dsRNA抗体J2在新冠病毒治疗药物开发中的应用

随着全球对新冠病毒治疗药物广泛而深入的研究,抗双链RNA抗体成为抗病毒药物研发过程中不可或缺的重要工具。本文综述了一种新冠病毒治疗药物的研发进展,通过利用小鼠抗双链RNA单克隆抗体检测新冠病毒感染后的双链RNA,从而发现了一系列潜在抗病毒药物在抑制SARS-CoV-2及其突变株对细胞感染的有效性。

SARS-CoV-2,俗称COVID-19,是一组正链、单链RNA (ssRNA)病毒,这类病毒还包括丙型肝炎病毒、登革病毒、中东呼吸综合征病毒和西尼罗河病毒。韦伯等人在2006年的一篇论文1中证明了,被这些正链RNA病毒感染的细胞,在病毒复制过程中会产生双链RNA (dsRNA),可作为中间体被检测到。SCICONS抗双链RNA抗体J2可检测这种中间体,从而能够确认病毒感染,以及病毒在宿主细胞内的复制。

在一项加拿大和美国的联合研究中,科学家们通过靶向II型跨膜丝氨酸蛋白酶(TTSP) TMPRSS2阻止COVID-19病毒感染,TMPRSS2是一种蛋白酶,介导COVID-19刺突蛋白的切割,在这项新的靶向治疗方法研究中,J2克隆被用来评估抗病毒化合物的效力,这些抗病毒化合物是通过阻止病毒进入宿主细胞而预防感染的。

Shapira等人,开发了一个新型小分子TMPRSS2抑制剂文库作为潜在的治疗药物2,科研人员用潜在治疗剂在肺上皮细胞系(Calu-3)和人活组织来源的结肠膜上进行预处理,然后感染多种SARS-CoV-2毒株。通过免疫荧光对固定细胞染色,用J2抗体检测双链RNA (J2克隆)和核衣壳蛋白的存在,成功检测到COVID-19感染。通过荧光染色方法监测治疗剂文库中化合物感染减少的百分比,反应剂量分析及进一步研究显示,小分子化合物N-0385是一种纳摩级、广谱的SARS-CoV-2冠状病毒抑制剂,对备受关注的B.1.1.7(英国)和B.1.351(南非)两种变异株仍然有效。在对K18-h ACE2转基因小鼠SARS-CoV-2疾病模型的研究数据表明,在感染早期通过鼻腔给药化合物N-0385,临床效果改善明显,存活率可达100%,而对照组仅为20%。

SCICONS小鼠抗双链RNA单克隆抗体(J2已成为双链RNA检测的金标准。它可以用于检测多种病毒的双链RNA中间产物,如丙型肝炎病毒、登革病毒、鼻病毒、基孔肯雅病毒、狂犬病毒、脊髓灰质炎病毒、典型猪瘟病毒、雀麦花叶病毒和培养细胞中的病毒,也可以用于石蜡包埋的组织样品检测。更多关于小鼠抗双链RNA抗体J2的信息可在Nordic MUbio公司官网查阅,产品代码为10010200/10010500,为了方便大家查找,小编汇总了SCICONS产品信息表:

货号

英文品名

中文品名

规格

10010200

Mouse anti double-stranded RNA (J2)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (J2)

200 µg

10010500

Mouse anti double-stranded RNA (J2)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (J2)

500 µg

10040200

Mouse anti double-stranded RNA (J5)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (J5)

200 µg

10040500

Mouse anti double-stranded RNA (J5)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (J5)

500 µg

10020200

Mouse anti double-stranded RNA (K1)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (K1)

200 µg

10020500

Mouse anti double-stranded RNA (K1)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (K1)

500 µg

10050100

Mouse anti double-stranded RNA (J2, J5 and K1) Comparison Kit

小鼠抗双链RNA单克隆抗体(J2,J5 and K1)组合试剂

3 x 100 µg

10613002

Double-stranded RNA (dsRNA) ELISA kit (J2 based)

双链RNA (dsRNA) ELISA试剂盒(J2)

Kit

10623002

Double-stranded RNA (dsRNA) ELISA kit (K1 based)

双链RNA (dsRNA) ELISA试剂盒(K1)

Kit

10623005

Double-stranded RNA (dsRNA) ELISA kit (K1 based)

双链RNA (dsRNA) ELISA试剂盒(K1)

Kit

10613005

Double-stranded RNA (dsRNA) ELISA kit (J2 based)

双链RNA (dsRNA) ELISA试剂盒(J2)

Kit

10030010

Mouse anti double-stranded RNA (K2)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (K2)

10 ml

10030005

Mouse anti double-stranded RNA (K2)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (K2)

5 ml

dsRNA抗体J2在新冠病毒治疗药物开发中的应用

SCICONS是一家提供与双链RNA分子杂交的小鼠单克隆抗体的厂家,客户遍布世界很多国家和地区,在美国有超过一半的州都在使用SCICONSdsRNA抗体J2在新冠病毒治疗药物开发中的应用dsRNA抗体J2在新冠病毒治疗药物开发中的应用的单克隆抗体。SCICONS在1990年便dsRNA抗体J2在新冠病毒治疗药物开发中的应用开始利用杂交瘤细胞系生产抗双链RNA(anti-dsRNA)的单克隆抗体,此类抗体的特异性非常强,包括J2、K1和K2小鼠单克隆抗体。SCICONS的客户包括许多研究机构的学者,发表的文章超过200多篇。

SCICONS于2021年4月13日被Nordic-MUbio BV收购,Nordic-Mubio是一家专注于免疫学的研究试剂公司,总部设在荷兰的Susteren,公司拥有广泛的产品组合,可应用于流式细胞术、细胞生物学、免疫学、癌症研究、干细胞等研究领域。

上海金畔是Nordic MUbio品牌中国区一级代理,为客户提供完善的技术支持与售后服务。关注“金畔生物科技”官方公众号,更多海量免疫学产品等您发现!上海金畔生物科技有限公司集结了全球高质量抗体及抗体相关产品和服务供应商,如Nordic-MUbio、Lifespan、MyBioSource、KPL、Everest和Cal Bioreagents等。品牌知名、产品优质、种类齐全,为科研工作者以及生物制品生产企业提供一站式的服务。如对上述产品感兴趣,欢迎随时拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录上海金畔生物科技有限公司官网www.jinpanbio.cn查询订购。

Reference

  1. Weber F ,  Wagner V ,  Rasmussen S B , et al. Weber, F, Wagner, V, Rasmussen, SB, Hartmann, R and Paludan, SR. Double-stranded RNA is produced by positive-strand RNA viruses and DNA viruses but not in detectable amounts by negative-strand RNA viruses. J Virol 80: 5059-5064[J]. Journal of Virology, 2006, 80(10):5059-5064.
  2. Shapira T ,  Monreal I A ,  Dion S P , et al. A novel highly potent inhibitor of TMPRSS2-like proteases blocks SARS-CoV-2 variants of concern and is broadly protective against infection and mortality in mice.  2021.

脱氧核糖核酸酶Ⅰ

英文名称: DNase I / Deoxyribonuclease I

中文名称:脱氧核糖核酸酶Ⅰ/去氧细胞核酸酶/氧核糖核酸-5ˊ-寡核苷酸水解酶/无核糖核酸酶/脱氧核糖核酸去聚合酶/脱羟核糖核酸酶/除氧细胞核酸酶

来源:牛胰腺

性状:白色冻干粉末,不含盐,溶于水,微溶于30%乙醇

CAS NO.  9003-98-9

分子量:约31000 g/mol 

存储条件:-20℃保存

活性:大于3000 U/mg 

说明: 脱氧核糖核酸酶I是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I水解单链或双链DNA后的产物,5′端为磷酸基团,3′端为羟基。

酶反应:脱氧核糖核酸→ 二核苷酸-5ˊ-磷酸+ 寡聚核苷酸-5ˊ-磷酸

用途:DNase I不含其它DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶,可用于制备不含DNA的RNA样品;RT-PCR反应前RNA样品中去除基因组DNA等可能的DNA污染;体外T7, T3, SP6等RNA Polymerases催化的RNA转录后去除DNA模板; DNase I footprinting研究DNA-蛋白质相互作用;缺口平移(nick translatioin);产生DNA随机片断文库;细胞凋亡TUNEL检测中部分剪切基因组DNA作为阳性对照。

激活与抑制:激活剂为二价金属离子,较大激活可以从镁(Mg++)+钙(Ca++)得到,镁离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。抑制剂有EDTA和十二烷基硫酸钠。可加5mmol/L钙(Ca++)或二异丙基氟磷酸(DFP)作为稳定剂的对抗蛋白水解酶的消化

AppliChem公司是德国知名的跨国化学产品公司,专注生产常规生化试剂、化学试剂、其产品覆盖了生物化学、分子生物学、细胞生物学、微生物学、免疫学、蛋白组学、植物学、基础化学、制药与诊断试剂研发生产等领域。AppliChem为多家制药、化工等知名企业以及生物技术、生化试剂等著名品牌,如美国Sigma、德国Merck等,提供产品。除了作为OEM供货商,全世界有成千上万的公共科研机构、大学以及生物技术公司通过直接订购,正在使用AppliChem的优质产品和服务。

产品详情

品牌

货号

品名

规格

AppliChem

A3778

DNase I

10mg/50mg/100mg

 上海金畔生物科技有限公司公司还会根据客户的实际需求提供不同类型的生化试剂产品,如针对植物生化试剂的美国著名植物品牌PhytoTech的抗生素、植物凝胶等;针对信号转导研究中的拮抗物、激动剂等的BioTrend生化分子等;还有Accurate的多种生化试剂供您选择。如果你对上述产品及相关技术信息感兴趣,请致电021-50837765 到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的最优产品和解决方案,或索取相关手册和资料。我们会为您做的更多!

代理德国AppliChem的DNase I 脱氧核糖核酸酶I

DNase I,即Deoxyribonuclease I,中文名称为脱氧核糖核酸酶I,是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I水解单链或双链DNA后的产物,5′端为磷酸基团,3′端为羟基。
DNase I活性依赖于钙离子,并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。

产品信息:

品牌

货号

品名

规格

AppliChem

A3778,0050

DNase I

50mg

AppliChem

A3778,0100

DNase I

100mg

AppliChem

A3778,0500

DNase I

500mg

AppliChem

A3778_0010

DNase I

10mg

保存温度:-20℃,室温运输。

应用:DNase I 是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶,可用于降解单链或双链DNA

用于无DNA污染的RNA的制备,逆转录及体外转录等实验。

产品信息:M=~31000g/mol;CAS-NO:9003-98-9

性状:冻干粉

配置方法:溶解在150 mM 5毫克/毫升生理盐水,工作液为无色透明状。

特点:不含RNase(RNase free),可以用于各种RNA样品的处理。
用途:制备不含DNA的RNA样品;RT-PCR反应前RNA样品中去除基因组DNA等可能的DNA污 染;体外T7, T3, SP6等RNA Polymerases催化的RNA转录后去除DNA模板; DNase I footprinting研究DNA-蛋白质相互作用;缺口平移(nick translatioin);产生DNA随机片断文库;细胞凋亡TUNEL检 测中部分剪切基因组DNA作为阳性对照。
来源:牛胰腺纯化得到。
分子量:约31kDa。
活性检测条件:40mM Tris-HCl(pH8.0),10mM MgSO4,1mM CaCl2,1μg of pBR322 DNA。
纯度:不含其它DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。
酶储存溶液:50mM Tris-acetate(pH7.5),10mM CaCl2,50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X)100mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃),25mM MgCl2,1mM CaCl2
失活或抑制:加入EDTA至终浓度为2.5mM后,65℃加热10分钟可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子,0.1%的SDS,DTT、巯基乙醇等还原 剂,50-100mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。

注意事项:
如需对酶进行稀释,可以用酶储存液(50mM Tris-acetate(pH 7.5),10mM CaCl2,50%(v/v)glycerol)进行稀释。
酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。