逆转录病毒包装细胞系—铂金版Plat-E/Plat-A/Plat-GP系列

逆转录(也成为反转录病毒,Retrovirus)病毒载体是常用的病毒载体之一。转入宿主的细胞后,反转录病毒载体随即整合到宿主细胞基因组内,这种整合的位点是随机的。反转录病毒载体就可利用这些外壳蛋白包装成病毒颗粒在辅助细胞系内大量扩增。反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右,以很高的转染率感染宿主细胞,特别是分裂中的细胞。

逆转录病毒通过整合进目的细胞基因组,能实现持久的表达,而且几乎没有免疫原性,因此很受欢迎。特别是和腺病毒相比,其能整合进基因组的优势导致逆转录病毒也被广泛应用,然后逆转录病毒系统也存在一定的缺陷,首先是安全性比较低,因为所有包装所需的基因都放到一个载体上,还有就是基因能整合进目的细胞也可能会导致细胞基因组的紊乱,而且其滴度比较低。由于逆转录病毒表达系统的特殊性,其包装细胞的种类较多,表达载体的种类也较多,因此需要根据不同的实际来选择合适的表达系统。Cell Biolabs的逆转录病毒表达产品包括包装细胞系、表达系统(同时包括了包装细胞和表达质粒载体)、逆转录病毒表达质粒以及插入了目的基因的重组逆转录病毒表达质粒。

逆转录病毒包装细胞系—铂金版Plat-E/Plat-A/Plat-GP系列Cell Biolabs提供三种铂金版逆转录病毒包装细胞系:单嗜性(Ecotropic)Plat-E包装细胞系、双嗜性(Amphotropic)Plat-A包装细胞系及泛嗜性(Pantropic)Plat-GP包装细胞系。它们对不同的细胞具有不同的侵染性。

Plat-E包装细胞系(Ecotropic)是一种来源于人胚肾(Human Embryonic Kidney, HEK)293细胞系,主要用于快速、短暂地产生高滴度逆转录病毒,同时也能用于稳定地产生逆转录病毒。由Plat-E包装细胞系产生的病毒表达一种单嗜性的被膜,因而只能感染小鼠和大鼠细胞。Plat-GP包装细胞系(Pantropic)也来源于HEK293,但却是一种泛嗜性的包装细胞系,其包装产生的逆转录病毒颗粒既能感染哺乳动物细胞,也能感染非哺乳动物细胞。在使用过程中, Plat-GP细胞需要用逆转录病毒载体和pVSV-G来共转染。VSV-G是泡状口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus) 的被膜糖蛋白,能通过脂质结合及质膜融合来介导病毒进入细胞。因此在使用Plat-GP细胞系时,还需要额外的使用pVSV-G完成包装。Plat-A包装细胞系(Amphotropic)也是一种来源于HEK293细胞的细胞,在将病毒env 基因导入该细胞时利用嘌呤霉素作为选择标记,因而对于一些使用嘌呤霉素作为筛选标记的载体无法使用。

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
Platinum-E Retroviral Packaging Cell Line, Ecotropic RV-101 单嗜性逆转录包装细胞系,包装病毒可感染小鼠、大鼠,一个包装>3 x 106细胞
Platinum-A Retroviral Packaging Cell Line, Amphotropic RV-102 双嗜性逆转录包装细胞系,包装病毒可感染小鼠、大鼠、人,一个包装>3 x 106细胞
Platinum-GP Retroviral Packaging Cell Line, Pantropic RV-103 多嗜性逆转录包装细胞系,包装病毒感染宿主范围非常广,但是需要额外提供VSVG蛋白,>3 x 106细胞
pVSV-G Packaging Vector RV-110 提供VSVG包膜蛋白

一般来说,Plat-E是最常用的逆转录病毒包装细胞;Plat-GP则是适用性最广的逆转录包装细胞(但是需要多增加一个表达载体pVSV-G Packaging Vector提供外壳蛋白VSV-G,该外壳蛋白宿主范围非常广);Plat-A用的比较少,但是其宿主范围比Plat-E要多一些,比如可应用于人、猴、狗来源的细胞等。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为逆转录病毒研究人员提供完备的重组逆转录病毒表达系统及其相关产品和服务,产品包括逆转录病毒的最新一代表达系统,针对逆转录病毒滴度低的软肋而专门设计的逆转录病毒浓缩纯化试剂盒,逆转录病毒的快速定量,以及逆转录病毒高效转染试剂和用于包装重组逆转录病毒的包装细胞系等,几乎覆盖反转录病毒研究中的所有技术环节。如果您对上述逆转录病毒包装细胞系感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。