细胞死亡 M65® ELISA 试剂盒 M65® ELISA

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细胞死亡M65® ELISA试剂盒细胞死亡 M65® ELISA 试剂盒                              M65® ELISA

M65® ELISA

◆原理

 

M65® ELISA 检测来自死亡细胞释放的可溶性角蛋白18(K18),可以整体评估细胞的死亡情况,判断是由于细胞凋亡还是细胞坏死引起的细胞死亡。M65® ELISA 最初是为了和 M30 Apoptosense® ELISA 配套使用而设计研发的,后者特异性检测细胞凋亡。两者配套使用,可定量检测总的细胞死亡、细胞凋亡和细胞坏死。

由于 M30 Apoptosense® ELISA 和M65® ELISA 都是用同一标准进行校对的,所以可以评估细胞死亡中细胞凋亡占的比例。

M65® ELISA 可用于检测人血清,并且带有 CE 标记(可用于体外诊断)。

细胞死亡 M65® ELISA 试剂盒                              M65® ELISA

细胞死亡 M65® ELISA 试剂盒                              M65® ELISA

 

 

◆优点・特色

 

● 只特异性定量检测上皮细胞整体的死亡情况

● 与 M30 Apoptosense® ELISA 配套使用,定量检测细胞凋亡、细胞坏死和细胞死亡。

● 检测更稳定,特异性更高。

● 夹心法 ELISA 检测,可拆卸的96孔板。试剂即开即用

● 肝脏疾病:检测肝脏疾病患者肝细胞总的死亡情况。可用肝脏疾病检测。

● 肿瘤:监测上皮细胞肿瘤经化疗后肿瘤细胞的死亡情况。

● 毒理学:临床评估不同药物对肝脏细胞的毒性。

 

 

◆案例・应用

 

体内细胞凋亡或者坏死引起肿瘤细胞死亡。细胞死亡的模式取决于细胞毒素刺激的类型和肿瘤的类型。细胞内 ATP 产生缺失通常会引起细胞凋亡,但有时候也会导致细胞坏死 (Leist et al., 1997)。细胞坏死期间,未经 caspase 水解的细胞内蛋白将会释放到细胞外。

角蛋白18(K18)是由很多种上皮细胞高表达的细胞内蛋白。大多数 K18 分子在细胞内是非可溶性的,但也报道有可溶性 K18 池(Chou et al., 1993)。细胞死亡期间,细胞内 K18 会释放到细胞外。检测细胞外可溶性的K18可反映上皮细胞的死亡情况 “过程和原因” (由于细胞凋亡和细胞坏死导致) (Kramer et al., 2004).

K18 在细胞凋亡期间被 caspase 催化发生水解, caspase-cleaved 片段释放到细胞外。因此细胞外的 caspase-cleaved K18(ccK18)浓度反映了细胞凋亡的数量。而且M30:M65 比代表了总细胞死亡中细胞凋亡的比例(不同 “M30:M65 比”) (Kramer et al., 2004).

M65 EpiDeath® ELISA 使用两种IgG型的K18小鼠单抗,评估人血清或则血浆中上皮细胞死亡情况。M30 Apoptosense® ELISA 特异性检测在caspase-cleavage d K18 在Asp396形成的新表位 (K18Asp396-NE 或者M30 neo-epitope) ,反映上皮细胞的凋亡情况(Hägg et al. 2002Bivén et al. 2003)。两种检测试剂盒的单位根据同一标准校对,可以计算caspase-cleaved 和总K18 (“M30:M65 比例”)。培养细胞诱导细胞凋亡导致caspase-cleaved K18释放,M30:M65 比值较高, 然而如果细胞发生死亡,只有K18的水平是升高的,所以M30:M65 比值较低。

         体内或体外实验中,定量检测总的细胞死亡(凋亡和坏死)。与M30 Apoptosense® ELISA kit 联用可以检测上皮细胞凋亡在整个细胞死亡中所占的比例。


细胞死亡 M65® ELISA 试剂盒                              M65® ELISA

 


◆产品信息


M65® ELISA kit (CE-Mark) 体内,体外实验中,定量检测总的细胞死亡(凋亡和坏死) 。


特异性

 人

样品类型

 含有从死亡细胞中释放的CK18的血清或者血浆(EDTA,citrate,heparin plasma)

灵敏度

 11 U/L, Standard A(0 U/L)+2 S.D.

范围

 125-2,000 U/L

检测目标物

 完整的CK18和可溶性caspase酶解的CK18(ccCK18/CK18F/CK18Asp396-NE/M30)

特点

 可进行定量检测;预铺ELISA 板(可拆卸)、即用试剂,操作方便;可用于自动化

稀释线性

 用M65 Standard A 稀释,平均值是126%(范围116-139%);用血清稀释,平均 值 是120%(范围101-133%)


M65 EpiDeath® ELISA 和 M65® ELISA的区别,请参考相关资料。

 


 更多运用案例

M65 EpiDeath® ELISA 和M65® ELISA的比较

M65 EpiDeath® ELISA 和M65® ELISA的运用完全一致。

检测的样品类型一致,检测的目标物一致。

 M65 EpiDeath® ELISA与 M65® ELISA使用相同的单抗。为了与 M30 Apoptosense® ELISA匹配,使用单抗 M5 作为捕获抗体(在M65® ELISA使用单抗M6)。


M65 EpiDeath® 与 M65® ELISA相似和区别:

●   M65 EpiDeath® ELISA 可以更好的区分健康人群和病患(患有导致循环角蛋白18(K18)增加的疾病)。这是由于该试剂盒中的抗体有更好的结合特异性,在健康人群中检测到的值更低。
●   M65 EpiDeath® ELISA 和 M65® ELISA 检测含有 K18 的病患样品,检测值差不多(见图中提供的资料,相关性系数 r²= 0,84). 这些检测的主要区别是用 M65® ELISA 检测,检测值在 200–300 U/L 范围内的样品用 M65 EpiDeath® ELISA 检测,检测值<100 U/L 。
●  由于 M65 EpiDeath® 和 M65® ELISA 检测同一样品,检测值不一样,所以如果是特定的实验/项目,只能使用其中一种试剂盒。
●  M65 EpiDeath® 的检测范围是 0~5000U/L, M65® ELISA的检测范围是 125~2000U/L。

 


使用 M65 EpiDeath® 和 M30 Apoptosense® ELISA 确认细胞死亡形式

M65 EpiDeath® ELISA 和 M30 Apoptosense® ELISA 使用相同的捕获抗体,使用 M30 Apoptosense® 和 M65 EpiDeath® ELISA 检测 “M30:M65 比” (见Kramer et al., 2004) 希望反应细胞死亡形式。有些案例中,用 M30 Apoptosense® ELISA 检测,样品的值高于用 M65 EpiDeath® ELISA 检测, 可能反应了表位如何在复合体中递呈。


注意: “M30:M65 比” 只有在 K18 含量提升的样品(比如,用 M65 EpiDeath® ELISA 检测值>300 U/L )有意义。(见 Linder et al., Expert Reviews in Molecular Diagnostics 10, 353, 2010).

 

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PEVIVA

PEVIVA肿瘤及肝病上皮细胞死亡检测试剂盒



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产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
10020 M65® ELISA
细胞死亡M65 ®  ELISA试剂盒
96 wells

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