Cytiva思拓凡HisTrap HP, 5 x 5 ml

HisTrap HP, 5 x 5 ml

HISTRAP HP 5 X 5 ML

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17524802
描述:
HisTrap HP, 5 x 5 ml
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HisTrap HP是带有镍电荷的IMAC层析柱,用于高分辨率组氨酸标签蛋白纯化,具有高结合载量,可最大限度地回收。

产品特点

HisTrap HP预填充柱为组氨酸标记(His-tag)重组蛋白的制备纯化提供了一种快速,方便和重复性好的形式。

高分辨率:平均粒径为34μm

高载量:每毫升树脂至少可结合40毫克His标签蛋白

可忽略不计的镍泄漏:有助于保持活性和最大限度地减少蛋白质沉淀

广泛的试剂兼容性:兼容各种还原剂,去垢剂,变性剂和其他添加剂

方便的HiTrap形式:1毫升和5毫升预装柱,兼容注射器,蠕动泵或层析系统(如AKTA或其他FPLC系统)

产品维护

Ni柱的使用与保养

1. 对于一般的预装柱(Crude系列除外),上样前,样品需要使用0.22μm/0.45μm滤膜进行过滤或者离心处理,以避免样品中有细胞碎片等固体物质,堵塞柱子。

2. 如果细胞裂解后非常粘稠,需考虑是否因为DNA、RNA这类核酸物质过多,需要加入核酸酶去除,以降低样品粘稠度,提高上样速度及洗脱效果。

3. 柱子使用过程中,不能超过填料的压力,以免填料被压塌。

4.每次使用后,可使用5-10倍柱体积的纯水或者结合缓冲溶液对柱子进行清洗。(如果出现载量严重下降或者压力增加,需考虑彻底清洗)

CIP(彻底清洗)

常规柱子(除了Ni excel)如出现反压严重升高或者柱子明显颜色改变,说明柱子需要进行彻底的清洗。

1. 脱镍:

(1) 脱镍缓冲液:20mM 磷酸缓冲液,0.5M NaCl,50mM EDTA,pH 7.4。

(2) 使用5-10个柱体积的脱镍缓冲液冲洗柱子。

(3) 然后再用5-10个柱体积的水冲洗柱子。

2. 去除沉淀蛋白、疏水性蛋白及脂蛋白:将柱子置换到1M NaOH中,室温1-2小时(若需要去除内毒素可延长至12小时),再用5-10个体积去离子水冲洗。

3. 去除强离子吸附蛋白:使用1.5M NaCl洗柱子,约10-15分钟,然后用大约10个体积去离子水冲洗。