™ PCR DNA Biotinylation Kit 60-01-01 30 reactions 产品说明书

作为美国最早实现亲和素纯化二抗商业化的生物公司,同时也是世界上较大的二抗和底物显色系统的生产商。KPL一直提供高质量的用于分子生物学、免疫学、细胞生物学和体外诊断试剂及用于蛋白和核酸检测的试剂盒。针对核酸DNA探针标记,KPL有三种生物素标记试剂盒供您选择,分别为随机引物DNA探针标记、PCR DNA探针标记以及反转录RNA探针标记。另外还有多种杂交显色底物及相关产品。如果您对KPL的产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司免费索取相关产品资料,或者问询您所感兴趣的产品类型。

Detector™随机引物探针标记试剂盒-KPL DNA生物素标记

生物素与亲和素的结合只需要生物素的脲基环部分。因此可将其戊酸侧链通过酰胺键与核酸分子相连,构成生物素标记的核酸探针、标记探针与固定在滤膜(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上或固定在组织细胞或染色体原位的核Detector™随机引物探针标记试剂盒-KPL DNA生物素标记酸分子的同源序列互补杂交。探针和待测核酸在杂交前若为双链,应先变性成单链,然后用偶联有酶或荧光物质的亲和素的探针与待测核酸的片段互补杂交,使杂交部位显色(加入相应的酶底物)或产生荧光。

随机引物DNA生物素标记试剂盒(Detector™ Random Primer DNA Biotinylation Kit)通过DNA复制的延伸反应,以6碱基的随机序列作为引物,用缺乏5′-3′外切活性的Klenow大片段(有5′-3′聚合活性和3′-5′外切校正活性)作为DNA延伸聚合酶,催化掺入生物素标记的biotin-N4-dCTP分子的dNTP进行延伸反应,最终使生物素标记的dCTP分子嵌入进DNA分子探针中。

Detector™随机引物探针标记试剂盒内的组分均被优化设计,能高效扩增,并且检测灵敏。适合该检测方案的模板大小为300bp-1000bp大小(对于大于1000bp的模板,建议首先使用限制性内切酶酶切成300-1000bp大小;对于低于300bp的模板进行探针标记,建议使用KPL的PCR DNA生物素标记试剂盒)。产生的探针片段可以到100-1000个碱基,平均大小在300bp。该探针标记试剂盒制备探针最快只需1小时,制备的DNA探针在-20°C下可保存1年。

Detector™随机引物探针标记试剂盒内包括预标记的标准样(用于检测在标记反应中DNA的合成量),经过系列稀释的标准样和新标记的探针,固定在膜上,并使用酶标的链霉亲和素蛋白,通过底物或化学发光检测,以最终确定标记探针的量。为获得最高的敏感性和最低的背景,探针的应用浓度需要经过试验优化。

Detector™随机引物探针标记试剂盒制备的标记探针可应用于Southern杂交、Northern杂交, 克隆或成斑杂交、点杂交及原位杂交等。

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Detector Random Primer DNA Biotinylation Kit 60-01-00 30 reactions 产品说明书

作为美国最早实现亲和素纯化二抗商业化的生物公司,同时也是世界上较大的二抗和底物显色系统的生产商。KPL一直提供高质量的用于分子生物学、免疫学、细胞生物学和体外诊断试剂及用于蛋白和核酸检测的试剂盒。针对核酸DNA探针标记,KPL有三种标记试剂盒供您选择,分别为随机引物DNA探针标记、PCR DNA探针标记以及反转录RNA探针标记。另外还有多种杂交显色底物及相关产品。如果您对KPL的产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司免费索取相关产品资料,或者问询您所感兴趣的产品类型。